簡介：目的探討老年男性2型糖尿病患者血清骨鈣素水平與血糖、胰島Β細(xì)胞功能、血脂之間的關(guān)系。方法以55例老年男性2型糖尿病患者為研究對象（T2DM組），對照組為52例體檢人群，年齡、性別相匹配，測定兩組間的骨鈣素OC、空腹血糖FBG、餐后2小時(shí)血糖2HBG、空腹胰島素FINS、餐后2小時(shí)胰島素2HINS、空腹C肽FCP、餐后2小時(shí)C肽2HCP、糖化血紅蛋白HBA1C、血脂、血鈣CA、血磷P、胱抑素CCYSC，分析血清OC與各項(xiàng)指標(biāo)的相關(guān)性。結(jié)果T2DM組OC低于對照組217±132UGLVS282±142UGL，P0016，LDLC、CYSC高于對照組270±094MMOLLVS235±070MMOLL，P0033130±048MGLVS102±038MGL，P0001老年男性2型糖尿病患者血清OC與HBA1C、FBG、2HBG呈負(fù)相關(guān)（R0420、0276、0268，P0001、0041、0043），與FCP、2HCP、HOMAΒ呈正相關(guān)R0499、0366、0325，P0000、0006、0015，與LDLC呈負(fù)相關(guān)趨勢，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（R0251，P0065）多元逐步回歸分析發(fā)現(xiàn)FCP是OC的獨(dú)立影響因素。結(jié)論老年男性2型糖尿病患者血清骨鈣素與血糖水平、胰島Β細(xì)胞功能相關(guān)。

簡介：目的探索經(jīng)皮椎體成形術(shù)PVP和經(jīng)皮椎體后凸成形術(shù)PKP治療骨質(zhì)疏松性椎體壓縮性骨折的療效及骨水泥滲漏的部位。方法收集200例骨質(zhì)疏松性椎體壓縮性骨折患者，231個(gè)椎體，男113例，女87例年齡54～89歲，平均695±53歲。單椎體骨折159例，多椎體骨折41例。骨密度正常者6例，骨量減少106例，骨質(zhì)疏松性癥68例，嚴(yán)重骨質(zhì)疏松癥20例GENANT半定量法骨折分類1級83例2級80例，3級37例。其中134（158個(gè)椎體）例行PVP，66例73個(gè)椎體行PKP。比較PKP和PVP組患者術(shù)后3D、6周、3月、6月，VAS、疼痛緩解程度及ADL。觀察骨水泥滲漏的情況，比較PVP和PKP在骨水泥滲漏率、滲漏部位及引起的臨床癥狀方面的差異。結(jié)果采用重復(fù)測量的方差分析對術(shù)前、術(shù)后3D、術(shù)后6周、術(shù)后3月、術(shù)后6月的VAS、緩解程度、ADL進(jìn)行比較，P＜001，有顯著性差異，術(shù)后患者疼痛明顯緩解，生活質(zhì)量顯著提高。PVP組和PKP組比較術(shù)前、術(shù)后3D、術(shù)后6周、術(shù)后3月、術(shù)后6月的VAS、緩解程度、ADL均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。PVP組134例患者158個(gè)椎體中有18例1343％，22個(gè)椎體1392％發(fā)生骨水泥滲漏PKP組66例73個(gè)椎體中有8例1212％，10個(gè)椎體1369％發(fā)生骨水泥滲漏。兩組比較采用卡方檢驗(yàn)，P＞005，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。滲漏部位PVP組滲漏至椎管內(nèi)5個(gè)椎體椎間隙4個(gè)椎體穿刺針道內(nèi)3個(gè)椎體椎間靜脈2個(gè)椎體椎體前緣8個(gè)椎體。PKP組滲漏至椎管內(nèi)3個(gè)椎體椎間隙2個(gè)椎體穿刺針道內(nèi)1個(gè)椎體椎間靜脈0個(gè)椎體椎體前緣4個(gè)椎體。所有26例發(fā)生骨水泥滲漏的病例中均無神經(jīng)損傷或椎前大血管損傷等嚴(yán)重并發(fā)癥。僅有1例患者骨水泥滲漏到椎前及椎旁，而出現(xiàn)肋間神經(jīng)痛。結(jié)論1、PVP和PKP是骨質(zhì)疏松性椎體壓縮性骨折的有效治療手段。2、PVP和PKP對骨質(zhì)疏松性椎體壓縮性骨折疼痛緩解方面無明顯差異3、PVP和PKP在術(shù)中骨水泥滲漏率方面無明顯差異4、PVP和PKP術(shù)中骨水泥滲漏部位最常見于椎體前緣，依次為滲漏至椎管內(nèi)、椎間隙、穿刺針道內(nèi)、椎間靜脈。5、雖然PVP和PKP術(shù)中骨水泥滲漏率較高，但因此引起臨床癥狀較少。

簡介：點(diǎn)擊查看更多聚（D，L-乳酸）基仿生細(xì)胞外基質(zhì)的骨組織工程基質(zhì)材料研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：分類號學(xué)號M200975834學(xué)校代號10487密級碩士學(xué)位論文碩士學(xué)位論文ECADHERINCADHERIN、SNAILSNAIL在子宮腺肌病中的表在子宮腺肌病中的表達(dá)及意義的初步研究達(dá)及意義的初步研究學(xué)位申請人學(xué)位申請人龔青學(xué)科專業(yè)婦產(chǎn)科學(xué)婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師鄭紅兵鄭紅兵教授教授答辯日期20122012年5月獨(dú)創(chuàng)性聲明獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明，本學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果的總結(jié)。盡我所知，除文中已經(jīng)標(biāo)明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。對本文的研究做出貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識到本人將承擔(dān)本聲明引起的一切法律后果。學(xué)位論文作者簽名日期年月日學(xué)位論文版權(quán)使用學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)華中科技大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密□，在____年解密后適用本授權(quán)書。本論文屬于不保密□。（請?jiān)谝陨戏娇騼?nèi)打“√”）學(xué)位論文作者簽名指導(dǎo)教師簽名日期年月日日期年月日

