簡(jiǎn)介：目的探討可注射性纖維蛋白膠聯(lián)合大鼠肌源干細(xì)胞移植對(duì)女性壓力性尿失禁大鼠模型的作用及機(jī)制，為細(xì)胞治療女性壓力性尿失禁提供新的思路。方法⑴采用改良差速貼壁法培養(yǎng)大鼠MDSCS，分別采用流氏細(xì)胞儀技術(shù)、細(xì)胞免疫熒光化學(xué)、免疫細(xì)胞化學(xué)方法對(duì)P3MDSCS進(jìn)行表型鑒定，對(duì)分化培養(yǎng)傳3代的MDSCS檢測(cè)MYHC蛋白表達(dá)。⑵于6孔板中分別進(jìn)行膠中立體培養(yǎng)及膠表面培養(yǎng)P3MDSCS1105ML，掃描電鏡下觀察接種第1、7天細(xì)胞形態(tài)；于96孔板中分別進(jìn)行三組P3MDSCS培養(yǎng)5103孔膠中培養(yǎng)組A、膠表面培養(yǎng)組B、孔板表面培養(yǎng)組C。倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)，MTS法檢測(cè)各組細(xì)胞增殖情況。⑶以最適MOI值的攜帶綠色熒光蛋白GFP的慢病毒感染P1MDSCS，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)感染效率，并傳代備用。采用雙側(cè)陰部神經(jīng)切除建立雌性大鼠壓力性尿失禁模型，75只成年雌性大鼠隨機(jī)均分為五組聯(lián)合注射組FM及單細(xì)胞注射組M以1106個(gè)細(xì)胞只的細(xì)胞數(shù)注入尿道距膀胱約05CM處，并設(shè)纖維蛋白膠注射組F、溶劑對(duì)照組D、假手術(shù)組S為不同對(duì)照組；每組再按注射后1周、2周、4周分為3個(gè)亞組每組5只，采用多重免疫熒光染色技術(shù)及激光共聚焦掃描顯微鏡評(píng)價(jià)移植細(xì)胞存活及分化；尿動(dòng)力學(xué)評(píng)價(jià)注射后1、2、4周尿道閉合功能；熒光定量PCR法及免疫組織化學(xué)法檢測(cè)注射后1、2、4周近端尿道組織胰島素樣生長(zhǎng)因子1IGF1、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子VEGF表達(dá)；并評(píng)價(jià)注射后4周近端尿道毛細(xì)血管生成；伊紅蘇木素HE及MASSON染色評(píng)價(jià)注射后4周近端尿道組織病理學(xué)。結(jié)果①原代培養(yǎng)的大鼠MDSCS分離后72小時(shí)貼壁，14～16天70％融合可傳代；傳1、3代的細(xì)胞增殖較快，傳7代的細(xì)胞增殖減慢。細(xì)胞鑒定結(jié)果CD34弱陽性2115％、CD45陰性085％、SCA1為強(qiáng)陽性、DESMIN高表達(dá)；分化培養(yǎng)傳3代的MDSCS，肌管MYHC呈強(qiáng)陽性表達(dá)。②在膠中培養(yǎng)A組的細(xì)胞呈緩慢增長(zhǎng)趨勢(shì)，滯留期約為4天，第8天逐漸進(jìn)入平臺(tái)期；膠表面培養(yǎng)B組及培養(yǎng)板表面培養(yǎng)C組細(xì)胞生長(zhǎng)滯留期約為3天，第7天進(jìn)入平臺(tái)期。A組細(xì)胞倍增時(shí)間長(zhǎng)于B、C組但無明顯差別P＞005，B組與C組細(xì)胞倍增時(shí)間相近P＞005。③以最適MOI為20的GFP慢病毒感染P1MDSCS并傳代至P3時(shí)GFP陽性細(xì)胞均達(dá)9174％以上。在體內(nèi)，注射后1周，聯(lián)合注射組存活細(xì)胞的數(shù)量較單細(xì)胞注射組明顯增多P＜005，注射后4周，兩組均可見MDSCS融合于宿主肌層，均可見肌管分化，聯(lián)合注射組MYHC陽性表達(dá)多于單細(xì)胞注射組。不同時(shí)間點(diǎn)腹壓漏尿點(diǎn)壓力及最大膀胱容量聯(lián)合注射組及單細(xì)胞注射組較溶劑對(duì)照組明顯增加P＜001，聯(lián)合注射組略高于單細(xì)胞注射組但無差別。