簡(jiǎn)介：先天性垂體性侏儒癥是指下丘腦、垂體前葉病變引起的生長(zhǎng)激素分泌節(jié)律、數(shù)量的異常、生長(zhǎng)激素受體缺陷，或受體后信息傳遞障礙等所引起的生長(zhǎng)發(fā)育遲緩性疾病。先天性垂體性侏儒癥包括兩種類(lèi)型單一性生長(zhǎng)激素缺乏癥ISOLATEDGROWTHHMONEDEFICIENCY，IGHD和垂體激素缺乏綜合癥COMBINEDPITUITARYHMONEDEFICIENCY，CPHD，IGHD又分為IGHDIA型，IGHDIB型，IGHDII型，IGHDIII型。目前對(duì)垂體性侏儒癥的治療主要依靠注射生長(zhǎng)激素或者促生長(zhǎng)激素釋放激素來(lái)達(dá)到增長(zhǎng)身高的目的。先天性垂體性侏儒癥的遺傳方式有常染色體顯性遺傳，常染色體隱性遺傳和X染色體遺傳，其中常染色體隱性遺傳是最常見(jiàn)的一種，目前已發(fā)現(xiàn)該疾病的致病基因有17個(gè)。本課題組在湖北省收集了一個(gè)常染色體隱性遺傳先天性垂體性侏儒癥家系，為了尋找該家系的致病原因，首先對(duì)已發(fā)現(xiàn)17個(gè)與先天性垂體性侏儒癥有關(guān)的基因進(jìn)行連鎖分析，發(fā)現(xiàn)該家系的致病基因與生長(zhǎng)激素釋放激素受體（GROWTHHMONERELEASINGHMONERECEPT，GHRHR）基因緊密連鎖，GHRHR基因可能是該家系的致病基因。通過(guò)對(duì)該基因的所有外顯子及外顯子與內(nèi)含子交界處進(jìn)行直接測(cè)序，結(jié)果發(fā)現(xiàn)了一個(gè)新的剪接突變IVS81G→A，通過(guò)限制性?xún)?nèi)切酶多態(tài)性RESTRICTIONFRAGMENTLENGTHPOLYMPHISMRFLP分析發(fā)現(xiàn)該突變?cè)诩蚁祪?nèi)與疾病共分離，并且在50個(gè)正常人中也未發(fā)現(xiàn)該突變的存在。為了檢測(cè)剪接突變IVS81G→A的剪接機(jī)制，從正常人和患者的基因組中分別構(gòu)建一個(gè)包含突變點(diǎn)微小基因，再將構(gòu)建好的基因轉(zhuǎn)染進(jìn)入HELA細(xì)胞模擬人體內(nèi)剪接的方式獲取RNA，進(jìn)行RTPCR和測(cè)序分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該突變導(dǎo)致剪接方式的改變，形成了5種新的RNA，一種是截短了的將第8號(hào)外顯子刪除的RNA，第二種是加長(zhǎng)了來(lái)自8號(hào)內(nèi)含子的48BP的RNA，第三種是加長(zhǎng)了來(lái)自8號(hào)內(nèi)含子的46BP的RNA，第四種加長(zhǎng)了來(lái)自8號(hào)內(nèi)含子的34BP的RNA，第五種是截短8號(hào)外顯子32BP的RNA，這五種異常的RNA都編碼截短和移碼突變的蛋白，從而影響了該基因的功能，導(dǎo)致了該家系垂體性侏儒癥的發(fā)生。上述研究結(jié)果表明GHRHR基因的剪接突變IVS81G→A是導(dǎo)致該家系垂體性侏儒癥的的致病原因。

簡(jiǎn)介：Y961738孝卞斜技大茅博士學(xué)位論文膽管癌表遺傳學(xué)研究去甲基化修飾對(duì)RASSFLA基因的表達(dá)調(diào)控及對(duì)人膽管癌細(xì)胞的生物學(xué)效應(yīng)申請(qǐng)人姓名指導(dǎo)教師學(xué)科專(zhuān)業(yè)研究方向論文起止時(shí)間左石。鄒聲泉教授外科學(xué)普外專(zhuān)業(yè)膽道腫瘤表遺傳學(xué)2004年3月至2006年3月華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院研究生部OO六年三月華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文MTTORFPBSPCRPOGRNASEMETHYLTHAZOYTERAZOLIUM四甲基偶氮唑鹽OPENREADINGFRAME開(kāi)放閱讀框PHOSPHATEBUFFEREDSALINE磷酸鹽緩沖液POLYMERASECHMNREACTION聚合酶鏈反應(yīng)PROTOONCOGENE原癌基因RIBONUCLEASE核糖核酸酶RTPCRREVERSETRANSCRIPTIONPCR逆轉(zhuǎn)錄PCRTUMORSUPPRESSORGENE腫瘤抑制基因5一AZACDR5AZA2一DEOXYCYTIDINE5氮2一脫氧胞苷

簡(jiǎn)介：目的為了探討在中國(guó)人群中血壓的遺傳度及不同時(shí)點(diǎn)血壓的波動(dòng)趨勢(shì)和醛固酮合成酶基因多態(tài)性分布頻率以及這些多態(tài)性與臨床常用藥物洛丁新的療效與副作用之間的關(guān)系方法我們于1999年在安徽的某兩個(gè)地區(qū)進(jìn)行了大量的血壓的橫斷面調(diào)查和原發(fā)性高血壓家系服用洛丁新后的血壓的隨訪(fǎng)調(diào)查共收集了8歲以上的雙胞胎1101對(duì)合格的原發(fā)性高血壓家系600戶(hù)服用藥物后隨訪(fǎng)血壓的人數(shù)達(dá)1000人結(jié)論以上結(jié)果表明遺傳因素是影響血壓的重要因素醛固酮合成酶的基因多態(tài)性與原發(fā)性高血壓的降壓效果和服藥中出現(xiàn)的某些不良反應(yīng)是相關(guān)的即基因型為CC型的原發(fā)性高血壓病人的有效降壓率高于其它基因型且易出現(xiàn)面紅這種不良反應(yīng)為了提高人口的生存質(zhì)量減少原發(fā)性高血壓的死亡率應(yīng)該對(duì)兒童青少年進(jìn)行宣傳教育養(yǎng)成良好的生活習(xí)慣和飲食習(xí)慣對(duì)有高血壓家族史的高危人群密切關(guān)注特別是高年齡組人群同時(shí)對(duì)人群高血壓的治療應(yīng)考慮到個(gè)體療效的差異針對(duì)每個(gè)患者的差異采用不同的、最有效的、最安全的、最經(jīng)濟(jì)的治療方案大大地降低副發(fā)應(yīng)和治療風(fēng)險(xiǎn)