簡介：點(diǎn)擊查看更多微創(chuàng)植骨術(shù)治療家兔橈骨骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：背景慢性阻塞性肺疾病CHRONICOBSTRUCTIVEPULMONARYDISEASE，COPD是以氣流受限，且不能完全逆轉(zhuǎn)為特征的疾病。由于其發(fā)病率、致殘率與病死率高，已成為重要的公共衛(wèi)生問題。COPD包括慢性支氣管炎和肺氣腫。肺氣腫在病理學(xué)上表現(xiàn)為肺部終末細(xì)支氣管遠(yuǎn)端出現(xiàn)異常持久的擴(kuò)張，并伴有肺泡壁和細(xì)支氣管的破壞而無明顯纖維化，但其發(fā)病機(jī)制目前尚未完全明了，構(gòu)建肺氣腫動物模型有助于肺氣腫發(fā)病機(jī)制的研究。肺氣腫外科治療近年來發(fā)展迅速，國內(nèi)外大量研究表明肺減容術(shù)LUNGVOLUMEREDUCTIONSURGERYLVRS是一種目前能夠明顯改善終末期肺氣腫病人呼吸困難，提高生活質(zhì)量的手術(shù)方法。目前認(rèn)為LVRS治療肺氣腫的重要機(jī)制是通過局部切除或折疊過度氣腫的肺組織以解除肺氣腫組織對相對正常肺組織的壓迫，恢復(fù)肺彈性，減少氣道梗阻，改善膈肌和胸廓的運(yùn)動功能，改善通氣血流比值和血流動力學(xué)，最終改善病人肺功能和緩解呼吸困難癥狀。但關(guān)于LVRS治療重度肺氣腫的機(jī)制研究大多是通過臨床現(xiàn)象進(jìn)行的理論推測，其基礎(chǔ)理論研究報(bào)告較少。近年來研究發(fā)現(xiàn)肺氣腫對膈肌收縮功能有明顯的影響。膈肌是主要的呼吸肌，有關(guān)它的結(jié)構(gòu)、功能和代謝，國內(nèi)外已經(jīng)進(jìn)行了大量的研究。但有關(guān)膈肌疲勞時(shí)的膈肌生物力學(xué)特性及其細(xì)胞骨架蛋白表達(dá)，還研究甚少。本試驗(yàn)重點(diǎn)考察肺氣腫兔膈肌生物力學(xué)特性在肺減容術(shù)前后的變化，為深入探討LVRS治療重度肺氣腫的機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)和理論依據(jù)。方法40只家兔隨機(jī)分為正常對照組A組、肺氣腫組B組、假手術(shù)組C組和雙側(cè)肺減容組D組，每組10只。A組室溫常規(guī)喂養(yǎng)，余3組采用煙熏4周后氣管內(nèi)滴入04％木瓜蛋白酶05MLKG，繼續(xù)煙熏4周誘發(fā)肺氣腫。A組和肺氣腫模型組各取5只行肺功能檢查，證明B、C、D組均已出現(xiàn)肺氣腫特征肺氣腫動物模型已由我科譚群友、龔太乾博士課題完成。B組按常規(guī)飼養(yǎng)。C組僅行胸骨正中劈開進(jìn)入雙側(cè)胸膜腔，不切除肺組織。D組行胸骨正中劈開后，切除右上肺葉和左上肺葉上12減容。肺功能測定、肺組織病理學(xué)檢查、膈肌透射電鏡觀察、各實(shí)驗(yàn)組兔膈肌條收縮與疲勞特性、抗拉強(qiáng)度、屈服強(qiáng)度、斷裂伸長率等生物力學(xué)特性檢測；采用RTPCR法檢測膈肌組織中TITIN和NEBULIN這兩種骨架蛋白MRNA的表達(dá)。同時(shí)結(jié)合肺功能、肺組織病理學(xué)的變化，評價(jià)肺氣腫兔膈肌生物力學(xué)特性在肺減容術(shù)前后的變化。結(jié)果1、1聯(lián)合應(yīng)用煙熏加氣管內(nèi)滴注木瓜蛋白酶的方法可以成功地建立肺氣腫動物模型。病理學(xué)檢查見肺部終末細(xì)支氣管遠(yuǎn)端出現(xiàn)異常持久的擴(kuò)張，并伴有肺泡壁和細(xì)支氣管的破壞。肺氣腫組肺功能檢測結(jié)果示FRCTLC、TLCWB和RE明顯高于正常對照組，F(xiàn)EV05FVC明顯低于正常對照組，且FEV05FVC＜70％，表明肺氣腫組出現(xiàn)明顯的氣流受限，肺氣腫的誘發(fā)成功。2在肺氣腫動物模型基礎(chǔ)上，行正中胸骨劈開而不施行肺減容。術(shù)后結(jié)合肺功能，肺組織病理學(xué)的評價(jià)，發(fā)現(xiàn)與肺氣腫組無明顯變化，說明假手術(shù)組動物模型成功建立。3以肺氣腫動物模型基礎(chǔ)上，施行雙側(cè)LVRS，手術(shù)后8周時(shí)，肺功能檢測FEV05和FEV05FVC顯著升高，F(xiàn)RCTLC、TLCWB和RE顯著降低，病理觀察可見肺泡管、肺泡囊及肺泡擴(kuò)張及破壞進(jìn)一步修復(fù)，即說明本實(shí)驗(yàn)成功復(fù)制了肺減容動物模型。2膈肌條收縮與疲勞特性1肺氣腫組和假手術(shù)組膈肌顫搐收縮張力PTTWITCHTENSION和強(qiáng)直顫搐收縮張力POTITANICTENSION與正常對照組相比明顯降低P＜005，而肺減容組較正常對照組無顯著差異P＞005，但雙側(cè)肺減容組上述兩項(xiàng)指標(biāo)均較肺氣腫組和假手術(shù)組明顯升高P＜005。肺氣腫組和假手術(shù)組半量松弛時(shí)間12RTHALFRELAXATIONTIME與正常對照組相比明顯延長P＜005，而雙側(cè)肺減容組較正常對照組無顯著差異P＞005，但雙側(cè)肺減容組上述指標(biāo)均較肺氣腫組和假手術(shù)組明顯縮短P＜005。2與正常對照組比較，肺氣腫組和假手術(shù)組力頻率曲線明顯右移，而雙側(cè)肺減容組輕度右移；與肺氣腫組比較，雙側(cè)肺減容組曲線明顯左移，假手術(shù)組曲線無明顯移位。3肺氣腫組B和假手術(shù)組C膈肌抗拉強(qiáng)度、屈服強(qiáng)度、斷裂伸長率與正常對照組A比較顯著降低P＜005，而雙側(cè)肺減容組D較正常對照組A無顯著差異P＞005，但雙側(cè)肺減容組D上述3項(xiàng)指標(biāo)均較肺氣腫組B和假手術(shù)組C明顯升高P＜005。