聯(lián)合注射組近端尿道IGF1、VEGF表達(dá)1、2周明顯上調(diào)，與溶劑對(duì)照組相比，差異顯著P＜001，而單細(xì)胞注射組僅于移植后1周高于溶劑對(duì)照組P＜005。聯(lián)合注射組于注射后1周VEGF表達(dá)高于單細(xì)胞注射組P＜005；注射后4周，聯(lián)合注射組近端尿道毛細(xì)血管密度明顯增加，高于其余各組P＜001；聯(lián)合注射組肌肉膠原比率低于假手術(shù)組P＜001，明顯高于其余各組P＜001。結(jié)論利用改良差速貼壁法培養(yǎng)大鼠MDSCS簡(jiǎn)便易行、純度高；纖維蛋白膠與體外培養(yǎng)的大鼠MDSCS具有良好的生物相容性；纖維蛋白膠作為組織工程支架可促進(jìn)移植細(xì)胞的早期存活、分化，促進(jìn)模型大鼠近端尿道IGF1、VEGF表達(dá)，增加新生血管的形成，促進(jìn)尿道肌層的再生修復(fù)，潛在促進(jìn)移植細(xì)胞提高尿道閉合功能。

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簡(jiǎn)介：背景及目的高壓電燒傷后創(chuàng)面的局部變化受多種因素影響，如電流強(qiáng)度、電壓、組織電阻、電流的徑路和接觸電源時(shí)間長(zhǎng)短等，這些因素導(dǎo)致?lián)p傷組織局部病理生理改變極為復(fù)雜。在深度燒傷和電損傷及各種創(chuàng)傷等臨床治療中，經(jīng)常存在著組織損傷程度不一正常組織、壞死組織和損傷組織共存和組織壞死界限不清晰的困難問題，故在這種創(chuàng)面修復(fù)的過程中，難以一次性準(zhǔn)確清除壞死組織，從而導(dǎo)致不能滿意地愈合，尤其在電損傷后可能繼續(xù)造成更大范圍局部組織壞死，給臨床治療帶來極大困難，由于電損傷后局部損傷機(jī)制非常復(fù)雜，國(guó)內(nèi)自1984年以來，就對(duì)如何阻斷損傷后壞死的組織代謝產(chǎn)物及其所產(chǎn)生的后果進(jìn)行了較為系統(tǒng)的研究。朱志祥教授首創(chuàng)的局部組織透析技術(shù)在深度燒傷早期修復(fù)、電損傷的急診修復(fù)和整形外科領(lǐng)域組織瓣移植中成熟應(yīng)用，取得了很好的療效。然而目前局部組織透析促進(jìn)創(chuàng)傷愈合具體機(jī)制尚未闡明，因此朱志祥等對(duì)此進(jìn)行了系列研究，并中標(biāo)于2005年廣東省深圳市科技局重點(diǎn)計(jì)劃項(xiàng)目課題名稱為超滑微型燒傷透析引流管及臨床應(yīng)用研究朱志祥，張立勇等，本實(shí)驗(yàn)是該課題的一部分，主要是對(duì)電損傷后局部骨骼肌肉組織的透析治療進(jìn)行深入研究，目的在于探求局部組織透析促進(jìn)創(chuàng)傷愈合的機(jī)制，以更進(jìn)一步了解創(chuàng)傷愈合的過程。本實(shí)驗(yàn)研究的成功，將建立局部組織透析的部分理論基礎(chǔ)，以便更成功推廣應(yīng)用此項(xiàng)技術(shù)，特別是在整形外科、深度燒傷修復(fù)治療和電損傷急診修復(fù)等領(lǐng)域中，經(jīng)各種組織瓣轉(zhuǎn)移修復(fù)后的創(chuàng)傷修復(fù)應(yīng)用，造福廣大患者，帶來積極社會(huì)效益。方法選用普通級(jí)新西蘭大白兔12只為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，雌雄不拘，月齡45個(gè)月，體重225公斤，動(dòng)物由南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心購回后在醫(yī)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)中心單個(gè)分籠飼養(yǎng)，自由攝取標(biāo)準(zhǔn)的兔飼料與兔一并購回及清潔水，室溫20±2℃。隨機(jī)等分為實(shí)驗(yàn)組A和對(duì)照組B，均按照國(guó)內(nèi)朱志祥等所用方法制作成兔“非熱”高壓電損傷特重度的標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?。