簡介：東南大學(xué)碩士學(xué)位論文蛋白酶體抑制劑DCI對胃癌細(xì)胞生物學(xué)效應(yīng)的體外實(shí)驗(yàn)姓名費(fèi)正華申請學(xué)位級別碩士專業(yè)內(nèi)科學(xué)（腫瘤學(xué)）指導(dǎo)教師姜藻20070606東南大學(xué)碩士學(xué)位論文的降解，而DCI可以抑制IKB蛋白泛素化降解，增強(qiáng)其表達(dá)。結(jié)論1DCI可抑制人胃癌BGC823細(xì)胞增殖并促進(jìn)其凋亡，在此過程中P38MAPK通路激活發(fā)揮重要作用。2低濃度的DCI對胃癌細(xì)胞增殖無影響，但可以增強(qiáng)順鉑對BGC823細(xì)胞的敏感性，可能與DCI可以抑制I．KB蛋白泛素化降解相關(guān)。關(guān)鍵詞胃癌；蛋白酶體抑制劑；順鉑；P38MA_PK；IZBⅡ

簡介：學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外。論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得壺昌太堂或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名掏茗F如簽字同期2爿5年√月么日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解直墾太堂有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)直昌太堂可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編本學(xué)位論文。同時授權(quán)中國科學(xué)技術(shù)信息研究所和中國學(xué)術(shù)期刊光盤版電子雜志社將本學(xué)位論文收錄到中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫和中國優(yōu)秀博碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫中全文發(fā)表，并通過網(wǎng)絡(luò)向社會公眾提供信息服務(wù)。保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書學(xué)位論文作者簽名手寫聊期艫Ⅲ日導(dǎo)師簽，‘手寫_乏獺搟R鞭山FJ每支具壚。摘要驗(yàn)組分別加入蛋白質(zhì)合成抑制劑放線菌酮后，WESTERNBLOT方法檢測PUMA蛋白的表達(dá)變化情況；RTPCR方法檢測PUMA及凋亡相關(guān)基因BAX、BCL．2的MRNA的表達(dá)變化；分光光度法檢測細(xì)胞的CASPASE．3活性變化。結(jié)果經(jīng)PCR及測序結(jié)果表明，正確構(gòu)建野生型、突變型PUMA重組質(zhì)粒，PUMA基因第10位氨基酸的第28～30位堿基由TCC突變?yōu)镚CC，其他堿基均無突變。野生型、突變型PUMA重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HELA細(xì)胞熒光顯微鏡觀察到綠色熒光表達(dá)。WESTERNBLOT和RTPCR均檢測出目的基因的高表達(dá)。提示PUMA基因及其定點(diǎn)突變載體均構(gòu)建成功。在相同轉(zhuǎn)染效率的情況下，通過WESTERNBLOT分析野生型PUMA組和突變型PUMA組的表達(dá)水平，結(jié)果表明突變型PUMA蛋白比野生型PUMA蛋白有一個更高的穩(wěn)定狀態(tài)。在表達(dá)野生型和突變的PUMA細(xì)胞中我們通過實(shí)時定量PCR測量出同等量的PUMAMRNA，表明并不是由于轉(zhuǎn)染效率或不同的轉(zhuǎn)錄率導(dǎo)致的這種差異；接下來在轉(zhuǎn)染24H后誘導(dǎo)表達(dá)野生型和突變型的PUMA細(xì)胞中均加入蛋白質(zhì)合成抑制劑放線菌酮，然后對PUMA蛋白的降解進(jìn)行檢測，結(jié)果表明，由于我們改變了PUMA蛋白的磷酸化位點(diǎn)，導(dǎo)致突變型PUMA蛋白降解延遲、半衰期延長，提示10號位絲氨酸磷酸化在決定PUMA降解率上具有重要的作用；野生型PUMA質(zhì)粒、突變型PUMA質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染HELA細(xì)胞，在24、48小時后測定光密度值，結(jié)果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞轉(zhuǎn)染兩種質(zhì)粒后，細(xì)胞存活率隨著時間的延長逐漸下降，且轉(zhuǎn)染突變型PUMA質(zhì)粒在24、48小時的存活率均比野生型PUMA質(zhì)粒組低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義PO．05，這表明突變型PUMA對HELA細(xì)胞抑制增殖作用優(yōu)于野生型PUMA；通過PI及HOECHST33342染色后評價(jià)細(xì)胞核型，計(jì)算被轉(zhuǎn)染細(xì)胞中的早期和晚期凋亡細(xì)胞數(shù)。轉(zhuǎn)染24H后，轉(zhuǎn)染突變型PUMA組在GFP陽性細(xì)胞中有22．5％的細(xì)胞出現(xiàn)凋亡，空載體組只有11．8％，相比轉(zhuǎn)染野生型PUMA組細(xì)胞中增加了約9．2％的細(xì)胞凋亡，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義PO．05。而隨著轉(zhuǎn)染PUMA在細(xì)胞中表達(dá)時間的延長，48H后突變型PUMA組比轉(zhuǎn)染野生型PUMA組細(xì)胞凋亡增加了約9．5％，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義PO．05。流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，隨著PUMA轉(zhuǎn)染時間的增加，野生型和突變型兩組腫瘤細(xì)胞的凋亡率均逐漸升高，并且突變型組細(xì)胞比野生型組細(xì)胞的凋亡率增加更加明顯，這與核染色結(jié)果相似。轉(zhuǎn)染突變型PUMA質(zhì)粒作用HELA細(xì)胞，在0、6、12、24、36、48小時，