4膈肌組織肌聯(lián)蛋白和伴肌動蛋白MRNA表達(dá)與正常對照組A比較，肺氣腫組B和假手術(shù)組C均顯著降低P＜001。與肺氣腫組B和假手術(shù)組C比較，雙側(cè)肺減容組D膈肌組織肌聯(lián)蛋白及伴肌動蛋白MRNA表達(dá)均非常顯著升高P＜005，但未達(dá)到正常對照組A膈肌組織肌聯(lián)蛋白及伴肌動蛋白MRNA表達(dá)水平。結(jié)論1煙熏加氣管內(nèi)滴入木瓜蛋白酶的方法能夠在較短實(shí)驗(yàn)時(shí)間內(nèi)成功地復(fù)制類似于人類慢性阻塞性肺氣腫的實(shí)驗(yàn)動物模型。2LVRS可以使肺氣腫兔膈肌的顫搐收縮張力、強(qiáng)直顫搐收縮張力、半量松弛時(shí)間恢復(fù)并接近正常，使其力頻率曲線明顯左移，恢復(fù)膈肌抗疲勞特性。3LVRS可通過恢復(fù)肺氣腫兔膈肌的抗拉強(qiáng)度、屈服強(qiáng)度、斷裂伸長率等生物力學(xué)特性，增強(qiáng)呼吸動力，改善肺功能，對兔肺氣腫有明顯的治療作用。4LVRS能夠使肺氣腫兔膈肌組織中肌聯(lián)蛋白和伴肌動蛋白骨架蛋白得到明顯恢復(fù)，這可能是LVRS使肺氣腫膈肌功能得以恢復(fù)的分子基礎(chǔ)。

簡介：背景骨缺損是一類常見、多發(fā)且治療復(fù)雜的疾患因創(chuàng)傷、炎癥、腫瘤等后天因素及先天畸形等原因造成累及外顯和功能部位不僅給患者造成嚴(yán)重的形態(tài)畸形和功能障礙也成為困擾臨床醫(yī)師的一大難題。近年來隨著材料科學(xué)和生物學(xué)的發(fā)展組織工程學(xué)作為高新技術(shù)成為一門與多學(xué)科交叉的新興邊緣學(xué)科隨之應(yīng)運(yùn)而生并得到了迅速的發(fā)展利用組織工程學(xué)方法構(gòu)建組織工程骨已成為骨移植材料的研究熱點(diǎn)。目的殼聚糖CHITOSANCS材料與種子細(xì)胞具有較好的生物相容性是決定殼聚糖在骨組織工程中應(yīng)用的關(guān)鍵因素。本實(shí)驗(yàn)將轉(zhuǎn)染有成骨生物活性因子基因的細(xì)胞與殼聚糖膜材料共同培養(yǎng)通過細(xì)胞增殖、粘附實(shí)驗(yàn)觀察轉(zhuǎn)染細(xì)胞與殼聚糖膜支架材料的生物相容性。方法1骨形成蛋白27真核表達(dá)載體的構(gòu)建11真核表達(dá)載體的構(gòu)建分別構(gòu)建BMP2PCDNA31、BMP7PCDNA31表達(dá)載體并經(jīng)測序、雙酶切、PCR鑒定。12將構(gòu)建的質(zhì)粒經(jīng)脂質(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)染MG63細(xì)胞通過RTPCR檢測HBMP2、HBMP7MRNA水平表達(dá)通過WESTERNBLOT、免疫細(xì)胞化學(xué)染色檢測HBMP2、HBMP7蛋白在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)。2轉(zhuǎn)染細(xì)胞在殼聚糖膜表面的增殖與分化情況的研究21MTS增殖檢測將材料及細(xì)胞置于96孔板中培養(yǎng)分正常MG63組MG63CS組轉(zhuǎn)染BMP2組轉(zhuǎn)染BMP2CS組轉(zhuǎn)染BMP7組轉(zhuǎn)染BMP7CS組在24H、48H、72H、96H時(shí)MTS法檢測細(xì)胞增殖情況。22掃描電鏡檢測將材料及細(xì)胞于24孔板中分為MP2PCDNA31轉(zhuǎn)染MG63CS組與BMP7PCDNA31轉(zhuǎn)染MG63CS組培養(yǎng)24H、72H、120H收集準(zhǔn)備樣本掃描電鏡觀察細(xì)胞粘附情況。結(jié)果1真核表達(dá)載體的構(gòu)建經(jīng)測序、雙酶切、PCR鑒定結(jié)果表明成功構(gòu)建了BMP2PCDNA31、BMP7PCDNA31表達(dá)載體。2轉(zhuǎn)染及表達(dá)RTPCR結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染細(xì)胞中有目的基因的表達(dá)WESTERNBLOT及細(xì)胞免疫組化法均檢測到轉(zhuǎn)染細(xì)胞中有目的蛋白BMP2、BMP7的表達(dá)表明轉(zhuǎn)染后重組載體在MG63細(xì)胞中成功表達(dá)。3MTS增殖實(shí)驗(yàn)轉(zhuǎn)染細(xì)胞在材料上培養(yǎng)24H、48H、72H時(shí)MTS檢測值的增長表明隨著時(shí)間的推移細(xì)胞在材料表面能生長增殖。但與正常MG63細(xì)胞組相比轉(zhuǎn)染組的增殖無明顯差異P＞005表明體外殼聚糖材料對載有轉(zhuǎn)染有目的基因的MG63細(xì)胞的增殖無明顯促進(jìn)作用。4掃描電鏡觀察分為BMP2PCDNA31轉(zhuǎn)染MG63CS組與BMP7PCDNA31轉(zhuǎn)染MG63CS組于培養(yǎng)24H、72H、120H時(shí)的電鏡照片顯示分別轉(zhuǎn)染有BMP2、BMP7基因的MG63細(xì)胞在殼聚糖材料上正常粘附、生長、增殖。結(jié)論本研究成功構(gòu)建能在MG63中表達(dá)BMP2、BMP7的真核表達(dá)載體。殼聚糖材料的生物相容性可有利于轉(zhuǎn)染有目的基因的MG63細(xì)胞的粘附及增殖該材料有望成為骨缺損修復(fù)及重建的替代材料。