簡(jiǎn)介：中山大學(xué)碩士學(xué)位論文海德堡視網(wǎng)膜斷層掃描儀對(duì)青少年視盤(pán)形態(tài)學(xué)參數(shù)分布及遺傳度研究姓名向帆申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)眼科學(xué)指導(dǎo)教師何明光20080504海德堡視網(wǎng)膜斷層掃描儀對(duì)青少年視盤(pán)形態(tài)學(xué)參數(shù)分布及遺傳度研究中山大學(xué)碩士學(xué)位論文的符合程度；選擇雙生子右眼的視盤(pán)面積DA，視杯面積CA和杯盤(pán)面積比值C／DAR進(jìn)行分析，應(yīng)用MX數(shù)量遺傳模型軟件，建立矯正年齡和性別的結(jié)構(gòu)方差組分遺傳模型估計(jì)遺傳度。主要結(jié)果1正常青少年視盤(pán)形態(tài)學(xué)HL玎參數(shù)正常值分布情況為視盤(pán)面積DA199土047MM2，視杯面積CAO52士O33MM2，盤(pán)沿面積RA147士O27MM2，杯盤(pán)面積比C／DARO25士011，盤(pán)沿容積RVO43士014MO，平均視網(wǎng)膜神經(jīng)纖維層厚度MRNFL030士O07MM，視網(wǎng)膜神經(jīng)纖維層橫截面面積RNFLA150士O38MM，平均視杯深度MEANCUPDEPTHO23O08MM，最大視杯深度MAXCUPDEPTH064019MM，水平方向杯盤(pán)比HC／DR052O17，垂直方向杯盤(pán)比VC／DR036O18，輪廓線(xiàn)高度變化值HVC044011MM，視杯形態(tài)測(cè)量CSMO2L007MM。2對(duì)于不同性別的青少年，一部分的視盤(pán)形態(tài)學(xué)參數(shù)存在性別問(wèn)的差異，且具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，如視盤(pán)面積PO0001，視杯面積POO001，盤(pán)沿面積PO047，杯盤(pán)面積比PO01，平均視網(wǎng)膜神經(jīng)纖維層厚度PO0001，視盤(pán)輪廓線(xiàn)高度變化值P001和視杯形態(tài)測(cè)定值P002；另一部分參數(shù)則不存在性別之間的差異盤(pán)沿容積P012，視神經(jīng)纖維層橫截面面積P008，水平和垂直方向的杯盤(pán)直徑比P術(shù)FO07；P唾亢003，最大視杯深度PO89以及平均視杯深度PO46。在具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的數(shù)據(jù)當(dāng)中，男孩比女孩有更大的視盤(pán)面積、視杯面積、盤(pán)沿面積、杯盤(pán)面積比值以及視杯形態(tài)測(cè)定值，但平均視網(wǎng)膜神經(jīng)纖維層厚度和視盤(pán)輪廓線(xiàn)高度變化值則是女孩較男孩大，盤(pán)沿容積、視杯深度則不具有性別間差異。3將視盤(pán)形態(tài)學(xué)參數(shù)與年齡歲進(jìn)行PEARSON積矩相關(guān)分析，結(jié)果表明除盤(pán)沿體積、垂直徑向杯盤(pán)比和最大視杯深度外，其余所有參數(shù)均和年齡相關(guān)，進(jìn)一步將年齡與這些參數(shù)進(jìn)行線(xiàn)型回歸分析，得到線(xiàn)型回歸方程，通過(guò)回歸

簡(jiǎn)介：系統(tǒng)性紅斑狼瘡S(chǎng)YSTEMICLUPUSERYTHEMATOSUS，SLE是一種侵犯多系統(tǒng)多器官，以血清中產(chǎn)生自身抗體為主要特征，有遺傳和環(huán)境等因素而導(dǎo)致的自身免疫性疾病。為研究遺傳和環(huán)境因素在華東地區(qū)漢族人群系統(tǒng)性紅斑狼瘡發(fā)生中的作用，本課題對(duì)較大樣本家系資料，通過(guò)出生順序分析和一般家系分析，探討SLE的發(fā)生與遺傳和環(huán)境因素的關(guān)系。在此基礎(chǔ)上，結(jié)合廣義估計(jì)方程SECONDDERGENERALIZEDESTIMATINGEQUATION，GEE2從群體的角度首次探討環(huán)境因素存在下SLE家庭相關(guān)大小，以評(píng)價(jià)在SLE家庭聚集中遺傳和環(huán)境因素的作用；并從遺傳流行病學(xué)的角度，應(yīng)用復(fù)合分離分析估計(jì)了調(diào)整年齡后及外環(huán)境危險(xiǎn)因素存在下的SLE遺傳模式，以綜合評(píng)價(jià)遺傳因素與環(huán)境因素在SLE發(fā)生中的作用。進(jìn)一步，從分子遺傳學(xué)角度，應(yīng)用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)PCR和限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)RFLP檢測(cè)方法，探討參與T細(xì)胞活化的共刺激分子CTLA4與PDCD1的基因多態(tài)及其與SLE遺傳易感性的關(guān)系。以評(píng)價(jià)上述基因多態(tài)在華東地區(qū)漢族人群SLE發(fā)生中的可能作用。