在?biāo)準(zhǔn)模型中，用兩種不同的方法對(duì)電損傷局部骨骼肌肉組織進(jìn)行處理按朱志祥方法配制的局部組織透析液進(jìn)行局部組織透析和單純用09％生理鹽水進(jìn)行局部組織沖洗引流，每次處理完畢后將兔放回籠飼養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)組AN6同標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ鸵粯影驯緦?shí)驗(yàn)各模型電損傷區(qū)分A、B、C、D、E五區(qū)，透析管自E區(qū)置入到電損傷部位肌肉組織深層內(nèi)，從A區(qū)出，E端的透析管接自行配制的局部組織透析液透析液主要組成為5％葡萄糖、09％生理鹽水、2％利多卡因、氯霉素等進(jìn)行局部組織透析，慢速灌注3～5滴分，4H、10H、20H、30H、45H在A端接負(fù)壓引流瓶收集透析引流液；對(duì)照組BN6單純用09％生理鹽水處理，余操作均同A組在A端接負(fù)壓引流瓶收集沖洗引流液。比較觀察以下指標(biāo)1不同處理方法對(duì)損傷局部組織微環(huán)境電解質(zhì)K、NA、CL、CA濃度的變化和局部組織間液滲透壓的變化影響。2不同處理方法對(duì)電損傷局部組織間液中IL1、IL6、IL8、TNFΑ的影響變化。結(jié)果一損傷局部組織微環(huán)境電解質(zhì)中K、NA、CL、CA濃度變化和局部組織間液滲透壓的變化處理期間內(nèi)A組各離子濃度和滲透壓濃度均較B組不同程度提前接近到常態(tài)平衡，采用重復(fù)測(cè)量設(shè)計(jì)方差分析表明A、B組間比較和組內(nèi)各時(shí)間點(diǎn)的指標(biāo)比較均有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P0019～0179。二電損傷局部組織間液中IL1、IL6、IL8、TNFΑ的變化處理期間內(nèi)各時(shí)問點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組A組織間液中IL1、IL6、IL8濃度從4H就開始一直較實(shí)驗(yàn)組B低，并成逐漸下降趨勢(shì)，且實(shí)驗(yàn)組A下降的幅度明顯比組B大；然而，從4H開始TFNFΑ濃度實(shí)驗(yàn)組A卻較對(duì)照組B高，也在逐漸下降。采用重復(fù)測(cè)量設(shè)計(jì)方差分析均表明組問比較和組內(nèi)各時(shí)間點(diǎn)的指標(biāo)比較均有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P001～005。結(jié)論1本研究成功地應(yīng)用“非熱”高壓電損傷特重度模型進(jìn)行局部組織透析實(shí)驗(yàn)研究，并創(chuàng)用了負(fù)壓引流收集透析液的技術(shù)，探索出局部組織透析技術(shù)的部分機(jī)制。2發(fā)現(xiàn)了電損傷局部組織間液中存在大量的IL1、IL6、IL8，TNFΑ，發(fā)現(xiàn)了電損傷局部組織間液中電解質(zhì)K、NA、CL、CA2濃度和滲透壓有意義的變化，證明了電損傷后包括細(xì)胞膜在內(nèi)的膜結(jié)構(gòu)損傷存在，導(dǎo)致局部電解質(zhì)濃度和滲透壓的紊亂，并引起局部組織細(xì)胞水腫、破裂乃至壞死的惡性循環(huán)。3本研究證明了電損傷后盡早清除明顯壞死組織再予以持續(xù)局部組織透析，通過透析液的直接作用可以穩(wěn)定局部微環(huán)境電解質(zhì)K、NA、CL、CA2的濃度和局部組織間液的滲透壓，穩(wěn)定包括細(xì)胞膜在內(nèi)的膜性結(jié)構(gòu)，從而減少局部組織因局部微環(huán)境電解質(zhì)破壞而導(dǎo)致的惡性循環(huán)，維持組織細(xì)胞生長(zhǎng)耐以生存的內(nèi)環(huán)境的動(dòng)態(tài)平衡。4本研究證明了電損傷后盡早清除明顯壞死組織再予以持續(xù)局部組織透析，通過透析液的直接作用可以減少損傷局部組織問液中炎癥介質(zhì)IL1、IL6、IL8濃度，增加損傷局部組織問液中TNFΑ濃度，從而減少局部組織中炎癥介質(zhì)持續(xù)高含量存在導(dǎo)致的組織損傷和壞死惡性循環(huán)。5本研究證明了電損傷后盡早清除明顯壞死組織再予以持續(xù)局部組織透析，一定程度能阻止電損傷局部組織細(xì)胞壞死進(jìn)程，并能促進(jìn)損傷組織細(xì)胞愈合，這也為我們進(jìn)一步推廣臨床應(yīng)用打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。