簡介：背景及目的骶髓上損傷SUPRASACRALCDINJURY，SSCI會導(dǎo)致逼尿肌反射亢進(jìn)DTRUSHYPERREFLEXIA，DH，出現(xiàn)膀胱排尿、貯尿功能障礙，因其原發(fā)誘因?yàn)榧顾钃p傷，既往對DH發(fā)病機(jī)理的研究多進(jìn)行的是神經(jīng)病理研究，傳統(tǒng)理論主要認(rèn)為骶髓上損傷后骶髓排尿中樞失去高位中樞的控制因而發(fā)生DH，但這些理論對神經(jīng)病變后逼尿肌水平如何發(fā)生DH的下游機(jī)制理解釋不清。膀胱的排尿、貯尿涉及神經(jīng)和肌肉兩個(gè)方面，這兩個(gè)方面或其中一方發(fā)生病變即可導(dǎo)致膀胱排尿、貯尿功能障礙，對其發(fā)病機(jī)理的研究可從神經(jīng)和肌肉兩個(gè)方面進(jìn)行，骶髓上損傷后逼尿肌興奮收縮功能必然發(fā)生繼發(fā)性改變，逼尿肌的這種繼發(fā)的肌源性改變可能與DH的發(fā)生密切相關(guān)，研究骶髓上損傷后肌源性逼尿肌興奮改變，可更好的弄清骶髓上損傷后膀胱排尿、貯尿功能障礙的機(jī)理，對脊髓損傷后如何更好的保護(hù)和恢復(fù)膀胱功能有指導(dǎo)意義，然而既往缺乏這一方面的研究。骶髓上損傷后出現(xiàn)的DH，表現(xiàn)為在膀胱充盈少量尿液后即出現(xiàn)具有一定強(qiáng)度壓力超過15CMHO人為意識不能抑制的逼尿肌收縮；膀胱流出道梗阻BLADDEROUTLETOBSTRUCT，BOO可引起逼尿肌不穩(wěn)定DTRUSINSTABILITY，DI，DI的表現(xiàn)與DH的表現(xiàn)相似，近年來大量研究顯示DI逼尿肌組織自身的興奮性增強(qiáng)，據(jù)此提出了發(fā)生DI的肌源性理論，骶髓上損傷后DH的發(fā)生除有神經(jīng)損傷誘因外，有無肌原性因素、其與DI逼尿肌興奮性改變有何異同尚不清楚。對比研究骶髓上損傷和BOO后逼尿肌興奮收縮功能改變的異同，可明確在逼尿肌水平DH和DI的發(fā)生有無共同通路，從而從逼尿肌的肌源性改變方面探討DH的發(fā)病機(jī)理。骶髓上損傷后逼尿肌繼發(fā)的肌源性改變包括興奮收縮功能改變及順應(yīng)性改變，其興奮性改變與DH密切相關(guān)，順應(yīng)性改變影響到膀胱的貯尿功能。與逼尿肌興奮有關(guān)的因素有興奮的產(chǎn)生和傳導(dǎo)，與順應(yīng)性有關(guān)的因素有肌動蛋白、Ⅲ型、Ⅰ型膠原纖維含量，進(jìn)行諸多方面的研究有助于弄清骶髓上損傷后膀胱排尿貯尿功能障礙與逼尿肌肌源性改變之間的關(guān)系。研究表明逼尿肌興奮主要由鈣通道開放鈣內(nèi)流引起，其節(jié)律性收縮與胞內(nèi)鈣庫節(jié)律性釋放鈣形成的鈣震蕩有關(guān)，因此鈣離子與逼尿肌的興奮和收縮關(guān)系尤為密切。逼尿肌細(xì)胞膜上存在著L型和T型兩種鈣通道，鈣震蕩是由胞外鈣進(jìn)入胞內(nèi)引起肌織網(wǎng)內(nèi)鈣大量釋放，當(dāng)鈣達(dá)到一定濃度后再通過負(fù)反饋而抑制鈣釋放所形成，平滑肌的節(jié)律性收縮由此形成，因此研究骶髓上損傷后逼尿肌細(xì)胞鈣通道性狀及細(xì)胞內(nèi)鈣震蕩的改變對弄清骶髓上損傷后逼尿肌興奮性改變有重要意義。逼尿肌細(xì)胞間的興奮是通過縫隙連接進(jìn)行傳導(dǎo)的，縫隙連接蛋白CONNNEXIN43是縫隙連接的重要組成蛋白，其表達(dá)的改變可反映逼尿肌興奮傳導(dǎo)的改變。本課題擬對比研究骶髓上損傷和BOO后逼尿肌興奮收縮功能改變的異同，觀察肌源性因素在神經(jīng)源性膀胱排尿貯尿功能障礙中的作用，探討逼尿肌反射亢進(jìn)的發(fā)病機(jī)理。方法建立骶髓上損傷及BOO動物模型，圍繞正常組、骶髓上損傷組及BOO組之間的對比進(jìn)行以下研究1、尿動力學(xué)檢測各組在體和離體膀胱功能改變異同，觀察各組膀胱功能改變與有無神經(jīng)支配的關(guān)系；2、進(jìn)行逼尿肌條體外機(jī)械牽拉刺激試驗(yàn)檢測骶髓上損傷及BOO后逼尿肌興奮性改變異同；3、進(jìn)行植物神經(jīng)制劑作用試驗(yàn)，檢測各組逼尿肌對植物神經(jīng)制劑反應(yīng)性改變異同，探討逼尿肌興奮性改變與神經(jīng)的關(guān)系；4、進(jìn)行作用于肌細(xì)胞水平的鈣通道阻滯試驗(yàn)，觀察不同亞型鈣通道阻滯劑對各組逼尿肌興奮及鈣震蕩的影響，探討逼尿肌興奮性改變與鈣通道改變的關(guān)系；5、免疫組化染色觀察各組逼尿肌縫隙連接蛋白CONNNEXIN43改變，探討骶髓上損傷后逼尿肌興奮性改變與逼尿肌細(xì)胞間興奮傳導(dǎo)的改變的關(guān)系；6、免疫組化染色觀察各組逼尿肌肌動蛋白ΒACTIN、Ⅲ型、Ⅰ型膠原纖維改變并探討其與逼尿肌順應(yīng)性改變的關(guān)系。結(jié)果1骶髓上損傷后膀胱均發(fā)生DH，膀胱順應(yīng)性降低，BOO后DI的發(fā)生率為687％，膀胱順應(yīng)性降低；2，DH組和DI組在體及離體膀胱均于較低的膀胱內(nèi)壓下即出現(xiàn)節(jié)律性收縮反應(yīng)，離體膀胱的收縮頻率明顯高于在體膀胱P005，而正常對照組在體及離體膀胱充盈測壓全過程無逼尿肌節(jié)律性收縮反應(yīng)；3DH組及DI組離體逼尿肌條機(jī)械牽拉致其出現(xiàn)收縮時(shí)的最小張力明顯低于正常對照組，相同前負(fù)荷下的收縮頻率明顯高于正常對照組P005；4高濃度氯化氨甲酰膽堿刺激逼尿肌產(chǎn)生的收縮力DH組、DI組、C組差異無顯著性；5高濃度去甲腎上腺素刺激逼尿肌產(chǎn)生的收縮力DH組、DI組、C組差異無顯著性；6高濃度三磷酸腺甘作用逼尿肌產(chǎn)生的收縮力DH組、DI組、C組差異無顯著性；7滴加高濃度T型鈣通道阻滯劑咪拉地爾后DH組、DI組、C組逼尿肌條收縮頻率降低至相同水平，滴加高濃度L型鈣通道阻滯劑異搏定后各組收縮頻率下降相同；8DH組及DI組逼尿肌細(xì)胞鈣振蕩頻率明顯高于C組P005，滴加高濃度咪拉地爾后各組鈣振蕩頻率降低至相同水平，而滴加高濃度異搏定后各組鈣振蕩頻率下降相同；9與C組相比，DH組、DI組逼尿肌細(xì)胞間隙Ⅰ型、Ⅲ型膠原纖維、縫隙連接蛋白CONNNEXIN43均增強(qiáng)，逼尿肌細(xì)胞內(nèi)肌動蛋白ΒACTIN均增強(qiáng)。結(jié)論骶髓上損傷后逼尿肌肌源性改變與BOO后的改變具有一致性1骶髓上損傷后逼尿肌順應(yīng)性降低；2骶髓上損傷后逼尿肌發(fā)生繼發(fā)性改變，自身的興奮性增強(qiáng)，發(fā)生逼尿肌反射亢進(jìn)；3骶髓上損傷后逼尿肌興奮性增強(qiáng)主要因T型鈣通道分布增多或性狀改變引起，L型鈣通道改變在DH發(fā)生中的作用不明顯；4骶髓上損傷后逼尿肌細(xì)胞間縫隙連接蛋白CONNEXIN43表達(dá)增強(qiáng)，縫隙連接增多，細(xì)胞間興奮傳導(dǎo)加強(qiáng)，DH的發(fā)生也與此有關(guān)；5細(xì)胞間隙Ⅰ型、Ⅲ型膠原纖維增多，細(xì)胞內(nèi)肌動蛋白ΒACTIN增強(qiáng)導(dǎo)致逼尿肌順應(yīng)性降低；6與膀胱出口梗阻后DI的發(fā)生相同，DH的發(fā)生與脊髓損傷后逼尿肌自身的肌源性改變有關(guān)，逼尿肌自身興奮性增強(qiáng)導(dǎo)致DH。