簡(jiǎn)介：蘇州大學(xué)博士學(xué)位論文B淋巴細(xì)胞腫瘤分子細(xì)胞遺傳學(xué)異常的研究姓名韓永勝申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專(zhuān)業(yè)內(nèi)科學(xué)（血液病學(xué)）指導(dǎo)教師薛永權(quán)20090501B淋巴細(xì)胞腫瘤分子細(xì)胞遺傳學(xué)異常的研究中文摘要3DLBCL中BCL6基斟易位和拷貝數(shù)增加的發(fā)生率分別是241％和172％。BCL6基㈥易位和拷貝數(shù)增加均與BCL6表達(dá)、免疫學(xué)亞型和預(yù)后無(wú)關(guān)。4DLBCL中BCL2基岡易位和拷貝數(shù)增加的發(fā)生率分別為17％和222％。BCL2基岡拷貝數(shù)增加多見(jiàn)于非GCB亞型，但與BCL2表達(dá)和預(yù)后無(wú)關(guān)。5CMYC基因易位和拷貝數(shù)增加的發(fā)生率分別為53％和193％。易位與免疫學(xué)亞型無(wú)關(guān)，但易位患者預(yù)后不良。CMYC基因拷貝數(shù)增加與免疫學(xué)亞型及預(yù)后無(wú)關(guān)。6CMYC基因拷貝數(shù)增加與BCL6和BCL2基因拷貝數(shù)增加均呈正相關(guān)。結(jié)論1在BALL中T14；14QL1；Q32易位同時(shí)累及IGH和CEBPE基因是再現(xiàn)性的遺傳學(xué)異常，該異?？纱_定BALL中一種新的亞型。伴T(mén)14；14Q11；Q32易位BALL患者可能預(yù)后較好。2DLBCL可以分成GCBDLBCL和非GCBDLBCL兩個(gè)亞型，在我國(guó)GCBDLBCL比較少見(jiàn)，GCBDLBCL患者預(yù)后較好。3石蠟包埋組織切片可用于FISH分析。4在DLBCL中BCL6基因易位或拷貝數(shù)增加的發(fā)生率較高，BCL6基因異常易位和拷貝數(shù)增加的檢測(cè)可用于該病的輔助診斷。5我國(guó)DLBCL中IHG／BCL2易位的發(fā)生率明顯低于兩方國(guó)家。BCL2基因拷貝數(shù)增加可能與非GCBDLBCL的發(fā)病有關(guān)。6在DLBCL中CMYC基因易位忠者預(yù)后不良。關(guān)鍵詞急性B淋巴細(xì)胞白血病、彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤、免疫學(xué)亞型、分子細(xì)胞遺傳學(xué)異常、預(yù)后N作者韓永勝指導(dǎo)教師薛永權(quán)教授

簡(jiǎn)介：目的通過(guò)分析成骨不全遺傳家系或散發(fā)病例家庭的臨床特征檢測(cè)COL1A1和COL1A2基因?qū)ふ彝蛔兾稽c(diǎn)初步探討我國(guó)OI基因突變的類(lèi)型建立成骨不全基因診斷方法為進(jìn)一步探討OI的發(fā)病機(jī)制及基因治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。材料和方法收集5個(gè)成骨不全家系和3個(gè)散發(fā)病例成骨不全家庭共8組研究對(duì)象研究其臨床特征及家系圖譜。選取COL1A1基因COL1A2基因作為研究的目的基因；提取患者外周血白細(xì)胞的全基因組DNA；根據(jù)該基因外顯子的大小、排列特點(diǎn)及堿基結(jié)構(gòu)用引物設(shè)計(jì)軟件PRIMERPREMIER50設(shè)計(jì)引物COL1A1基因21對(duì)；COL1A2基因33對(duì)。對(duì)COL1A1基因和COL1A2基因的啟動(dòng)子區(qū)域、全部外顯子及外顯子一內(nèi)含子交界區(qū)進(jìn)行PCR擴(kuò)增產(chǎn)物直接測(cè)序分析。設(shè)立對(duì)照家系內(nèi)對(duì)照、正常人群對(duì)照。對(duì)照組進(jìn)行目的片段PCR擴(kuò)增直接測(cè)序分析或計(jì)算機(jī)輔助限制性?xún)?nèi)切酶酶切位點(diǎn)檢測(cè)分析。結(jié)果18組成骨不全研究對(duì)象例的臨床特征表A及COL1A1基因和COL1A2基因突變情況表BC。2對(duì)COL1A1和COL1A2基因內(nèi)含子的研究發(fā)現(xiàn)先癥者COL1A1基因第31內(nèi)含子第128位堿基G→C突變率和COL1A2基因第30內(nèi)含子第162位堿基G→A突變率較正常人群高提示可能與成骨不全臨床表現(xiàn)異質(zhì)性有關(guān)。結(jié)論1本研究發(fā)現(xiàn)一個(gè)新的致病突變Ⅰ型膠原編碼基因COL1A1第1外顯子第97位堿基G→A突變可使其的編碼氨基酸由天冬氨酸突變?yōu)樘於０?。說(shuō)明除甘氨酸外其它氨基酸的突變也是中國(guó)人群成骨不全病因之一。2本研究發(fā)現(xiàn)2個(gè)新的Ⅰ型膠原COL1A1基因編碼區(qū)單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)分別為COL1A1第19號(hào)外顯子第1209位堿基T→A和COL1AL第48號(hào)外顯子第3702位堿基C→T。