簡介：中山大學(xué)博士后出站報(bào)告一、利用SIRNA抑制HEPG2和K562細(xì)胞CYCLINDL表達(dá)對其生物學(xué)特性的影響二、甲異靛抗腫瘤作用及機(jī)理的研究博士后王一專業(yè)腫瘤學(xué)合作導(dǎo)師劉宗潮教授姜文奇教授中山大學(xué)腫瘤防治中心廣州510060二零零六年三月廣州博士后出站報(bào)告王一摘要【背景L細(xì)胞周期素D1CDL是調(diào)控細(xì)胞周期的重要分子。CDL在多數(shù)惡性腫瘤細(xì)胞中高表達(dá)，是影響腫瘤預(yù)后的獨(dú)立因素，因此CDL可能成為抗腫瘤治療的靶點(diǎn)。RNA干擾因?yàn)閷δ康幕蛞种谱饔玫母咝院吞禺愋?，而受到人們的高度關(guān)注。本研究采用SIRNA方法沉默腫瘤細(xì)胞中CDL的表達(dá)，并觀察其相關(guān)生物學(xué)特性的改變?！痉椒↙按照RNAI靶點(diǎn)原則，設(shè)計(jì)出可能對CDL有干擾作用的序列，體外合成發(fā)夾結(jié)構(gòu)，并將其連接到含U6啟動子的質(zhì)粒PGE1上。將質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染到HEPG2和K562細(xì)胞中，利用RTPCR篩選出對HEPG2和K562細(xì)胞的CDL有抑制作用的重組質(zhì)粒。觀察HEPG2和K562細(xì)胞中CDL表達(dá)抑制后，細(xì)胞周期的變化。篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染質(zhì)粒的細(xì)胞，并觀察穩(wěn)定轉(zhuǎn)染PGESIRNACDL可抑制HEPG2和K562細(xì)胞中CDL表達(dá)的重組質(zhì)粒后，HEPG2和K562細(xì)胞中CDL在MRNA和蛋白水平上的表達(dá)。觀察HEPG2和K562細(xì)胞穩(wěn)定轉(zhuǎn)染PGESIRNACDL后細(xì)胞生長情況的改變，對VPL6敏感性和VPL6誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡情況的變化?！窘Y(jié)果】設(shè)計(jì)出4個可能干擾序列，按照PGE一1質(zhì)粒的要求將其連接到PGE一1，轉(zhuǎn)染細(xì)胞后發(fā)現(xiàn)，含片段1命名為PGESIRNACDL重組質(zhì)?？擅黠@抑制HEPG2和K562細(xì)胞表達(dá)CDL，可增加G1期細(xì)胞的比例。HEPG2和K562細(xì)胞穩(wěn)定轉(zhuǎn)染PGESIRNACDL后，CDLMRNA和蛋白水平表達(dá)均明顯降低，HEPG2和K562細(xì)胞CDL表達(dá)降低后，其細(xì)胞增殖速度亦明顯減慢；PGESIRNACDL的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染提高HEPG21

簡介：Y998188分類號嬰Z坐單位代碼10159學(xué)號200316118中回鏨升夫零博士學(xué)位論文題目蛋白激酶A對膀胱移行細(xì)胞癌的生物學(xué)調(diào)控THEMECHANISMOFREGULATIONOFCELLCYCLEANDPROLIFERATIONOFTRANSITIONALCELLCARCINOMAOFBLADDERBYPROTEINKINASEA學(xué)科專業(yè)叢盤堂論文課題起止時間2堂主2基二蘭塑壘堡旦論文完成時間2堂主蘭旦蛋白激酶A對膀胱移行細(xì)胞癌的生物學(xué)調(diào)控前言膀胱癌是泌尿外科最常見的惡性腫瘤，通常采用經(jīng)尿道電切術(shù)或膀胱部分切除術(shù)進(jìn)行治療，具有較高的復(fù)發(fā)率，術(shù)后常規(guī)進(jìn)行膀胱灌注和膀胱鏡隨訪是膀胱癌治療過程中不可分割的一部分。目前，膀胱癌的發(fā)生機(jī)制尚不明確。真核細(xì)胞的分裂和增殖依賴于細(xì)胞周期的精確調(diào)控，腫瘤細(xì)胞參與調(diào)控細(xì)胞周期的基因發(fā)生突變，使細(xì)胞分裂失去正常的調(diào)控。生長因子及其受體參與調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的增殖，是研究最多的膀胱腫瘤標(biāo)記物，其中包括表皮生長因子及其受體，胰島素樣生長因子及其受體，血管內(nèi)皮生長因子及其受體。轉(zhuǎn)化生長因子及其受體等。上述標(biāo)記物在膀胱移行細(xì)胞癌中高表達(dá)，參與調(diào)節(jié)腫瘤的新陳代謝和增殖，并與分期、分級和預(yù)后相關(guān)。目前對于生長因子及其受體的信號傳導(dǎo)通路的下游研究較少，而位于其下游的蛋白激酶對于信號的傳導(dǎo)起著至關(guān)重要的作用，是信號傳導(dǎo)鏈條中的軸心部分，通過蛋白激酶激活其它具有生物學(xué)活性的酶，發(fā)揮調(diào)節(jié)細(xì)胞新陳代謝和增殖的作用。細(xì)胞因子及其受體對細(xì)胞新陳代謝和增殖的調(diào)節(jié)歸根結(jié)底要靠蛋白激酶的激活來完成。因此，研究蛋白激酶對于了解生長因子及其受體的作用機(jī)制具有重要意義。目前認(rèn)為外界因素對細(xì)胞分裂主要有兩個調(diào)控點(diǎn)RESTRICTIONPOINT一是處于G1／S轉(zhuǎn)折點(diǎn)，控制細(xì)胞從靜止?fàn)顟B(tài)G。期進(jìn)入DNA合成期S期；另一調(diào)控點(diǎn)處于CVM轉(zhuǎn)折點(diǎn)，是決定細(xì)胞一分為二的控制點(diǎn)。非增殖狀態(tài)的細(xì)胞處于GO期，在某些刺激因素如生長因子的誘導(dǎo)下，細(xì)胞由GO期進(jìn)入S期。PICA是第二信使CAMP依賴的蛋白激酶，是細(xì)胞內(nèi)參與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路上重要的激酶，參與調(diào)節(jié)細(xì)胞的分化和增殖、離子轉(zhuǎn)運(yùn)、新陳代謝的調(diào)節(jié)、基因轉(zhuǎn)錄等過程。PKA信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)是由受體、GTP結(jié)合蛋白GTPBINDING

簡介：目的胎兒是同種異基因產(chǎn)物，它攜帶被母體認(rèn)為是外源的父系MHC分子，但卻能抵御母體免疫細(xì)胞的攻擊并在妊娠中存活，這其中的機(jī)制至今仍不十分清楚。八十年代末，STARKEY和KING發(fā)現(xiàn)妊娠子宮中有大量CD56BRIGHTNK細(xì)胞，其特殊的分布狀態(tài)和功能使人們認(rèn)識到子宮NK細(xì)胞可能參與了胚胎的植入和母胎界面免疫平衡的維持。盡管目前對這個過程中的許多環(huán)節(jié)尚不清楚，但已初步證實(shí)，子宮NK細(xì)胞UNK細(xì)胞的數(shù)量或功能失調(diào)與病理性妊娠如流產(chǎn)和先兆子癇等密切相關(guān)。研究UNK細(xì)胞在妊娠中的分布與機(jī)能，探討妊娠期外周血NK細(xì)胞PNK細(xì)胞和UNK細(xì)胞生物學(xué)特性的差異，揭示UNK細(xì)胞在子宮微環(huán)境中的生理功能及其對母胎界面免疫平衡網(wǎng)絡(luò)的影響，有利于人們進(jìn)一步認(rèn)識妊娠這一生理過程，并為臨床最終治療病理性妊娠提供了新的思路。