簡介：前言地方性氟中毒ENDEMICFLUOSIS簡稱地氟病屬地球化學(xué)性疾病是一種以氟斑牙DENTALFLUOSIS和氟骨癥SKELETALFLUOSIS為主要特征的全身慢性中毒性疾病。氟骨癥病理表現(xiàn)形式是以成骨細(xì)胞功能活躍以及與此密切相關(guān)的骨轉(zhuǎn)換加速為其主要特征。研究表明氟能夠通過刺激成骨細(xì)胞成骨而使骨量增加、骨密度升高。氟中毒時(shí)成骨細(xì)胞細(xì)胞數(shù)增多、胞體肥大、DNA合成增加、各種骨形成標(biāo)志物水平升高呈明顯活躍狀態(tài)。WNT信號通路是近年來骨代謝中的研究熱點(diǎn)WNTΒCATENIN信號通路組分基因敲除和轉(zhuǎn)基因鼠模型以及一些體外實(shí)驗(yàn)都表明WNTΒCATENIN信號通路在調(diào)節(jié)骨代謝以及成骨細(xì)胞的分化增殖中扮演著重要角促進(jìn)成骨細(xì)胞的增殖分化及成熟。目前國內(nèi)外對WNTΒCATENIN信號通路的研究主要集中于骨關(guān)節(jié)炎和骨質(zhì)疏松等疾病上在地方性氟中毒中是否發(fā)揮作用尚未見相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道。鑒于地方性氟中毒的氟骨癥表現(xiàn)、氟對成骨細(xì)胞的作用以及WNTΒCATENIN信號通路在成骨細(xì)胞中發(fā)揮的作用我們擬通過復(fù)制慢性氟中毒大鼠模型觀察ΒCATENIN在骨組織中的MRNA和蛋白表達(dá)水平初步探討WNTΒCATENIN信號通路在氟骨癥中可能發(fā)揮的作用為闡明地方性氟中毒的發(fā)病機(jī)制提供新的思路。實(shí)驗(yàn)方法一、實(shí)驗(yàn)動物分組選取購自中國醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心剛斷乳WISTAR雄性大鼠32只體重5080克按體重隨機(jī)分成四組每組八只其中對照組飲用自來水含F(xiàn)0118MGL、低氟組含F(xiàn)50MGL的自來水、中氟組含F(xiàn)100MGL的自來水、高氟組含F(xiàn)150MGL的自來水。各組大鼠用標(biāo)準(zhǔn)嚙齒類動物飼料喂養(yǎng)自由飲水及進(jìn)食實(shí)驗(yàn)周期為3個(gè)月。二、實(shí)驗(yàn)方法1、大鼠生長發(fā)育狀況觀察整個(gè)實(shí)驗(yàn)周期內(nèi)觀察大鼠生長發(fā)育狀況每周稱取大鼠體重并作記錄同時(shí)觀察大鼠牙齒變化。2、血氟測定實(shí)驗(yàn)周期結(jié)束后乙醚麻醉大鼠腹主動脈采血分離得到血清采用痕量氟化物測定方法檢測血中氟離子濃度。3、骨氟測定大鼠取完血后處死快速取其左側(cè)股骨并取下股骨近端13迅速剔除肌肉、骨膜等結(jié)締組織剔凈后100℃烤箱內(nèi)烤干至恒重研磨成粉狀采用高溫燃燒水解氟電極法測骨氟含量。4、HE切片病理學(xué)觀察及骨形態(tài)計(jì)量學(xué)分析大鼠處死后迅速剝離左側(cè)完整脛骨固定脫鈣后常規(guī)石蠟包埋冠狀位切片后制成石蠟切片。常規(guī)脫蠟水合蘇木素伊紅染色后進(jìn)行病理學(xué)觀察和形態(tài)計(jì)量學(xué)靜態(tài)參數(shù)分析。5、提取骨組織RNA進(jìn)行目的基因MRNA表達(dá)水平檢測使用RNAISO試劑盒提取骨組織RNA按照PRIMERRTREAGENTKIT說明書反轉(zhuǎn)錄得到CDNASYBRRPREMIXEXTAQTMⅡ說明書進(jìn)行實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)通過數(shù)據(jù)分析目的基因MRNA表達(dá)水平。6、石蠟切片免疫組織化學(xué)染色石蠟切片常規(guī)脫蠟水合后以兔抗大鼠ΒCATENIN多克隆抗體為一抗以生物素化山羊抗兔IGG為二抗DAB顯色蘇木素復(fù)染常規(guī)酒精脫水二甲苯透明中性樹膠封片照相。三、統(tǒng)計(jì)分析方法采用SPSS110軟件對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析處理。所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用單因素方差分析方法進(jìn)行分析。P值小于005認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果1、大鼠一般生長情況實(shí)驗(yàn)周期內(nèi)對照組和實(shí)驗(yàn)組大鼠體重增加量相似呈動態(tài)變化。各組大鼠體重差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P005。2、大鼠血氟和骨氟水平各實(shí)驗(yàn)組大鼠的血氟和骨氟水平較對照組都明顯升高P3、骨組織病理學(xué)觀察及形態(tài)計(jì)量學(xué)分析低倍鏡下10可見與對照組相比實(shí)驗(yàn)組大鼠骨小梁增多排列紊亂且相互連接成網(wǎng)并且隨染氟劑量的升高上述骨小梁改變明顯。染氟三個(gè)月后與對照組相比150MGLF組大鼠骨小梁面積百分?jǐn)?shù)TBAR、骨小梁數(shù)目TBN明顯升高P005。骨小梁數(shù)目TBN明顯升高P005。4、氟對大鼠骨組織中ΒCATENIN及LRP5、RUNX2MRNA表達(dá)的影響與對照組相比各實(shí)驗(yàn)組ΒCATENIN、LRP5、RUNX2MRNA表達(dá)含量升高其中100MGLF組以及150MGLF組ΒCATENIN、LRP5MRNA表達(dá)含量較對照組比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P005。5、氟對大鼠骨組織中ΒCATENIN蛋白表達(dá)的影響在高倍鏡40下可見與對照組相比染氟組大鼠成骨細(xì)胞中可見ΒCATENIN陽性表達(dá)主要表達(dá)于皮質(zhì)骨內(nèi)包被以及骨小梁包被的成骨細(xì)胞系。各實(shí)驗(yàn)組隨著染氟劑量的升高陽性表達(dá)的細(xì)胞數(shù)目增多、范圍擴(kuò)大。結(jié)論1、不同濃度50MGL、100MGL、150MGL飲水型氟中毒大鼠模型呈現(xiàn)出骨量增多的硬化型氟骨癥改變表現(xiàn)為骨小梁數(shù)目增多、排列紊亂。2、氟能夠促進(jìn)大鼠骨組織中WNTΒCATENIN信號通路組分ΒCATENIN及其上游因子LRP5的基因轉(zhuǎn)錄和ΒCATENIN蛋白表達(dá)。