提示中國(guó)人群成骨不全患者編碼區(qū)也存在單核苷酸多態(tài)性。是對(duì)Ⅰ型膠原SNP數(shù)據(jù)庫(kù)補(bǔ)充。3成骨不全基因型和表現(xiàn)型關(guān)系復(fù)雜發(fā)生同一位置、同一形式突變的不同個(gè)體臨床表現(xiàn)不盡相同。這可能與不同個(gè)體生存環(huán)境、營(yíng)養(yǎng)環(huán)境、遺傳環(huán)境有關(guān)。4沒(méi)有檢測(cè)出Ⅰ型膠原編碼基因COL1A1和COL1A2突變的成骨不全患者其基因突變位置可能位于CRTAP基因和或LEPRE1基因上。5對(duì)COL1A1和COL1A2基因內(nèi)含子的研究發(fā)現(xiàn)先癥者COL1A1基因第31內(nèi)含子第128位堿基G→C突變率和COL1A2第30內(nèi)含子第162位堿基G→A突變率較正常人群高提示可能與成骨不全臨床表現(xiàn)異質(zhì)性有關(guān)。

簡(jiǎn)介：中山大學(xué)博士學(xué)位論文DMDBMD攜帶者的檢測(cè)及植入前遺傳學(xué)診斷的初步研究姓名黃文申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專(zhuān)業(yè)神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師張成20040603非缺失型DMD／BMD攜帶者檢測(cè)方法中，STRPCR是主要方法，以往STR結(jié)果分析多采用放射自顯影或銀染，不易檢出CA重復(fù)次數(shù)少的多態(tài)性片段，憑目測(cè)判斷結(jié)果，有一定的主觀(guān)性，且不能確定具體的片段大小，容易產(chǎn)生誤差，導(dǎo)致錯(cuò)誤的診斷，給DMD／BMD遺傳咨詢(xún)、優(yōu)生指導(dǎo)及產(chǎn)前診斷帶來(lái)了很大的困難，因此建立一種準(zhǔn)確、客觀(guān)的攜帶者檢測(cè)方法尤其重要。植入前遺傳學(xué)診斷PGD即受精卵分裂之卵裂球和囊胚種植入子宮內(nèi)膜之前的診斷，它是在胚胎著床前確定其遺傳物質(zhì)是否正常，然后種植遺傳物質(zhì)正常的胚胎。它是隨著體外受精、胚胎移植、受精卵和胚胎冷凍保存、基因診斷、超微生物化學(xué)分析等諸多高新技術(shù)學(xué)科的發(fā)展而興起的一門(mén)邊緣學(xué)科。PGD在性別診斷，單基因遺傳病及染色體遺傳病的預(yù)防上發(fā)揮越來(lái)越重要的作用。1989年COUTELLE等開(kāi)始檢測(cè)單個(gè)卵裂球的DYSTROPHIN基因，但僅檢測(cè)了一個(gè)DMD外顯子，未能同時(shí)進(jìn)行性別鑒定。1995年LIU等首次報(bào)道DMD的PGD成功妊娠，并誕生了一健康女?huà)搿?002年P(guān)APP等又報(bào)道一例女胎成功妊娠。目前國(guó)內(nèi)外均未見(jiàn)有健康男胎妊娠的報(bào)道。國(guó)內(nèi)DMD植入前遺傳學(xué)診斷仍處于實(shí)驗(yàn)研究階段，尚無(wú)臨床應(yīng)用的報(bào)道。本研究的實(shí)驗(yàn)宗旨是建立一種快速、簡(jiǎn)便、客觀(guān)、準(zhǔn)確的、非缺失型和缺失型女性DMD／BMD攜帶者均適用的檢測(cè)方法，然后對(duì)檢測(cè)出的DMD／BMD攜帶者進(jìn)行植入前遺傳學(xué)診斷。首先利用抗肌萎縮蛋白基因5個(gè)微衛(wèi)星DNA位點(diǎn)STR一44、45、49、50、5’DYSII的短串聯(lián)重復(fù)序列多態(tài)性，STRPCR反應(yīng)后在測(cè)序膠上電泳，紅外激光遺傳分析系統(tǒng)及SAGAGT基因分型軟件對(duì)凝膠上的擴(kuò)增產(chǎn)物及內(nèi)分子量標(biāo)準(zhǔn)的位置，進(jìn)行掃描，從而確定多態(tài)性位點(diǎn)的基因型，進(jìn)一步在DMD／BMD家系中行單體型分析，篩查DMD／BMD家系中女性攜帶者。然后針對(duì)所篩查出的缺失型女性DMD肯定攜帶者情況設(shè)計(jì)三重巢式PCR技術(shù)，同時(shí)檢測(cè)單個(gè)淋巴細(xì)胞及單個(gè)卵裂球的DYSTROPHIN基因和SRY基因，試圖建立一種穩(wěn)定、敏感、特異性高的PGD技術(shù)，為進(jìn)～步臨床應(yīng)用PGD奠定基礎(chǔ)。1材料和方法I1材料I11研究對(duì)象II

簡(jiǎn)介：浙江大學(xué)博士學(xué)位論文慢性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞遺傳學(xué)研究及STI571聯(lián)合化療藥物對(duì)K562細(xì)胞作用的研究姓名薛志科申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專(zhuān)業(yè)內(nèi)科學(xué)（血液內(nèi)科學(xué)）指導(dǎo)教師金潔20060301浙江大學(xué)I晦床醫(yī)學(xué)專(zhuān)業(yè)學(xué)位博士論文慢性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞遺傳學(xué)研究及STL571聯(lián)合化療藥物對(duì)K562細(xì)胞作用的研究第一部分慢性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞遺傳學(xué)研究一25例伴復(fù)雜變異易位的慢性粒細(xì)胞白病細(xì)胞遺傳學(xué)分析目的報(bào)道25例伴復(fù)雜變異易位的慢性粒細(xì)胞白血病染色體檢查結(jié)果并進(jìn)行細(xì)胞遺傳學(xué)分析。