本實(shí)驗(yàn)以妊娠早期PNK細(xì)胞、UNK細(xì)胞、蛻膜組織與滋養(yǎng)層組織作為主要的研究對象，達(dá)到以下研究目的1研究妊娠子宮微環(huán)境中UNK細(xì)胞表面NKG2A和NKG2D及其相應(yīng)配體的表達(dá)，探討NKG2A與NKG2D的不平衡表達(dá)在母胎界面免疫耐受形成中的作用。2研究妊娠期子宮微環(huán)境中子宮NK細(xì)胞的生物學(xué)特性，探討UNK細(xì)胞與周圍的蛻膜組織及滋養(yǎng)層組織的生理功能及相互作用，比較妊娠子宮NK細(xì)胞與外周血NK細(xì)胞在生理學(xué)功能上的差異。方法1選擇30例孕6～9周的正常妊娠婦女，分離其新鮮蛻膜組織，除去絨毛，分離蛻膜和外周血淋巴細(xì)胞，采用流式細(xì)胞儀測定NK細(xì)胞在蛻膜淋巴細(xì)胞和外周血淋巴細(xì)胞的分布及其表面NKG2A與NKG2D的表達(dá)，比較30例早孕婦女與30例未孕婦女外周血NK細(xì)胞表面NKG2A與NKG2D表達(dá)的差異；RTPCR技術(shù)檢測早孕婦女滋養(yǎng)層組織中HLAEMRNA和MICAMRNA的表達(dá)。2無菌取早孕婦女新鮮蛻膜組織及外周血標(biāo)本，除去蛻膜組織中的絨毛，分離蛻膜淋巴細(xì)胞，同時分離外周血淋巴細(xì)胞，免疫磁珠技術(shù)純化UNK細(xì)胞與PNK細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測其純度，MTT法檢測UNK細(xì)胞與PNK細(xì)胞對K562的殺傷，效靶比分別為51，251，1251，06251。MTT法檢測UNK細(xì)胞與PNK細(xì)胞在4H，24H，48H，72H和96H的增殖情況。RTPCR技術(shù)檢測UNK細(xì)胞與PNK細(xì)胞趨化、侵襲、促血管形成等生物學(xué)活性相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄水平，同時檢測其相應(yīng)配體在蛻膜組織和滋養(yǎng)層組織的表達(dá)狀況。結(jié)果1妊娠子宮蛻膜淋巴細(xì)胞中NK細(xì)胞約占70％，流式細(xì)胞分析的結(jié)果顯示，UNK細(xì)胞NKG2A的表達(dá)水平顯著高于PNK細(xì)胞，分別為9786％±175％與3335％±1092％X±S，二者差異有顯著性P＜005，在滋養(yǎng)層細(xì)胞中檢測到其配體HLAE的表達(dá)；而與PNK細(xì)胞相比，UNK細(xì)胞表面NKG2D的表達(dá)與之較為相近，分別為9321％±452％與9780％±172％，但二者仍有顯著性差異P＜005，在滋養(yǎng)層組織未檢測到其相應(yīng)配體MICAMRNA的表達(dá)。未孕婦女PNK細(xì)胞表面NKG2A和NKG2D的表達(dá)分別為3350％±845％與9860％±118％，與早孕婦女相比無顯著性差異P＜005。2經(jīng)CD56免疫磁珠處理后所獲得的UNK細(xì)胞CD56BRIGHTCD3與PNK細(xì)胞CD56DIMCD3純度95％。21MTT法檢測UNK細(xì)胞與PNK細(xì)胞對K562細(xì)胞的殺傷活性，發(fā)現(xiàn)在效靶比為51，251，1251，06251的條件下，UNK細(xì)胞的殺傷活性遠(yuǎn)低于PNK細(xì)胞。22MTT法檢測UNK細(xì)胞與PNK細(xì)胞在4H，24H，48H，72H和96H的增殖情況，發(fā)現(xiàn)UNK細(xì)胞的增殖活性略高于PNK細(xì)胞。23UNK細(xì)胞與PNK細(xì)胞均表達(dá)趨化因子受體CCR1，CCR5，CCR7，CXCR2，CXCR4和CX3CR1MRNA，且表達(dá)強(qiáng)度相近，其中CXCR4和CX3CR1MRNA的表達(dá)水平較高。24UNK細(xì)胞與PNK細(xì)胞均檢測到VEGFA、VEGFB、VEGFC和VEGFEMRNA的表達(dá)，UNK細(xì)胞還表達(dá)PIGF和ANG2MRNA，同時蛻膜組織可表達(dá)VEGFR1，VEGFR2，VEGFR3，TIE1和TIE2MRNA，但在滋養(yǎng)層組織中僅檢測出VEGFR2和TIE2MRNA的表達(dá)。25一些與血管形成相關(guān)的因子如HOMEOBOXB3，COX2，HIFΑ1，TGFΒ1和TGFΒ3MRNA也在UNK細(xì)胞與PNK細(xì)胞表達(dá)，INOSMRNA僅在UNK細(xì)胞中檢出。26UNK細(xì)胞還檢測到TIMP1，TIMP2和TIMP3MRNA的表達(dá)。此外，發(fā)現(xiàn)UNK細(xì)胞中還表達(dá)OPN，PERFIN，GRANZYME，TNFΑ和FASLIGMRNA。結(jié)論1蛻膜中的淋巴細(xì)胞主要為NK細(xì)胞，其免疫學(xué)表型與PNK細(xì)胞有較大的區(qū)別，妊娠期UNK細(xì)胞表面高表達(dá)抑制性受體NKG2A，同時滋養(yǎng)層組織表達(dá)相應(yīng)的配體HLAE，這可能是維持母胎界面免疫耐受的重要因素。早孕婦女PNK細(xì)胞NKG2A和NKG2D的表達(dá)水平與未妊娠者相似，可見妊娠期PNK細(xì)胞NKG2A和NKG2D的表達(dá)較未妊娠時并無明顯變化。此外，UNK細(xì)胞NKG2A的表達(dá)水平較PNK細(xì)胞顯著升高，NKG2D的表達(dá)水平與之較為接近，提示UNK細(xì)胞與PNK細(xì)胞可能源于相同的前體細(xì)胞，由于二者的發(fā)育分化環(huán)境不同導(dǎo)致了表型和功能的差異。2妊娠期UNK細(xì)胞與PNK細(xì)胞的表型、增殖和殺傷活性有較大不同，其某些細(xì)胞因子及其受體的表達(dá)狀況與妊娠早期UNK細(xì)胞在蛻膜中的募集和生理學(xué)功能有關(guān)。妊娠期外周血NK細(xì)胞在生理功能上與UNK細(xì)胞有較大相似性，它能產(chǎn)生多種生物活性因子，參予正常妊娠的維持，但與PNK細(xì)胞相比，UNK細(xì)胞有更強(qiáng)的促血管形成能力，因此被認(rèn)為在母胎界面的血管重建中發(fā)揮重要功能。由此可見，UNK細(xì)胞是一群具有較強(qiáng)調(diào)節(jié)功能的NK細(xì)胞亞群，它通過表面受體或配體與蛻膜組織或滋養(yǎng)層組織表達(dá)的配體或受體相互作用，直接或通過分泌一系列細(xì)胞因子調(diào)控母胎界面的血管重建及胎盤與滋養(yǎng)層組織的生長和發(fā)育，并同時參與母胎界面的免疫耐受的維持，使胚胎得以順利植入，它是維持胚胎正常發(fā)育的物質(zhì)基礎(chǔ)。