簡介：目的通過子午流注擇時(shí)穴位敷貼在膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎（KOA）中的應(yīng)用，評價(jià)子午流注擇時(shí)穴位敷貼改善KOA患者疼痛、功能障礙、平衡能力、臨床療效、焦慮及生活質(zhì)量的效果，以達(dá)到規(guī)范子午流注擇時(shí)穴位敷貼的操作流程，促進(jìn)中醫(yī)護(hù)理操作技能發(fā)展，并促進(jìn)穴位敷貼效應(yīng)學(xué)研究，推進(jìn)中醫(yī)外治法發(fā)展的目的。方法本研究采用類試驗(yàn)性研究。2013年1月～6月便利選取在成都市溫江區(qū)柳城社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心針灸科就診并符合納入標(biāo)準(zhǔn)的KOA患者68例，采用抽簽法隨機(jī)分為試驗(yàn)組和對照組各34例。兩組患者均接受膝關(guān)節(jié)局部選穴針灸治療，療程4周。在此基礎(chǔ)上，對照組實(shí)施患處穴位敷貼，試驗(yàn)組實(shí)施子午流注擇時(shí)穴位敷貼，療程4周。采用簡明MCGILL疼痛評分表（SFMPQ）和簡體中文版OSWESTRY功能障礙指數(shù)問卷表（ODI）在干預(yù)前、干預(yù)后2周、4周、8周對患者疼痛、功能障礙進(jìn)行評價(jià)；采用閉目單足站立、計(jì)時(shí)起立步行測驗(yàn)（TUGT）、BERG平衡量表（BBS）在干預(yù)前、干預(yù)后4周對患者平衡能力進(jìn)行評價(jià)；采用中文版LEQUESNEMG指數(shù)在干預(yù)前、干預(yù)后4周對患者臨床療效進(jìn)行評價(jià)；采用焦慮自評量表（SAS）、SF36健康調(diào)查量表（SF36）在干預(yù)前、干預(yù)后4周對患者焦慮和生活質(zhì)量進(jìn)行評價(jià)。結(jié)果共有60例KOA患者完成全部資料收集，其中對照組30例（脫落3例、剔除1例），試驗(yàn)組30例（脫落2例、剔除2例）。結(jié)果顯示1疼痛評價(jià)結(jié)果試驗(yàn)組在干預(yù)后各時(shí)間點(diǎn)的SFMPQ得分均低于同期對照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P2功能障礙評價(jià)結(jié)果試驗(yàn)組在干預(yù)后第4周、第8周的ODI得分均低于同期對照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P005）；對試驗(yàn)組干預(yù)前后各時(shí)間點(diǎn)的ODI得分進(jìn)一步兩兩比較，后一時(shí)間點(diǎn)均低于前一時(shí)間點(diǎn)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P3平衡能力評價(jià)結(jié)果試驗(yàn)組干預(yù)后的閉目單足站立測試得分和BERG平衡量表得分均高于對照組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P4臨床療效評價(jià)結(jié)果試驗(yàn)組在干預(yù)后各時(shí)間點(diǎn)的LEQUESNEMG指數(shù)得分均低于同期對照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P5焦慮及生活質(zhì)量評價(jià)結(jié)果試驗(yàn)組干預(yù)后的SAS得分低于對照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P結(jié)論子午流注擇時(shí)穴位敷貼能有效緩解KOA患者的疼痛，改善功能障礙，其療效隨著治療時(shí)間延長而增強(qiáng)，能提高KOA患者的平衡能力，增強(qiáng)KOA患者的臨床療效，減輕KOA患者的焦慮，提高其生活質(zhì)量。因此，子午流注擇時(shí)穴位敷貼對KOA患者的干預(yù)效果較一般患處穴位敷貼明顯，作為常見的中醫(yī)護(hù)理操作技能，值得在臨床及社區(qū)推廣應(yīng)用。

簡介：點(diǎn)擊查看更多比較帶蒂筋膜瓣與生物膜包繞組織工程骨修復(fù)兔超臨界骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：脊柱融合術(shù)被廣泛應(yīng)用于退行性病變、創(chuàng)傷、腫瘤等各種脊柱疾患的治療中，是脊柱外科手術(shù)中最常用技術(shù)之一。但仍有最多高達(dá)45％的患者發(fā)生假關(guān)節(jié)形成，同時(shí)自體髂骨植骨增加了手術(shù)創(chuàng)傷并帶來了相關(guān)并發(fā)癥。進(jìn)一步提高脊柱融合率和尋找更為合適的移植替代物，成為脊柱外科的研究熱點(diǎn)。在對成骨的分子機(jī)制的研究過程中，逐漸發(fā)現(xiàn)了一系列生物因子對誘導(dǎo)成骨細(xì)胞分化和促進(jìn)局部骨形成有著重要的作用，這些因子被稱為骨誘導(dǎo)因子。許多骨誘導(dǎo)因子被發(fā)現(xiàn)、研究并應(yīng)用于脊柱融合術(shù)。BMPS是現(xiàn)在研究最多的骨誘導(dǎo)生長因子。研究證實(shí)RHBMP2的應(yīng)用增加了脊柱融合幾率并減少了自體骨移植所帶來的手術(shù)創(chuàng)傷。