方法25例染色體制各采用骨髓細(xì)胞直接法和／或短期培養(yǎng)法，應(yīng)用R顯帶技術(shù)對(duì)其進(jìn)行顯帶分析，BCR／ABL融合基因檢測(cè)采用RTPCR法。結(jié)果經(jīng)染色體檢測(cè)的1209例的慢粒中25例伴復(fù)雜變異易位。伴復(fù)雜變異易位者占經(jīng)染色體檢測(cè)慢粒的207％。25例伴復(fù)雜變異易位的慢粒中，慢性期22例，急變期3例。僅累及3條染色體的復(fù)雜變異易位17例；除累及3條染色體的復(fù)雜變異易位外，還伴有其他染色體異常的7例。累及3條染色體的復(fù)雜變異易位所累及的染色體除9和22號(hào)染色體外，還累及的染色體為1號(hào)4例、3號(hào)2例、4號(hào)1例、6號(hào)3例、7號(hào)5例、8號(hào)1例、11號(hào)3例、12號(hào)2例、14號(hào)1例、17號(hào)3例、19號(hào)1例。25例中，24例復(fù)雜變異易位同時(shí)累及9和22號(hào)染色體。有～例僅累及22號(hào)染色體，核型為46，XY，C111；22Q2L；P14；Q11。伴有其他的異常為PH染色體、9、19、2L、一18、一21、一Y、DER6、DER9、DER22、DEL11、T1722等。其中6例曾檢出BCR／ABL融合基因，均為陽(yáng)性，其中4例為B3A2型，2例為B2A2型。結(jié)論經(jīng)染色體檢測(cè)的1209例的慢粒中25例伴復(fù)雜變異易位。伴復(fù)雜變異易位者占經(jīng)染色體檢測(cè)慢粒的207％。25例中，24例復(fù)雜變異易位同時(shí)累及9和22號(hào)染色體。有一例僅累及22號(hào)染色體。其中6例曾檢出BCR／ABL融合基因，均為陽(yáng)性，其中4例為B3A2型，2例為B2A2型。本組中除B3A2，B2A2型BCR／ABL融合基因外，還有無(wú)其他類(lèi)型有待于更進(jìn)一步的分子生物學(xué)研究。

簡(jiǎn)介：衰老是一種遺傳因素和外界環(huán)境共同影響的，由在細(xì)胞水平上發(fā)生的變化逐步積累并最終表現(xiàn)在組織器官水平上的現(xiàn)象。在衰老的過(guò)程中，有許多因素會(huì)誘發(fā)細(xì)胞內(nèi)遺傳物質(zhì)的損傷如基因突變、端?？s短、細(xì)胞內(nèi)調(diào)控機(jī)制失調(diào)等。在這些與衰老有關(guān)的遺傳物質(zhì)的損傷中，最為明顯的表現(xiàn)就是在細(xì)胞分裂過(guò)程中染色體分離異常以及非整倍體細(xì)胞的年齡效應(yīng)。在本次研究中，我們采用CYTOKINESISBLOCKMETHOD分別從染色體分離異常的角度以及非整倍體細(xì)胞命運(yùn)的角度探討中國(guó)男性外周血淋巴細(xì)胞中的年齡效應(yīng)1運(yùn)用CYTOKINESISBLOCKMETHOD，我們首次研究并報(bào)道了在中國(guó)男性的外周血淋巴細(xì)胞中染色體分離異常的年齡效應(yīng)。本文收集了14名老年6070歲之間和10名青年2226歲之間中國(guó)男性的外周血，從中分離得到淋巴細(xì)胞并進(jìn)行培養(yǎng)，以松胞素B阻滯細(xì)胞質(zhì)分裂而獲得雙核細(xì)胞，利用人X、Y和2號(hào)染色體特異的著絲粒探針進(jìn)行熒光原位雜交，以檢測(cè)X和Y染色體的分離異常。發(fā)現(xiàn)老年人淋巴細(xì)胞中，X染色體老年組92±32‰，青年組11±09‰，P0001和Y染色體老年組25±19％，年輕組02±03‰，P0001丟失的頻率較青年人顯著升高；X染色體老年組165±34‰，年輕組35±11‰，P0001和Y染色體老年組72±26‰，年輕組24±13‰，P0001不分離的頻率也隨著年齡增加而顯著升高；在老年人和青年人的淋巴細(xì)胞中，無(wú)論X染色體還是Y染色體，其染色體不分離的頻率均顯著高于丟失的頻率；觀(guān)察到的多種染色體分離異常同時(shí)發(fā)生的頻率也顯著高于相應(yīng)的預(yù)期頻率。這些結(jié)果表明，年齡顯著影響中國(guó)男性淋巴細(xì)胞中X和Y染色體的正常分離；與染色體丟失相比，染色體不分離是中國(guó)男性性染色體分離異常的是主要類(lèi)型；細(xì)胞內(nèi)負(fù)責(zé)染色體精確分離的機(jī)制出現(xiàn)異?？赡軙?huì)同時(shí)引起X和Y染色體的丟失及不分離。2我們分析了發(fā)生染色體分離異常的有絲分裂理論上應(yīng)產(chǎn)生的子細(xì)胞，在理論上應(yīng)產(chǎn)生的子細(xì)胞群體中CHRX細(xì)胞在淋巴細(xì)胞群體中所占比例值為257‰，而我們?cè)隗w內(nèi)的外周血淋巴細(xì)胞群體中實(shí)際并未觀(guān)察到CHRX細(xì)胞，從這一結(jié)果中，我們推測(cè)X染色體的缺失對(duì)男性淋巴細(xì)胞的存活有極大的影響。此外，通過(guò)比較進(jìn)入分裂形成雙核的非整倍體淋巴細(xì)胞以及未進(jìn)入分裂的單核非整倍體淋巴細(xì)胞，我們探討了不同染色體的缺失或者獲得對(duì)淋巴細(xì)胞分裂能力的影響。結(jié)果表明，在老年人的幾種非整倍體外周血淋巴細(xì)胞中，Y染色體缺失的淋巴細(xì)胞CHRY的分裂能力最強(qiáng)P0001，X2TEST，與之不同的是，在年輕人的非整倍體外周血淋巴細(xì)胞中，Y染色體缺失的淋巴細(xì)胞CHRY的分裂能力與X染色體獲得的淋巴細(xì)胞CHRX相似P046，X2TEST，而Y染色體獲得的淋巴細(xì)胞CHRY的分裂能力最弱P0001，X2TEST。這一結(jié)果說(shuō)明了在老年人和青年人中Y染色體對(duì)細(xì)胞分裂能力的不同影響，說(shuō)明了Y染色體隨年齡增長(zhǎng)對(duì)細(xì)胞的功能和重要性的變化。綜上所述，不同染色體的缺失或者獲得對(duì)細(xì)胞命運(yùn)的影響是不同的，并且這些染色體在年輕人和老年人細(xì)胞中的作用和影響也不同。