簡介：目的研究臍帶血中CD34／CDL33／VEGFR3淋巴管內(nèi)皮祖細(xì)胞經(jīng)VEGFC誘導(dǎo)向淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞分化過程中細(xì)胞表面形態(tài)、內(nèi)部結(jié)構(gòu)和特征性抗原標(biāo)志物等生物學(xué)特征的變化，探討淋巴管內(nèi)皮祖細(xì)胞向內(nèi)皮細(xì)胞分化的機(jī)制。方法從臍靜脈中采取臍帶血，用PERCOLL密度梯度離心法分離單形核細(xì)胞，再用抗VEGFR3抗體標(biāo)記，然后用流式細(xì)胞儀分選VEGFR3內(nèi)皮祖細(xì)胞。用含有15％FBS、100IU／ML青霉素和100MGL鏈霉素的DMEM培養(yǎng)液對分選后的VEGFR3內(nèi)皮祖細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。通過VEGFC誘導(dǎo)，使VEGFR3內(nèi)皮祖細(xì)胞向內(nèi)皮細(xì)胞分化。在倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)的變化。在掃描電鏡和透射電鏡下觀察細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)超微結(jié)構(gòu)的變化。在共聚焦激光掃描顯微鏡下觀察特征性標(biāo)志物的表達(dá)變化。結(jié)果從臍帶血中分選出的VEGFR3內(nèi)皮祖細(xì)胞同時表達(dá)CD34和CDL33。剛分選出的CD34／CDL33／VEGFR3淋巴管內(nèi)皮祖細(xì)胞呈圓形或橢圓形，胞質(zhì)中含有較多的線粒體和粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。這兩種細(xì)胞器的斷面面積和與細(xì)胞質(zhì)的面積比約為3％。經(jīng)VEGFC誘導(dǎo)后2D，細(xì)胞呈梭形，出現(xiàn)頭部和尾部。頭部較寬，從頭部伸出板狀偽足和數(shù)個絲狀偽足。絲狀偽足呈錐狀，長短不一。誘導(dǎo)后7D，多數(shù)細(xì)胞更加伸展。從細(xì)胞頭部伸出寬大、扁薄的板狀偽足，從板狀偽足伸出許多絲狀偽足。絲狀偽足長約為3～5GM，排列密集而規(guī)則。板狀偽足表面可觀察到散在的微絨毛，長約15～2GM。與剛分選出的淋巴管內(nèi)皮祖細(xì)胞比較，誘導(dǎo)后7D的細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中含有更豐富的線粒體和粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。這兩種細(xì)胞器的斷面面積和與細(xì)胞質(zhì)的面積比約為9％。胞質(zhì)中出現(xiàn)許多吞飲小泡。祖細(xì)胞標(biāo)志物CDL33表達(dá)減弱。經(jīng)VEGFC誘導(dǎo)后14D，細(xì)胞體積變大，呈梭形或多邊形，呈現(xiàn)內(nèi)皮細(xì)胞的形態(tài)特征，細(xì)胞和細(xì)胞之間相互連接，呈單層排列。細(xì)胞偽足減少，表面可見許多散在分布的細(xì)胞小凹和微絨毛。胞質(zhì)中可觀察到有膜包被的WEIBELPALADE小體。細(xì)胞表達(dá)淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞特異性標(biāo)志物L(fēng)YVE1和5核苷酸酶，CDL33表達(dá)消失。結(jié)論臍帶血中存在CD34／CDL33／VEGFR3淋巴管內(nèi)皮祖細(xì)胞，這些細(xì)胞在VEGFC誘導(dǎo)作用下可能通過VEGFC／VEGFR3信號途徑分化為淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞。在淋巴管內(nèi)皮祖細(xì)胞向淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞分化過程中，細(xì)胞的表面形態(tài)、內(nèi)部結(jié)構(gòu)和抗原標(biāo)志物發(fā)生了一系列特征性的變化。

簡介：781318碩士學(xué)位論文2005屆CD40配體在B細(xì)胞起源的惡性腫瘤中的異位表。達(dá)及其生輛學(xué)意義THEECTOPICEXPRESSIONOFCD40LIGANDINBCELLLORIGINATEDMALIGNANCIESANDITSBIOLOGICALCHARACTERISTICS研究生姓名指導(dǎo)教師姓名申請學(xué)位級別專業(yè)名稱研究方向論文提交日期陶怡張學(xué)光醫(yī)學(xué)碩士免疫學(xué)腫瘤免疫2005年5月￡旦Q酲奎查旦鲴照起涯轂蔞世艘擅生的是僮垂藍(lán)厘甚生翅生重豎蟲塞埕鏨1EBV感染對多發(fā)性骨髓瘤㈣細(xì)胞表型和生物學(xué)的影響通過流式細(xì)胞術(shù)檢測LO例刪新鮮標(biāo)本，顯示2、5、9、10號標(biāo)本有CD40和CD401。共表達(dá)現(xiàn)象。其中5、10號標(biāo)本呈CD40和CD40L高度共表達(dá)。運(yùn)用EBV體外感染刪細(xì)胞株1_PML8266，通過檢測EBV的病毒抗原LMPJ和EBNA～2，首次發(fā)現(xiàn)EBV體外能感染瀾細(xì)胞。感染后細(xì)胞在MRNA和蛋白水平上調(diào)CD40L表達(dá)，并且這種上調(diào)可能參與感染后細(xì)胞抗凋亡效應(yīng)。而且，共聚焦顯微鏡定位檢測表明CD40、CD40L和LMPL分子兩兩能在感染細(xì)胞表面共聚集。此外，EBV感染能上調(diào)RPML8226細(xì)胞趨化因子受體CXCR4表達(dá)，并且在趨化因子SDFIA存在情況下，感染后細(xì)胞遷移率提高。眾所周知，細(xì)胞的抗凋亡能力和遷移擴(kuò)散能力是腫瘤惡性特征的重要表現(xiàn)，由此推測，EBV作為砌起源的一種高危因素，有可能通過體內(nèi)感染生發(fā)中心B細(xì)胞使其轉(zhuǎn)化產(chǎn)生抗凋亡的效應(yīng)和提高細(xì)胞離外周血的遷移能力，從雨參與洲的發(fā)生和發(fā)展。2B淋巴瘤細(xì)胞CD40和CD40L共表達(dá)的生物學(xué)意義選取兩株B淋巴瘤細(xì)胞株DAUDI、RAJI作進(jìn)一步研究。流式細(xì)胞術(shù)檢測顯示兩株細(xì)胞表面都有CD40和CD40L高度共表達(dá)。激光共聚集顯微鏡定位顯示CD40和CB40L可以在BAUDI和RAJI細(xì)胞表面共聚集。用科室自行研制的阻斷經(jīng)抗體CD40MAB3G3J或CD40LMAB4FI分別阻斷CD40CD40L信號傳導(dǎo)，結(jié)果表明在不同細(xì)胞株上，抗體以劑量依賴性的方式抑制細(xì)胞生長、增殖和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。由此得出結(jié)論，DAUDI和RAJI細(xì)胞上CD40和CD40L共表達(dá)和共聚集有利于腫瘤細(xì)胞的存活、生長和增殖，并產(chǎn)生抗凋亡的效應(yīng)，為臨床應(yīng)用腫瘤免疫治療提供了新靶點(diǎn)。關(guān)鍵詞CD40CD40配體多發(fā)性骨髓瘤；EBVLMPLCXCR；信號傳導(dǎo)B淋巴瘤作者陶怡指導(dǎo)教師張學(xué)光教授IL