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簡(jiǎn)介：妊娠對(duì)育齡婦女骨代謝的影響中文摘要目的通過對(duì)不同年齡段孕婦骨代謝指標(biāo)的跟蹤檢測(cè)，探討妊娠對(duì)不同年齡孕婦骨代謝的影響。方法選擇2012年9月至2013年11月在我院產(chǎn)科孕期查胎至足月住院分娩的持續(xù)補(bǔ)鈣單胎健康初產(chǎn)孕婦120名為調(diào)查對(duì)象，同時(shí)選取120名健康未孕女性為對(duì)照組，年齡分段為2025，2530，3035，3540共4組25歲及25歲之前為25歲組，30歲及30歲之前為30歲組，35歲及35歲之前為35歲組，40歲及40歲之前為40歲組。于懷孕16W和32W抽取空腹血，檢測(cè)血清骨代謝生化指標(biāo)血清骨鈣素BGP、I型膠原交聯(lián)羧基末端肽CTX、血清堿性磷酸酶ALP、血清鈣CA、磷P、鎂MG濃度。并于產(chǎn)后5天內(nèi)應(yīng)用雙能X線測(cè)量橈骨密度。所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，觀察各年齡段骨代謝標(biāo)志物及骨密度的變化規(guī)律。結(jié)果健康對(duì)照組不同年齡組BGP、CTX、ALP比較均有顯著差異P001。孕16周與孕32周血清骨鈣素BGP分別是2580士1505NG／ML、25641087NG／ML；I型膠原交聯(lián)羧基末端肽CTX分別是040加23NG／ML、041L021NG／ML；血清堿性磷酸酶ALP分別是4227806U／L、4373士1173U／L；血清鈣CA分別是222017MMOL／L、205士029MMOL／L；血清磷P分別是103I022MMOL／L、0984020MMOL／L；血清鎂MG分別是096士022MMOL／L、089生019MMOL／L。產(chǎn)后骨密度BMD046如11G／CM2。與正常對(duì)照組婦女比較各年齡組孕婦BGP、CTX、ALP均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義T3262359，P001；孕婦血清鈣CA在25歲組32孕周較低PO01；孕婦血清磷P除25歲組16孕周接近正常外，均處于較高水平P001；血清鎂MG在25歲組表現(xiàn)出較高水平P001，在35歲組水平較低P001；25歲組孕婦骨密度最低，35歲組達(dá)峰P001，30與40歲組接近正常。妊娠16W與32W比較，血清BGP、CTX、ALP、血清P明顯升高PO01，而血清CA、MG則降低P005。THEINFLUENCEOFPREGNANCYFORWOMENOFCHILDBEARINGAGEBONEMETABOLISMABSTRACTOBJECTIVETOSTUDYEXPLORETHEPREGNANCYOFWOMENOFCHILDBEARINGAGEBONEMETABOLISMOFDIFFERENTAGEMETHODS120HEALTHYPARTURIENTS，WHOHAVETOOKCALCIUMSUPPLEMENTSANDMILKDURINGPREGRANCY，WITHSINGLETONANDTERMDELIVERYWERESELECTED證OURHOSPITALBETWEENSEPTEMBER2012ANDNOVEMBER2013THESEPARTURISWEREDIVIDEDINTOFOURGROUPSACCORDINGTOAGE，F(xiàn)ORM20TO25，25TO30，30TO35，35TO40BEFORE25ANDIS25YEARSOLDGROUPBEFORETHEAGEOF30AND30FOR30YEARSOLDGROUP，35ANDFOR35YEARSBEFORETHEAGEOF35GROUPS，40YEARSOLDTO40YEARSOLDGROUPAND40YEAROFAGETAKEONANEMPTYSTOMACHBLOODTWICE，INSTAGESTODETECTSERUMBONEMETABOLICBIOCHEMICALINDICATORSBONEGLAPROTEINBGP，SERUMCARBOXYTERMINALTELOPEPTIDEOFCOLLAGENTYPEIICTPCTXSERUMALKALINEPHOSPHATASEALPANDSERUMCALCIUMCA，PHOSPHORUSPANDMAGNESIUMCONCENTRATIONMGTOM嘲KGDRETHERADIALDENSITYWITHINPOSTPARTUMFIVEDAYSOBSERVEALLAGESBONEMETABOLICMARKERSANDBONEMINERALDENSITYANDTHEDATESⅥ蚴TREATEDBYSTATISTICSRESULTSHL16WEEKAND32WEEKOFPREGNANCYTHEMEANBGPWERE25801505NG／ML、25641087NG／ML，RESPECTIVELYCTX，O40O23NG／ML、041021NG／M1M42274806U／L、43731173U／LSERUMCALCIUMCA222_017MMOL／L、2054029MMOL／LSERUMPHOSPHORUSP，1034022MMOL／L、098_4020MMOL／L，SERUMMAGNESIUMMG，0964022MMOL／L、O，894019MMOL／LBONEMINERALDENSITYBMDOFPOSTPARTUMWOMENWAS0464O11G／CM2COMPAREDWITHNORMALCONTROLGROUPALLAGEPREGNANTWOMENBGP、CTXANDALPHADSTATISTICALSIGNIFICANCE罔26～2359，P001SERUMCALCIUMCAOFTHE32WEEKPREGNANCYM25YEARSOLDAGEGROUP0O01SERUMPHOSPHORUSPSHOWED25YEARSOLDAGEGROUP16GESTATIONALAGECLOSETONORMALANDTHEOTHERTIMEAMONG蛆AGEGROUPSWEREATAHIGHERLEVELP001SERUMMAGNESIUMM曲IN25YEARSOLDAGEGROUPSHOWEDHI曲ERLEVELSP001，THELOWLEVELOF35AGEGROUPP001THEBMDISIN20YEARSOLDAGEGROUP，35YEARSOLDAGEGROUP

簡(jiǎn)介：分類號(hào)R783．5密級(jí)公開單位代碼10422學(xué)號(hào)20122103170霧辦謄SHANDONGUNIVERSITY碩士學(xué)位論文THESISFORMASTERDEGREE同等學(xué)力申請(qǐng)碩士學(xué)位論文題目改良TWINBIOCK矯治器結(jié)合高位牽引對(duì)骨性II類高角病例冶平面影響的研究RESEARCHONTHEEFFECTOFMODIFIEDTWINBLOCKAPPLIANCECOMBINEDWITHHIGHPULLONTHEOCCLUSALPLANEOFSKELETALIIHIGHANGLECASES合作導(dǎo)師2015年11月10日1目錄中文摘要??????????????????????????????．1ABSTRACT??????????????????????????????????????．．3符號(hào)說明??????????????????????????????．6前言????????????????????????????????7日U芒J??????????????????????????????????????????．．。7材料料與方法???????????????????????????．13結(jié)果?????????????????????????????????????????．．