簡(jiǎn)介：華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文第二性征發(fā)育不良青少年的細(xì)胞及分子遺傳學(xué)分析姓名劉冠樓申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)指導(dǎo)教師唐艷平20090501華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文4基因中，對(duì)KAL1的研究進(jìn)行的最早，方法也最為成熟，現(xiàn)已建立起分別針對(duì)KAL1基因大片段缺失的熒光原位雜交法（FISH）和外顯子缺失的多重PCR法11,12。目的目的對(duì)2008年3月至2009年2月，在華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院遺傳室以及其他醫(yī)院因不育不孕做遺傳檢查的1357名患者中,尤其是青少年患者，根據(jù)登記的患者第二性狀特征，選取收集了29例患者作為研究對(duì)象,患者均為男性，外生殖器第二性征發(fā)育不良，部分病例伴有嗅覺(jué)障礙。對(duì)其進(jìn)行KAL1基因的FISH和多個(gè)外顯子的PCR檢測(cè)，分析KAL1基因的突變情況，討論其與青少年第二性征發(fā)育不良的關(guān)系，為臨床上對(duì)該病的診斷治療和研究提供參考。方法方法按照知情同意原則抽取患者外周血，培養(yǎng)外周血淋巴細(xì)胞做常規(guī)G顯帶染色體核型分析，并留存一份細(xì)胞懸液，用于做FISH及外顯子的PCR檢測(cè)。無(wú)留存細(xì)胞懸液的可用手術(shù)刀片刮取少量G顯帶玻片上殘留細(xì)胞進(jìn)行多重PCR檢測(cè)。結(jié)果結(jié)果PCR結(jié)果顯示，在收集到的29份病例中，有3份KAL1基因發(fā)生突變，突變率約為103，其中一名患者2號(hào)外顯子缺失，另一同胞兄弟的外顯子5號(hào)9號(hào)均缺失。FISH結(jié)果和PCR基本一致，2號(hào)外顯子缺失的患者FISH顯示正常，而同胞兄弟患者的外顯子59號(hào)缺失，缺失片段過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致FISH結(jié)果為陰性。結(jié)論結(jié)論本次研究中KAL1基因的突變率為103，所占比例高出文獻(xiàn)報(bào)道，這與本次實(shí)驗(yàn)所選研究對(duì)象有關(guān)。三例KAL1基因外顯子缺失的患者，均存在自發(fā)的青春期發(fā)育遲緩，第二性征發(fā)育不良。對(duì)第二性征發(fā)育不良的青少年患者，進(jìn)行FISH結(jié)合多重PCR法篩查KAL1基因具有重要的臨床診斷和治療意義。關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞第二性征發(fā)育不良；KALLMANN綜合癥；核型分析；多重PCR；FISH；KAL1基因；外顯子突變

簡(jiǎn)介：上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文淋巴瘤靶向治療分子機(jī)制及表觀(guān)遺傳學(xué)機(jī)制研究姓名張軼文申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專(zhuān)業(yè)內(nèi)科學(xué)（血液學(xué)）指導(dǎo)教師沈志祥20090501淋巴瘤靶向治療分子機(jī)制和表觀(guān)遺傳學(xué)機(jī)制研究第二部分DNA去甲基化聯(lián)合組蛋白去乙?；敢种苿└淖兞馨土黾?xì)胞中P尺DM7A和P異構(gòu)型的表達(dá)P尺DM7基因?qū)儆谝职┗騊RDM家族，是淋巴細(xì)胞分化過(guò)程中的普遍調(diào)控子。該基因能夠同時(shí)編碼兩種異構(gòu)型蛋白，PRDMLA和PRDML13。這兩種產(chǎn)物的比例失衡與腫瘤的發(fā)生發(fā)展及臨床預(yù)后密切相關(guān)。本研究從表觀(guān)遺傳學(xué)角度對(duì)P尺DM7口基因在淋巴瘤細(xì)胞中的沉默機(jī)制進(jìn)行了初步地探討。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，盡管PRDML／3表達(dá)水平在不同的淋巴瘤細(xì)胞中存在著差異性，但是P尺DM7A的表達(dá)無(wú)一例外地被下調(diào)，即PRDMLE／PRDMLL8的平衡關(guān)系遭到了破壞。