簡介：蘭州大學(xué)碩士學(xué)位論文鹽酸小檗堿對人牙周膜細(xì)胞生物學(xué)活性及大鼠牙周組織IL1Β、TNFΑ表達(dá)的影響姓名張小恒申請學(xué)位級別碩士專業(yè)口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師余占海20070601蘭州大學(xué)碩士學(xué)位論文4、鹽酸小檗堿對牙周膜細(xì)胞ALP活性的影響鹽酸小檗堿組B，C組細(xì)胞培養(yǎng)液中ALP活性均明顯高于對照組P005，而鹽酸小檗堿組扎D，E組與對照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，5、牙周炎組牙周組織中IL113、TNFQ表達(dá)明顯高于正常組PO05；各時間段牙周炎治療組牙周組織中ILLS、TNFA表達(dá)明顯低于牙周炎組PO05，但牙周炎治療組各時間段之間IL113、TNFQ表達(dá)無明顯差異。結(jié)論玻片覆蓋法可顯著提高人牙周膜細(xì)胞原代培養(yǎng)的成功率。鹽酸小檗堿在一定濃度范圍內(nèi)1020MG／L能提高牙周膜細(xì)胞的增殖活性、蛋白合成及ALP活性。大鼠實(shí)驗(yàn)性牙周炎模型牙周組織中TNFA、IL一113含量較正常對照組明顯升高，應(yīng)用鹽酸小檗堿能抑制實(shí)驗(yàn)性牙周炎模型牙周組織中TNFQ、IL一1B的表達(dá)。根據(jù)上述結(jié)果證實(shí)鹽酸小檗堿可促進(jìn)創(chuàng)傷愈合和組織再生，從而為牙周病臨床的合理用藥提供科學(xué)依據(jù)。關(guān)鍵詞鹽酸小檗堿，人牙周膜細(xì)胞，堿性磷酸酶，TNFQ，牙周炎模型

簡介：南京醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文體外培養(yǎng)人臍血單個核細(xì)胞生物學(xué)活性的初步研究姓名王宏申請學(xué)位級別碩士專業(yè)臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)指導(dǎo)教師潘世揚(yáng)20050418南京醫(yī)科大學(xué)碩學(xué)位論文GVTGVLGVHDHSCNCSNSNSTPBPBSCTPHA靛光實(shí)時定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)GRAFTVEFSUSTUMOR移植耱撬_|L申籀GRAFTVERSUSLEUKEMIA移植物抗白血病GRAFTVERSUSHOSTDISEASE移植物抗宿主病HEMATOPOIETICPROGENIFOREELL造血祖細(xì)胞HEMATOPOIETICSTEMCELL遣血于細(xì)胞MIXEDCHIMERISILL混合嵌合體MONONUCLEARCELL單個核細(xì)胞NEWBORNCALFSERUM麓生牛血清NORMLSODIUM生理鹽水NONMYELOABLATIVEALLOGENEICSTEMEELLTRANSPLANTATION非清靜掛異基躅造血于紐，瞧移植PERIPHERALBLOOD外周血PERIPHERALBLOODSTEMEELLTRANSPLANTATION外周血干細(xì)胞移植PHYTOHEMAGGLUTININ棱妨血凝素M2

簡介：分類號密級國際十進(jìn)分類號（UDC）第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)位論文大鼠肝干細(xì)胞和肝癌干細(xì)胞間生物學(xué)特性差異分析及相關(guān)分子調(diào)控機(jī)制研究（題名和副題名）劉衛(wèi)輝（作者姓名）指導(dǎo)教師姓名竇科峰教授（主任醫(yī)師）指導(dǎo)教師單位第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院肝膽胰脾外科申請學(xué)位級別博士專業(yè)名稱外科學(xué)（普外）論文提交日期201204答辯日期201205論文起止時間2009年09月至2012年05月學(xué)位授予單位第四軍醫(yī)大學(xué)大鼠肝干細(xì)胞和肝癌干細(xì)胞間生物學(xué)特性差異分析及相關(guān)分子調(diào)控機(jī)制研究大鼠肝干細(xì)胞和肝癌干細(xì)胞間生物學(xué)特性差異分析及相關(guān)分子調(diào)控機(jī)制研究研究生劉衛(wèi)輝學(xué)科專業(yè)外科學(xué)（普外）所在單位第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院肝膽胰脾外科導(dǎo)師竇科峰教授（主任醫(yī)師）輔導(dǎo)教師陶開山教授（主任醫(yī)師）資助基金項(xiàng)目國家自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目（81030010）國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目（81170419）國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目（81172061）國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目（30772102）國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目（30772094）關(guān)鍵詞肝干細(xì)胞；肝癌干細(xì)胞；生物學(xué)特性；正常分化；分化受阻；惡性轉(zhuǎn)化；小分子RNAS。中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)二O一二年四月

簡介：≥話爻魚太普博士學(xué)位論文DOCTORALDISSERTATLON丑U論叉題目量巨塑墮墮堡、塑塑坌塑量基笙塑堂焦些擔(dān)羨墮坌塹學(xué)科專業(yè)墅堡墮堂皇墮墮堂作者姓名工墮墼指導(dǎo)教師墮塞塑塑堡答辯日期呈旦蛆生生旦一上海交通大學(xué)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)上海交通大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密口，在年解密后適用本授權(quán)書。本學(xué)位論文屬于，不保密留。請?jiān)谝陨戏娇騼?nèi)打“4”學(xué)位論文作者簽名丁擴(kuò)圣勇乞指導(dǎo)教師簽名學(xué)位論文作者簽名J，I芝鍛，指導(dǎo)教師簽名日期嚷，年}月E日7日期O孕年畢月甲日