但RHBMP2價(jià)格昂貴并有明確的劑量依賴性，常需要使用毫克級別的重組蛋白才能達(dá)到滿意的臨床療效。LIM礦化蛋白LIMMINERALIZATIONPROTEINLMP是近期發(fā)現(xiàn)的誘導(dǎo)成骨細(xì)胞分化成熟的胞內(nèi)細(xì)胞信號因子，可促進(jìn)成骨細(xì)胞分化和骨形成，在骨的礦化過程中發(fā)揮重要作用。研究證實(shí)，LMP體外和體內(nèi)可以誘導(dǎo)多種細(xì)胞內(nèi)BMP2、BMP4、BMP6、BMP7以及TGFΒ等多種骨誘導(dǎo)因子的分泌，同時(shí)提高成骨相關(guān)細(xì)胞對外源性BMPS的反應(yīng)性，招募周圍細(xì)胞參與成骨。相關(guān)對比研究發(fā)現(xiàn)，在誘導(dǎo)體內(nèi)異位成骨和脊柱融合的動物實(shí)驗(yàn)中，LMP1的效能強(qiáng)于BMP2。將LMP作為目的基因的局部基因治療中發(fā)現(xiàn)不需要轉(zhuǎn)染每一個(gè)受體細(xì)胞，也不需要長時(shí)間的表達(dá)就可以產(chǎn)生較強(qiáng)的成骨效應(yīng)，故LMP較BMPS等更適合于脊柱融合的治療。上述研究表明LMP3和LMP1可以作為BMPS類理想的替代物，有望避免了大劑量單一應(yīng)用BMPS的不便之處，并產(chǎn)生更大的誘導(dǎo)成骨效應(yīng)。迄今已分離出3種LMP基因型，BODEN等對LMP同源蛋白的結(jié)構(gòu)和功能進(jìn)行了系列研究，發(fā)現(xiàn)HLMP1長457個(gè)氨基酸，包含1個(gè)PDZ功能區(qū)N端和3個(gè)LIM功能區(qū)C端，HLMP2長423個(gè)氨基酸，包含完整的PDZ功能區(qū)和LIM功能區(qū)，HLMP3長153個(gè)氨基酸，包含1個(gè)完整PDZ功能，LIM功能區(qū)缺失。研究證實(shí)，HLMP2擁有完整的LIM功能區(qū)但沒有促進(jìn)成骨作用，HLMP3沒有LIM功能區(qū)卻具備與HLMP1類似的誘導(dǎo)成骨能力。對LMP的分析揭示LMP1和LMP3共有一個(gè)，40AA的獨(dú)特區(qū)域顯示出與成骨作用密切相關(guān)。LMP作為胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子，目前均采用質(zhì)粒、腺病毒等基因治療的方式導(dǎo)入編碼CDNA以過度表達(dá)的方式實(shí)現(xiàn)其研究和應(yīng)用?；蛑委煂?dǎo)入效率偏低，且存在安全問題，有引起插入突變及細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的潛在危險(xiǎn)。構(gòu)建具有入胞轉(zhuǎn)導(dǎo)能力并保持成骨活性的LMP重組蛋白，有望大大拓寬LMP的應(yīng)用范圍，并使LMP的實(shí)際臨床應(yīng)用成為可能。1988年GREEN和FRANKLE發(fā)現(xiàn)人免疫缺陷病毒HIV1的反式激活蛋白TAT能介導(dǎo)自細(xì)胞外轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞內(nèi)的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)，后續(xù)對TAT蛋白的結(jié)構(gòu)研究發(fā)現(xiàn)TAT4957RKKRRQRRR9肽序列是其主要功能區(qū)，也是保持TAT蛋白功能活性的最小片斷。在分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)的研究中，陸續(xù)發(fā)現(xiàn)了一系列短肽具有相似的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)功能，這類短肽被統(tǒng)稱為蛋白轉(zhuǎn)導(dǎo)域PROTEINTRANSDUCTIONDOMAINS，PTDS。PTD轉(zhuǎn)導(dǎo)技術(shù)可介導(dǎo)包括蛋白在內(nèi)的多種生物大分子的轉(zhuǎn)運(yùn)，且不受細(xì)胞類型的限制，并有望保持被轉(zhuǎn)運(yùn)分子的生物活性，在生物細(xì)胞學(xué)研究和藥物開發(fā)等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用前景。PTD介導(dǎo)的入胞轉(zhuǎn)導(dǎo)存在明顯的優(yōu)勢1PTD能快速有效的將攜帶物質(zhì)跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)；2對活體細(xì)胞干擾小，絕大部分PTD復(fù)合物在一定濃度內(nèi)基本無毒性；3應(yīng)用上操作簡單，轉(zhuǎn)導(dǎo)效率高，大多情況下能保持?jǐn)y帶物質(zhì)的生物學(xué)活性，低濃度即可發(fā)揮有效生物學(xué)效能。如前所述，TATPTD具有高效的蛋白轉(zhuǎn)導(dǎo)的作用，我們設(shè)想將TAT4957RKKRRQRRR9肽序列與LMP3進(jìn)行連接，構(gòu)建TATLMP3融合蛋白，利用TATPTD將LMP3介導(dǎo)進(jìn)入靶細(xì)胞內(nèi)。骨髓問充質(zhì)干細(xì)胞MESENCHYMALSTEMCELLS，MSCS具有多向分化的潛能，是組織工程常用的種子細(xì)胞，其本身亦可向成骨細(xì)胞分化，具有來源廣泛、取材方便、增殖和分化能力強(qiáng)、能與宿主骨良好結(jié)合的優(yōu)點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)中采用重組蛋白與人MSCS共培養(yǎng)的方法來驗(yàn)證TAT序列誘導(dǎo)入胞的能力和TATLMP3融合蛋白促成骨分化的活性。同時(shí)，我們制備重組蛋白LMP3作為對照。