當(dāng)用表觀(guān)遺傳治療藥物5一AZACDR和SAHA聯(lián)合作用于淋巴瘤細(xì)胞時(shí)，能夠抑制淋巴瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，改變淋巴瘤細(xì)胞中PRDMLA和PRDML8的表達(dá)水平，使其恢復(fù)PRDMLA／PRDMI，6的平衡關(guān)系，從而誘導(dǎo)淋巴瘤細(xì)胞發(fā)生凋亡。進(jìn)一步對(duì)有關(guān)DNA甲基化的研究證明，在PRDMIA和PRDMLJ8基因啟動(dòng)子CPG島區(qū)域存在著不同程度的5MC分布，不同的細(xì)胞中其甲基化水平亦存在著差異；而且在體外模擬甲基化修飾的試驗(yàn)中，也證實(shí)了CPG島的高甲基化狀態(tài)可以顯著地抑制PRDMLA和PRDMI8的基因轉(zhuǎn)錄。這說(shuō)明P尺DM7A和PRDMLT8基因可以作為表觀(guān)遺傳調(diào)控的靶基因，并有希望成為表觀(guān)遺傳治療的潛在靶標(biāo)。關(guān)鍵詞毛萼乙素，淋巴瘤，凋亡，信號(hào)通路；DNA去甲基化，組蛋白去乙酰化酶抑制劑，淋巴瘤，PRDML基因

簡(jiǎn)介：目的研究腎陰虛型慢性再生障礙性貧血CAA患者線(xiàn)粒體突變情況和骨髓中ID4基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化狀態(tài)探討母系遺傳的本質(zhì)線(xiàn)粒體和表觀(guān)遺傳學(xué)與腎陰虛型慢性再障發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系以期進(jìn)一步研究慢性再障的發(fā)病機(jī)制。方法收集8例診斷明確的腎陰虛型CAA患者骨髓和口腔黏膜上皮另收集2例健康人骨髓做正常對(duì)照僅用于ID4基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化的對(duì)照提取DNA。應(yīng)用甲基化特異性聚合酶鏈反應(yīng)MSPCR檢測(cè)ID4基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化狀態(tài)進(jìn)行線(xiàn)粒體DNA的全測(cè)序在骨髓標(biāo)本中與劍橋序列不一致的位點(diǎn)再與同一患者的口腔上皮正常組織的序列比較若此位點(diǎn)的變化在口腔上皮組織中未出現(xiàn)則定義為突變?nèi)粼诠撬铇?biāo)本和口腔上皮中均出現(xiàn)則定義為多態(tài)。從中西醫(yī)兩種醫(yī)學(xué)的母系遺傳角度探討其發(fā)病機(jī)制并對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析。結(jié)果1線(xiàn)粒體全測(cè)序表明許多患者的突變位點(diǎn)發(fā)生在與線(xiàn)粒體氧化呼吸鏈密切相關(guān)的區(qū)域涵蓋了了ND15、ND4L、ATP6、CYTB等多個(gè)線(xiàn)粒體DNA的編碼基因。而很多的DNA多態(tài)性則位于DLOOP區(qū)。28名CAA患者均檢測(cè)到了ID4基因的甲基化。結(jié)論1線(xiàn)粒體呼吸鏈酶復(fù)合體表達(dá)水平的改變可能導(dǎo)致線(xiàn)粒體呼吸鏈氧化磷酸化解偶聯(lián)、“電子漏”產(chǎn)生ROS引起氧化應(yīng)激和能量代謝障礙這些變化共同參與造血干細(xì)胞衰竭的發(fā)生發(fā)展過(guò)程。因此線(xiàn)粒體基因突變導(dǎo)致的呼吸鏈功能障礙可能在慢性再障的發(fā)病過(guò)程中起重要作用。2在所有患者骨髓細(xì)胞中均檢測(cè)到了ID4基因甲基化表觀(guān)遺傳學(xué)在CAA的發(fā)病機(jī)制中起到一定的作用有助于慢性再障發(fā)病機(jī)制的進(jìn)一步研究。3本研究從中西醫(yī)的腎虛和母系遺傳、表觀(guān)遺傳學(xué)兩個(gè)方面初步探討了慢性再障的發(fā)病機(jī)制在國(guó)際上尚未見(jiàn)到類(lèi)似研究意義重大。

簡(jiǎn)介：中南大學(xué)碩士學(xué)位論文LF基因在鼻咽癌細(xì)胞系中遺傳學(xué)和表遺傳學(xué)改變及其功能糾正的初步研究姓名張賀軍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師姚開(kāi)泰20070501碩士學(xué)位論文中文摘要學(xué)LOH、基因突變和表遺傳學(xué)基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化兩方面進(jìn)行了分析。通過(guò)PCRSSCP和測(cè)序方法分析了￡F基因啟動(dòng)子區(qū)、第1外顯子和第2外顯子的突變情況。在7種鼻咽癌細(xì)胞系中我們僅檢測(cè)到在HNEI細(xì)胞系存在LF基因啟動(dòng)子區(qū)突變1076DELC，而在其他位點(diǎn)和細(xì)胞系中未發(fā)現(xiàn)突變，即工F基因在鼻咽癌細(xì)胞系中的突變檢測(cè)率為14N1／7，推測(cè)該突變可能通過(guò)影響￡F基因啟動(dòng)子與反式作用因子的結(jié)合，導(dǎo)致LF基因的表達(dá)失活。此外，我們的結(jié)果也證實(shí)了LF基因的第二外顯子存在多態(tài)性。