簡介：復(fù)旦大學(xué)博士學(xué)位論文PI3KAKTMT信號傳導(dǎo)通路對DLBCL細(xì)胞生物學(xué)行為影響及其對BCL6表達(dá)的調(diào)控姓名張鐵成申請學(xué)位級別博士專業(yè)腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師施達(dá)仁20070406復(fù)旦大學(xué)博士研究生畢業(yè)論文中文摘要中文摘要P13呲／IT孤信號傳導(dǎo)通路對DLBCL細(xì)胞生物學(xué)行為影響及其對BCL6表達(dá)的調(diào)控目的觀察三株彌漫大B細(xì)胞性淋巴瘤DIFFUSELARGEBCELLLYMPHOMADLBCL細(xì)胞株中AKT及磷酸卅CAKTPAKT，PHOSPHAAKT表達(dá)狀態(tài)及其對DLBCL細(xì)胞生物學(xué)行為的影響；探討DLBCL細(xì)胞中AKT調(diào)控細(xì)胞周期的可能機(jī)制；觀察P13K抑制劑LY294002對DLBCL化療增敏作用；觀察AKT激活狀態(tài)與BCL6表達(dá)的關(guān)系及可能的調(diào)控機(jī)制方法分別采用P13K抑制劑LY294002、MTORMAMMALIANTARGETOFRAPAMYCIN抑制劑RAPAMYCIN抑制P13K／AKT信號傳導(dǎo)通路，采用胰島素刺激P13K／L【T信號傳導(dǎo)通路；采用WESTERNBLOTTING檢測DL8CL細(xì)胞株LYL、LYS、LYLO在不同狀態(tài)下AKT、PAKT、PS6K1、PCSK3、CYCLINDL、P27M1、P21”、PEIF46、PEIF4E和BCL6的表達(dá)；應(yīng)用阿霉素DOXORUBICIN與LY294002聯(lián)用探討LY294002在DLBCL中的化療增敏效果；采用流式細(xì)胞術(shù)結(jié)合PI單染分析細(xì)胞周期、結(jié)合ANNEXINVFITC染色檢測細(xì)胞凋亡、結(jié)合BRDU法觀察細(xì)胞增殖狀態(tài)的改變。結(jié)果1三株DLBCL細(xì)胞株在不同的培養(yǎng)條件下均顯示有PAKT，即AKT呈活化狀態(tài)，LY8和LYLO在IO％FBS培養(yǎng)下PBKT水平高于無血清培養(yǎng)，而LYL相反，在無血清培養(yǎng)下PAKT略高于有血清培養(yǎng)；2在有血清培養(yǎng)下，LY294002可明顯降低三株細(xì)胞PAKT水平，并顯示S期細(xì)胞明顯減少PM鯽L，6061期細(xì)胞增加，增殖細(xì)胞比例顯著降低PM嘲I，以細(xì)胞株LY8、LYL0尤為明顯，但凋亡細(xì)胞無明顯增加砂髓瑚；3在有血清培養(yǎng)下，胰島素都可以提高AKT磷酸化水平，但并不能引起DLSCL細(xì)胞株細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞增殖等細(xì)胞生物學(xué)行為變化夥口05；4RAPAMYCIN可以明顯降低S6K1磷酸化水平，但提高了AKT磷酸化水平刑I嘲I，亦未引起DLBCL細(xì)胞株細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞增殖等的細(xì)胞生物學(xué)行為改變乃N05；5三株DLBCL細(xì)胞株在LY294002作用后PGSK3，P27表達(dá)顯著增高PMOH3、CYCLINDL表達(dá)顯著降低PM嘲L，P2L”表達(dá)不受LY294002作用的影響，LY294002作用前后三株細(xì)胞中均無表達(dá)6LY294002預(yù)處理序貫使用DOXO組中細(xì)胞凋亡的發(fā)生率比單獨(dú)使用LY294002、DOXO或同時聯(lián)合使用LY294002、DOXO均明顯提高，在24H、48H、72H1Y1或48H、72H1Y8或24H1YLO差異均呈顯著性P汜鯽；2

簡介：目的1對小鼠精原干細(xì)胞SPERMATOGONIALSTEMCELLS，SSCS的體外培養(yǎng)方法進(jìn)行研究，觀察SSCS體外的增殖能力及生物學(xué)特性，并對細(xì)胞表面相關(guān)標(biāo)志物進(jìn)行檢測，以期建立體外培養(yǎng)精原干細(xì)胞的培養(yǎng)體系，為精原干細(xì)胞深入研究提供實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ停?觀察小鼠精原干細(xì)胞在成骨培養(yǎng)條件下的生物學(xué)特征，初步探討其可能機(jī)制，為研究精原干細(xì)胞的多向分化能力奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)，同時可為其作為組織工程種子細(xì)胞提供初步的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法1骨髓基質(zhì)細(xì)胞飼養(yǎng)層制備用全骨髓法分離小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞。選取生后7～10D昆明系小白鼠雌雄不限，無菌條件下取出脛骨、股骨，分離骨髓基質(zhì)細(xì)胞，差速貼壁法進(jìn)行純化。以含有10％胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)6～7D后細(xì)胞鋪開成單層占瓶底達(dá)80％，換用含終濃度為10ΜGML絲裂霉素C的IMDM培養(yǎng)基處理，充分清洗后作為飼養(yǎng)層備用。2精原干細(xì)胞的純化培養(yǎng)及其鑒定通過兩步酶消化法從新生小鼠睪丸中收集睪丸細(xì)胞并培養(yǎng)。無菌取出生后6～8D雄性小鼠雙側(cè)睪丸，去白膜，隨后用1MGMLIV型膠原酶37℃消化10MIN，其間不斷搖動，直到生精小管散開，PBS清洗后，然后用025％胰蛋白酶002％EDTA在顯微鏡下控制消化時間，見生精小管段被解離成單細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán)時，用含10％胎牛血清的IMDM培養(yǎng)基終止消化，HANKS液清沈后，收集細(xì)胞，制成單細(xì)胞懸液，接種在用02％明膠包被的25CM2培養(yǎng)瓶中，置37℃，5％CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。在1H、3H、12H經(jīng)差速貼壁法去除非精原干細(xì)胞，收集較純的精原干細(xì)胞，制備單細(xì)胞懸液接種于上述制備好的骨髓基質(zhì)細(xì)胞飼養(yǎng)層中進(jìn)行培養(yǎng)；另外，接種前將少許細(xì)胞懸液滴片，進(jìn)行免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測精原干細(xì)胞的標(biāo)志物THY1。接種培養(yǎng)后在倒置相差顯微鏡下逐日觀察細(xì)胞形態(tài)及增殖特征，且對培養(yǎng)3D的精原干細(xì)胞用同法檢測表面標(biāo)記分子THY1。3精原干細(xì)胞在成骨培養(yǎng)條件下培養(yǎng)取培養(yǎng)3D的精原干細(xì)胞，用025％的胰酶消化，制成單細(xì)胞懸液，將其加入24孔培養(yǎng)板中，每孔加入濃度為5104ML的細(xì)胞懸液1ML培養(yǎng)24H后，隨機(jī)分組進(jìn)行培養(yǎng)。對照組用一般培養(yǎng)液IMDM100UML青霉素100UML鏈霉素10％胎牛血清培養(yǎng)精原干細(xì)胞，3～4D換液1次。實(shí)驗(yàn)組用成骨條件培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液中添加50MMOLLΒ甘油磷酸鈉，106MOLL地塞米松，50MGL維生素C，50NMOLL胰島素，20NMOLLBFGF誘導(dǎo)培養(yǎng)精原干細(xì)胞，3～4D換液1次。4結(jié)果檢測在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化并照相記錄；特定時間段對細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)分析細(xì)胞增殖行為；紫外分光光度儀動態(tài)檢測培養(yǎng)上清液的堿性磷酸酶活性ALKALINEPHOPHATASE，ALP；免疫熒光染色檢測細(xì)胞內(nèi)I型膠原的表達(dá)。5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用配對設(shè)計(jì)的均數(shù)T檢驗(yàn)對堿性磷酸酶活性檢測所得資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果1小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞呈成纖維細(xì)胞樣生長，突起相互交織，6～7D后鋪展開成單層達(dá)瓶壁底80％，經(jīng)絲裂霉素C處理后不再分裂增殖但保留了分泌功能；2精原干細(xì)胞在骨髓基質(zhì)細(xì)胞飼養(yǎng)層上培養(yǎng)3D后開始增殖，增殖的細(xì)胞呈鏈狀、簇狀、克隆樣生長，細(xì)胞間可見明顯的由于細(xì)胞未完全分裂形成的胞質(zhì)間橋。精原干細(xì)胞接種培養(yǎng)前滴片及培養(yǎng)3D后，檢測其表面標(biāo)記分子THV1均呈陽性反應(yīng)，且陽性率達(dá)90％以上。細(xì)胞的以上生長特點(diǎn)、形態(tài)學(xué)特征及免疫組化檢測均與精原干細(xì)胞的特性符合。3形態(tài)學(xué)特征變化對照組SSCS從第3D開始分裂增殖，第6D增殖細(xì)胞呈簇狀、鏈狀生長，9D后細(xì)胞增殖加快，12D后細(xì)胞增殖速度明顯增加，SSCS分裂形成的每個細(xì)胞團(tuán)的細(xì)胞數(shù)可達(dá)20個左右，在這些增殖的細(xì)胞中，細(xì)胞間橋仍明顯；實(shí)驗(yàn)組SSCS在條件培養(yǎng)液中培養(yǎng)，每時間段的細(xì)胞增殖均較對照組快，生長迅速的細(xì)胞，呈集落樣生長，12D時細(xì)胞增殖達(dá)高峰，增殖細(xì)胞之間缺乏明顯的連接，未見到明顯的胞質(zhì)間橋；細(xì)胞的形態(tài)呈現(xiàn)幼稚性細(xì)胞的變化，核質(zhì)比例大。4實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞進(jìn)行Ⅰ型膠原免疫熒光染色后，熒光顯微鏡下可見細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)綠色熒光，呈陽性反應(yīng)；對照組呈陰性。5培養(yǎng)上清液中的堿性磷酸酶活性實(shí)驗(yàn)組與對照組開始都很低，以后隨著培養(yǎng)時間的延長而逐漸增強(qiáng)，且實(shí)驗(yàn)組每時間段均高于對照組。應(yīng)用配對設(shè)計(jì)的均數(shù)T檢驗(yàn)對資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，T3441，P0026005，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)論1以原代培養(yǎng)的小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞飼養(yǎng)層，含10％的胎牛血清的IMDM培養(yǎng)基37℃、5％CO2、飽和濕度的條件培養(yǎng)精原干細(xì)胞，能較好的促進(jìn)精原干細(xì)胞在體外的非分化擴(kuò)增，這一方法有望成為精原干細(xì)胞體外培養(yǎng)的較好的培養(yǎng)體系，為精原干細(xì)胞深入研究提供理想的細(xì)胞模型；2精原干細(xì)胞在成骨培養(yǎng)條件下，能表現(xiàn)出成骨細(xì)胞的某些生物學(xué)特征，提示精原干細(xì)胞在一定的誘導(dǎo)條件下具有向成骨細(xì)胞轉(zhuǎn)化的趨勢，這為進(jìn)一步研究精原干細(xì)胞的多向分化潛能提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

簡介：間充質(zhì)干細(xì)胞（MESENCHYMALSTEMCELLMSC），是存在于成體骨髓中的一種干細(xì)胞。它具備干細(xì)胞的基本特性在體外條件下，已被成功地誘導(dǎo)為多種間質(zhì)細(xì)胞。MSCS還可以從臍血、胎盤、羊水、臍靜脈內(nèi)皮下層、外周血及肌肉等組織中分離得到，由于它們可以作為滋養(yǎng)層支持造血干細(xì)胞的生長，并且具有以下特點(diǎn)而日益引起人們的興趣1、在不同的理化環(huán)境和細(xì)胞因子的誘導(dǎo)下，MSCS具有可分化為成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、肌肉細(xì)胞甚至神經(jīng)元樣細(xì)胞等多系分化潛能；2、MSCS是造血支持細(xì)胞，作為滋養(yǎng)層支持造血干細(xì)胞的生長。由于具有易分離、擴(kuò)增以及體外操作簡便等特點(diǎn)，間充質(zhì)干細(xì)胞在組織工程、細(xì)胞移植、基因治療等領(lǐng)域的應(yīng)用前景十分廣闊。作為成體干細(xì)胞中的一種，臍血間質(zhì)干細(xì)胞（臍血MSCS）具有良好的多向分化潛能、活躍的增殖特性、對外源基因的高效轉(zhuǎn)染表達(dá)能力以及促進(jìn)造血、在體外較易分離、培養(yǎng)等特性，日益引起國內(nèi)外研究者的濃厚興趣。許多間質(zhì)組織中既有定型的間質(zhì)前體細(xì)胞MESENCHYMALPRECURSCELLSMPCS，又有未定型的間質(zhì)前體細(xì)胞。定型的間質(zhì)前體細(xì)胞，如骨骼肌中的星形細(xì)胞和脂肪組織中的脂肪前體細(xì)胞等只能在組織局部修復(fù)再生；未定型的間質(zhì)前體細(xì)胞，如成體骨骼肌中包含更為原始的星形細(xì)胞，體外培養(yǎng)條件下能夠分化為其他類型的間質(zhì)組織，如肌肉、骨、軟骨和脂肪等。在適當(dāng)?shù)恼T導(dǎo)條件下這些細(xì)胞可以多向分化為間質(zhì)譜系內(nèi)的各種細(xì)胞，如成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和骨骼肌細(xì)胞；跨系分化為外胚層的神經(jīng)細(xì)胞，內(nèi)胚層的肝細(xì)胞。