本課題的研究主要包括以下三個(gè)部分，所用到的主要方法及結(jié)果如下第一部分TATLMP3融合蛋白的原核表達(dá)、純化及多克隆抗體制備1人工合成針對大腸桿菌表達(dá)體系優(yōu)化的LMP3編碼基因序列，通過PCR方法分別獲得TATLMP3融合基因和LMP3基因并引入酶切位點(diǎn)。通過酶切、連接構(gòu)建原核表達(dá)載體，命名為PET431ATATLMP3和PET431ALMP3。測序結(jié)果提示無PCR引起的突變，基因無移碼，質(zhì)粒構(gòu)建成功。2將構(gòu)建載體于BL21DE3工程菌中進(jìn)行原核表達(dá)，優(yōu)化表達(dá)條件后目的蛋白表達(dá)以可溶性表達(dá)為主，將表達(dá)產(chǎn)物上清經(jīng)NINTA樹脂純化后，獲得重組蛋白TATLMP3和LMP3，純度均在90％以上。3將重組蛋白LMP3免疫家兔獲得多抗血清，經(jīng)飽和硫酸銨法純化獲得多克隆抗體。ELISA法檢測其對TATLMP3和LMP3的效價(jià)均在14000以上，WESTERNBLOT分析提示抗體與重組蛋白有較好的抗原抗體反應(yīng)性和一定特異性。第二部分人骨髓問充質(zhì)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)和鑒定1本部分實(shí)驗(yàn)中通過梯度離心法結(jié)合貼壁培養(yǎng)法分離獲得人骨髓問充質(zhì)干細(xì)胞HMSCS，流式細(xì)胞儀分析第三代HMSCS細(xì)胞表面標(biāo)志表達(dá)情況，結(jié)果陽性表達(dá)CD29、CD105，CD34和CD45表達(dá)為陰性，細(xì)胞純度達(dá)到95％以上。2在成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)液含地塞米松108MOLL、Β甘油磷酸鈉10MMOLL、維生素C50MGL誘導(dǎo)下，HMSCS堿性磷酸酶活性增高，Ⅰ型膠原基因表達(dá)上調(diào)，放免法檢測骨鈣素表達(dá)增高。14D后茜素紅S染色提示鈣結(jié)節(jié)形成，證實(shí)HMSCS在適當(dāng)條件可誘導(dǎo)分化為成骨細(xì)胞。第三部分TATLMP3融合蛋白誘導(dǎo)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的研究1將TATLMP3和LMP3分別與人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞共孵育，通過間接免疫熒光染色和WESTERNBLOTTING技術(shù)檢測重組蛋白的入胞效應(yīng)。結(jié)果TATLMP3能以濃度時(shí)間依賴的方式，高效快速的轉(zhuǎn)導(dǎo)進(jìn)入細(xì)胞。對照蛋白LMP3不具備入胞轉(zhuǎn)導(dǎo)能力。2將純化重組蛋白分別與人骨髓問充質(zhì)干細(xì)胞共孵育，檢測重組蛋白對人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的成骨分化誘導(dǎo)效能。結(jié)果提示100NGML的TATLMP3與HMSCS共孵育，可誘導(dǎo)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞Ⅰ型膠原、堿性磷酸酶、骨鈣素等成骨細(xì)胞標(biāo)志基因的表達(dá)，培養(yǎng)14天后可觀察到鈣結(jié)節(jié)形成。半定量RTPCR提示，與TATLMP3共孵育后，人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞BMP24，67基因水平表達(dá)上調(diào)。

簡介：點(diǎn)擊查看更多血管長段橋接腓骨骨皮瓣移植修復(fù)小腿皮膚軟組織缺損并骨缺損的研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：CLINICALEFFICACYOFWUGUTENGTABLETSINTHEADJUVANTTREATMENTOFREFRACTORYANDRELAPSEDACUTEMYELOIDLEUKEMIAANDMYELODYSPLASTICSYNDROMEPATIENTSADISSERTATIONSUBMITTEDFORTHEMASTERSDEGREECANDIDATETONGXIAOLUADVISERPROFSUNXUEMEINANJINGUNIVERSITYOFTCM，NANJING，CHINA原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者需親筆簽名白聲蚜％PL埠B月F日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)南京中醫(yī)藥大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮FT或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密口，在一年解密后適用本授權(quán)書。本學(xué)位論文屬于不保密口。請?jiān)谝陨戏娇騼?nèi)打“√”學(xué)位做作者。需親筆，虢潲如埠蛔F日導(dǎo)師需親筆簽名≯甥肇YL夠年6月I咱

簡介：分類號一密級一?UDC一一一一論文編號碩士學(xué)位論文MASTERTHESIS不同年齡段正常人前庭誘發(fā)性肌源性電位參數(shù)的探討高穎大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者及指導(dǎo)教師完全了解大連醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意大連醫(yī)科大學(xué)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交學(xué)位論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)大連醫(yī)科大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。論文作者簽名指導(dǎo)教師簽名簽字日期盟年魚月三日赫