從母系遺傳和表觀遺傳學來研究腎陰虛型慢性再生障礙性貧血的發(fā)病機制.pdf

1、目的:研究腎陰虛型慢性再生障礙性貧血(CAA)患者線粒體突變情況和骨髓中ID4基因啟動子區(qū)甲基化狀態(tài),探討母系遺傳的本質——線粒體和表觀遺傳學與腎陰虛型慢性再障發(fā)生、發(fā)展的關系,以期進一步研究慢性再障的發(fā)病機制。方法:收集8例診斷明確的腎陰虛型CAA患者骨髓和口腔黏膜上皮,另收集2例健康人骨髓做正常對照(僅用于ID4基因啟動子區(qū)甲基化的對照),提取DNA。應用甲基化特異性聚合酶鏈反應(MS-PCR)檢測ID4基因啟動子區(qū)甲基化狀態(tài);進行

2、線粒體DNA的全測序,在骨髓標本中與劍橋序列不一致的位點再與同一患者的口腔上皮正常組織的序列比較,若此位點的變化在口腔上皮組織中未出現(xiàn),則定義為突變;若在骨髓標本和口腔上皮中均出現(xiàn),則定義為多態(tài)。從中西醫(yī)兩種醫(yī)學的母系遺傳角度探討其發(fā)病機制,并對結果進行分析。結果:(1)線粒體全測序表明許多患者的突變位點發(fā)生在與線粒體氧化呼吸鏈密切相關的區(qū)域,涵蓋了了ND1-5、ND4L、ATP6、CYTB等多個線粒體DNA的編碼基因。而很多的DNA多

3、態(tài)性則位于D-loop區(qū)。(2)8名CAA患者均檢測到了ID4基因的甲基化。結論:(1)線粒體呼吸鏈酶復合體表達水平的改變,可能導致線粒體呼吸鏈氧化磷酸化解偶聯(lián)、“電子漏”產(chǎn)生ROS引起氧化應激和能量代謝障礙,這些變化共同參與造血干細胞衰竭的發(fā)生發(fā)展過程。因此,線粒體基因突變導致的呼吸鏈功能障礙可能在慢性再障的發(fā)病過程中起重要作用。(2)在所有患者骨髓細胞中均檢測到了ID4基因甲基化,表觀遺傳學在CAA的發(fā)病機制中起到一定的作用,有助于