臍血MSCS具有如下優(yōu)勢臍血MSCS資源豐富、細(xì)胞更加原始、擴(kuò)增能力更強(qiáng)；細(xì)胞采集比較簡單，不會對孕婦和胎兒造成痛苦或產(chǎn)生不良影響，易于接受；臍血比較清潔，傳播細(xì)菌、病毒的幾率極低；胎兒的免疫系統(tǒng)較為原始，臍血MSCS移植引發(fā)移植物抗宿主反應(yīng)GVHR的機(jī)會極低。因此臍血有希望成為繼骨髓后的又一人MSCS的適當(dāng)來源。近年來，因臍血MSCS的多向分化、免疫調(diào)節(jié)等作用逐步被發(fā)現(xiàn)而引起人們的廣泛關(guān)注，使其在細(xì)胞治療、基因治療、組織工程等領(lǐng)域展現(xiàn)出廣闊的應(yīng)用前景。而其免疫調(diào)節(jié)方面的作用則更引起人們的重視。臍血MSCS在移植免疫調(diào)節(jié)中的作用廣泛而復(fù)雜，其系具有擴(kuò)增髓系祖細(xì)胞和巨核系祖細(xì)胞、抑制淋巴系祖細(xì)胞的作用及支持造血的功能。而在對抗移植物抗宿主?。℅VHD）方面的與分泌細(xì)胞因子IL4、IFNΓ有一定關(guān)系；臍血MSCS上清細(xì)胞因子檢測提示IFNΓ含量較單獨(dú)培養(yǎng)T淋巴細(xì)胞低表達(dá)被認(rèn)為在GVHD發(fā)生中可能是臍血MSCS移植GVHD發(fā)生程度減輕的主要原因之一。研究了對于T淋巴細(xì)胞亞群的分析及其與某些細(xì)胞因子分泌之間是否有關(guān)聯(lián)，或是由于細(xì)胞因子的分泌影響某些抗體下調(diào)或上調(diào)機(jī)制，CD4CD28CD8CD28細(xì)胞數(shù)減少介導(dǎo)移植物抗白血?。–VL），卻不引起急性移植物抗宿主?。℅VHD）；臍血MSCS對K562細(xì)胞的殺傷效應(yīng)；以及與細(xì)胞外基質(zhì)相關(guān)聯(lián)系。這將有助于臨床預(yù)測移植物抗宿主?。℅VHD）發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，從而更好的預(yù)防和治療異基因造血干細(xì)胞移植（ALLHSCT）術(shù)后移植物抗宿主?。℅VHD）的發(fā)生。減少移植發(fā)病率和死亡率，提高受者生活質(zhì)量和長期存活率。

簡介：目的從氧化損傷和基因甲基化的角度，研究氡暴露對靶細(xì)胞的早期生物學(xué)效應(yīng)。尋找氡暴露人群的易感性標(biāo)記物，從而為氡危害的早期預(yù)防提供基礎(chǔ)資料。方法1以染氡大鼠和中國核工業(yè)總公司721礦的91名鈾礦工其中50名井下鈾礦工，24名地表鈾礦工，17名行政辦公工作人員作為研究對象。將雄性WISTAR大鼠隨機(jī)分為對照組、低、中和高4個劑量組，每組5只。暴露組大鼠整體暴露于HD3型多功能生態(tài)氡室，保持劑量率相對恒定。各組大鼠均于末次暴露后2～3H內(nèi)采樣檢測。分析10年該鈾礦的氡及其子體監(jiān)測資料，找出最佳監(jiān)測時段，在該時段內(nèi)采用固體核徑跡法對鈾礦工氡累積暴露水平進(jìn)行估測，再按與染氡大鼠累積暴露劑量相近的劑量分組。2測定各組職業(yè)人群與大鼠超氧化物歧化酶SOD活性和丙二醛MDA含量，觀察比較低、中和高劑量組和對照組SOD活性和MDA含量的差異。3用甲基化特異性PCRMSP檢測大鼠氣管支氣管上皮細(xì)胞中P16基因甲基化，探討其與氡子體累積暴露劑量的相互關(guān)系；同時研究鈾礦工痰細(xì)胞中P16基因和6氧甲基嘌呤DNA甲基轉(zhuǎn)移酶MGMT的甲基化，觀察比較基因甲基化率的變化趨勢與氡子體累積暴露劑量的關(guān)系。4利用片段性長度多態(tài)性聚合酶鏈反應(yīng)PCRRFLP檢測谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶P1GSTPL基因多態(tài)，比較基因型分布與P16和MGMT基因甲基化的關(guān)系。結(jié)果15月和9月的氡濃度水平接近年平均濃度，平均平衡因子F036。2職業(yè)流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果表明，各組的一般特征如性別、民族、年齡、工齡、工時、居住史、家族遺傳史在各組人群中的分布無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，表明各組均衡可比。3在對照組、低、中和高劑量職業(yè)氡暴露人群外周血中，SOD活性分別為1165±123UML、896±83UML、636±89U／ML和409±76UML，MDA含量分別為11±04MOL／ML、21±03NMOL／ML、33±05NMOL／ML和53±09MOL／ML，各組間差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P005。隨著氡子體累積暴露劑量的增加，SOD活性逐漸降低，MDA含量逐漸升高。在對照組、低、中和高劑量吸入染氡大鼠外周血中，SOD活性分別為139340±8830UML、119860±13244UML、119860±13244UML和109860±5090UML，MDA含量分別為053±013NMOL／ML、189±O13NMOL／ML、238±012NMOL／ML和288±O18NMOL／ML，各組間差別也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P005。隨著氡子體累積暴露劑量的增加，SOD活性逐漸降低，MDA含量逐漸升高。4鏈酶蛋白酶加機(jī)械刷洗法提取支氣管上皮細(xì)胞在19～76105，大鼠染毒劑量達(dá)到111工作水平月WLM時，出現(xiàn)P16基因甲基化。5隨著氡子體累積暴露劑量增加，P16基因甲基化率Z2844，P0005、MGMT基因甲基化率Z3034，P0002，兩個基因總甲基化率Z3859，PO0001均呈上升趨勢，且差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。6在70名鈾礦工中，GSTPL基因A105G位點(diǎn)的純合子ILEI1E42例，雜合子I1EVAL25例和純合子VALVAL3例。MGMT、P16基因甲基化率和總甲基化率分別為142％、86％和186％；與攜帶ILEILE人群相比，攜帶異常等位基因I1E／VAL與VAL／VAL的人群MGMT基因甲基化率和總甲基化率增加PO037，48，95％CI11210；P0016，51，95％CI14196。結(jié)論1在本實(shí)驗(yàn)條件下，氡及其子體對大鼠及鈾礦工人靶細(xì)胞產(chǎn)生氧化損傷和DNA甲基化，并存在一定的劑量反應(yīng)關(guān)系。2SOD與MDA可作為氡引起氧化損傷的早期生物學(xué)效應(yīng)指標(biāo)；P16和MGMT基因甲基化有望作為氡暴露的易感分子標(biāo)記物。3GSTPLA105G基因多態(tài)性與氡暴露引起MGMT基因與總甲基化的易感性有關(guān)。