采用PCR變性聚丙烯酰胺凝膠電泳銀染方法，對(duì)7種鼻咽癌細(xì)胞系中微衛(wèi)星位點(diǎn)D34169、GBD181215、D3S1478、G59627和RHLL9558的雜合性缺失情況進(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果僅發(fā)現(xiàn)CNEI細(xì)胞系在D3S1478位點(diǎn)存在LOH，其余細(xì)胞系及其它位點(diǎn)未發(fā)現(xiàn)LOH，即￡F基因在鼻咽癌細(xì)胞系中的的LOH檢測(cè)率為14％1／7。提示微衛(wèi)星位點(diǎn)的雜合性丟失可能對(duì)LF在鼻咽癌細(xì)胞中表達(dá)下調(diào)起了一定的作用。為了探討LF基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化與鼻咽癌細(xì)胞系中LF基因的表達(dá)缺失或下調(diào)之間是否存在關(guān)系，我們采用了甲基化特異性PCR方法檢測(cè)了7種鼻咽癌細(xì)胞系中LF基因啟動(dòng)子區(qū)CPG島甲基化情況。結(jié)果顯示所有鼻咽癌細(xì)胞系中LF基因啟動(dòng)子區(qū)均存在甲基化，其中CNE2和58F細(xì)胞中U7基因啟動(dòng)子區(qū)存在不完全甲基化。這些結(jié)果說(shuō)明啟動(dòng)子區(qū)高甲基化可能是鼻咽癌細(xì)胞系中凹基因表達(dá)失活的主要原因。第二部分鼻咽癌候選抑瘤基因工F功能的初步研究采用RTPCR方法從慢性鼻咽炎組織中克隆LF基因的開(kāi)放閱讀框序列，測(cè)序結(jié)果顯示該序列存在2個(gè)SNP位點(diǎn)和一個(gè)突變位點(diǎn)9523AT。將LF基因的開(kāi)放閱讀框序列克隆到PEDNA31載體中。構(gòu)建了上，基因的真核表達(dá)載體PELF。利用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染技術(shù)將PELF導(dǎo)入58F細(xì)胞，G418篩選獲得抗性克隆，進(jìn)一步采用RTPCR檢測(cè)上∥基因的MRNA表達(dá)，采用WESTERNBLOTTING檢測(cè)LF蛋白的表達(dá)。結(jié)果表明我們已成功地建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染PELF的58F細(xì)Ⅱ

簡(jiǎn)介：目的從表觀(guān)遺傳學(xué)角度探討補(bǔ)腎中藥改善體外受精胚胎移植IVFET患者治療結(jié)局的機(jī)制。方法臨床研究將66例行IVFET治療的腎陰虛證不孕患者按照隨機(jī)數(shù)字表法分為治療組33例二至天癸顆粒聯(lián)合促性腺激素GN33個(gè)周期和對(duì)照組33例單用GN33個(gè)周期。治療組在IVF前3個(gè)月卵泡期服用二至天癸顆粒對(duì)照組不服藥兩組均在IVF前一個(gè)月經(jīng)周期的黃體中期獲取子宮內(nèi)膜行DNMT1檢測(cè)。觀(guān)察兩組患者黃體中期子宮內(nèi)膜DNMT1表達(dá)腎虛證候積分變化情況GN用量及用藥天數(shù)子宮內(nèi)膜厚度及分型子宮動(dòng)脈、子宮內(nèi)膜PI和RI取卵數(shù)、優(yōu)質(zhì)卵率、受精率、優(yōu)質(zhì)胚胎率及臨床妊娠率。實(shí)驗(yàn)研究將105只89周齡、健康昆明種雌性小鼠按照隨機(jī)數(shù)字表法分為空白對(duì)照組、腎陰虛模型組及腎陰虛治療組每組各35只。造模成功后進(jìn)行超排卵每組30只小鼠取卵行卵細(xì)胞印跡基因SNRPN和PEGLMEST甲基化測(cè)定另5只雌雄合籠后取受精卵觀(guān)察卵裂率、成胚率。結(jié)果臨床研究治療組患者腎虛癥狀得到明顯改善治療組GN用量及用藥天數(shù)低于對(duì)照組單個(gè)卵雌激素E2卵泡水平高于對(duì)照組優(yōu)質(zhì)卵率、優(yōu)質(zhì)胚胎率及臨床妊娠率均高于對(duì)照組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜005治療組著床期子宮內(nèi)膜DNMT1表達(dá)量高于對(duì)照組子宮內(nèi)膜分型優(yōu)于對(duì)照組子宮動(dòng)脈、子宮內(nèi)膜PI和RI均低于對(duì)照組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜005。實(shí)驗(yàn)研究腎陰虛模型小鼠卵細(xì)胞SNRPN和PEGLMEST基因均發(fā)生了不同程度的去甲基化印跡丟失而該去甲基化在腎陰虛治療組得到部分糾正各組小鼠受精卵數(shù)目、卵裂率及成胚率比較腎陰虛模型組低于空白對(duì)照組腎陰虛治療組高于腎陰虛模型組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜005。結(jié)論1在IVFET治療周期應(yīng)用補(bǔ)腎中藥可明顯改善患者腎虛癥狀減少GN用量提高優(yōu)質(zhì)卵率、優(yōu)質(zhì)胚胎率進(jìn)而改善臨床妊娠率。2補(bǔ)腎中藥可提高著床期子宮內(nèi)膜DNMT1表達(dá)量改善子宮內(nèi)膜分型增加子宮動(dòng)脈及子宮內(nèi)膜血流灌注以改善子宮內(nèi)膜容受性利于胚胎著床這可能是補(bǔ)腎中藥改善IVF結(jié)局的機(jī)制之一。3補(bǔ)腎中藥可在一定程度上防止腎陰虛模型小鼠卵細(xì)胞印跡基因SNRPN和PEGLMEST的異常去甲基化印跡丟失并提高其受精卵卵裂及成胚能力推論DNA異常去甲基化可能是腎陰虛不孕的表觀(guān)遺傳學(xué)機(jī)制之一補(bǔ)腎中藥防止異常去甲基化的發(fā)生可能是其治療不孕癥的機(jī)制之一。