19討{念?????????????????????????????????????????．．22結(jié)論?????????????????????????????????????????．．25附圖表??????????????????????????????．26臨床病例報(bào)道???????????????????????????．29參考文獻(xiàn)?????????????????????????????．34致謝???????????????????????????????????????37攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)位論文???????????????????38

簡(jiǎn)介：目的血管平滑肌細(xì)胞VULARSMOOTHMUSCLECELLSVSMCS上的大電導(dǎo)鈣激活鉀通道LARGECONDUCTANCECALCIUMACTIVATEDPOTASSIUMCHANNELSBKCA的活動(dòng)直接參與了血管平滑肌的舒張調(diào)節(jié)在血壓維持中起重要作用。在天然細(xì)胞上有關(guān)BKCA通道的動(dòng)力學(xué)特性、通道調(diào)控點(diǎn)、藥物作用靶點(diǎn)等的研究存在一定的局限性但是將BKCA通道蛋白重建到平面雙分子層脂質(zhì)膜PANARLIPIDBILAYERSPLBMS上則可更好地進(jìn)行以上研究。本實(shí)驗(yàn)旨在摸索建立穩(wěn)定的平面雙分子層脂質(zhì)膜制備方法并摸索將克隆的血管平滑肌細(xì)胞BKCA通道蛋白融合其上進(jìn)行單通道電流研究。本項(xiàng)目通過聯(lián)合單通道膜片鉗技術(shù)考馬斯亮藍(lán)染色和免疫印跡法WESTERNBLOT等方法證實(shí)所建立的人工BKCA通道重建技術(shù)的可行性為下一步研究BKCA通道調(diào)控點(diǎn)和藥物作用靶點(diǎn)提供技術(shù)支持。方法1PLBMS實(shí)驗(yàn)將不同濃度的卵磷脂或不同比例的卵磷脂與膽固醇混合液作為成膜液采用涂抹法制備PLBMS；實(shí)驗(yàn)中控制膜脂質(zhì)的成分和周圍電解質(zhì)環(huán)境尋找最佳成膜條件；將含有兩性霉素B的脂質(zhì)體或ΑTOXIN加入膜的一側(cè)溶液內(nèi)使其與PLBMS融合并形成孔道觀察孔道形成過程中脂質(zhì)膜的穩(wěn)定性；2重建到PLBMS上的BKCA的單通道實(shí)驗(yàn)將BKCA通道蛋白重建到PLBMS上進(jìn)行單通道電流記錄通道信號(hào)經(jīng)BC535放大器放大1KHZ濾波CLAMPEX102軟件采集并經(jīng)CLAMPFIT101軟件分析。3轉(zhuǎn)染有BKCAΑ亞基的人胚腎HUMANEMBRYONICKIDNEYHEK293細(xì)胞上的BKCA單通道膜片鉗實(shí)驗(yàn)該實(shí)驗(yàn)作為重建到脂質(zhì)膜上的BKCA的對(duì)照實(shí)驗(yàn)。選取立體感強(qiáng)、狀態(tài)好并轉(zhuǎn)染有BKCAΑ亞基的HEK293細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)在對(duì)稱性高鉀溶液中采用內(nèi)面向外模式INSIDEOUTPATCH記錄BKCA的單通道電流。單通道電流信號(hào)經(jīng)CEZ2200膜片鉗放大器放大1KHZ濾波后輸入計(jì)算機(jī)經(jīng)PCLAMP100軟件采集記錄并用CLAMPFIT101軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。4考馬斯亮藍(lán)染色和WESTERNBLOT檢測(cè)制備的BKCA脂質(zhì)體的純度收集低滲裂解的轉(zhuǎn)染有BKCAΑ亞基的HEK293細(xì)胞碎片經(jīng)208蔗糖MOPS密度梯度離心得BKCA脂蛋白體將BKCA脂蛋白體變性處理后加樣選擇合適的電壓進(jìn)行SDSPAGE電泳和轉(zhuǎn)印。用BKCAΑ兔抗人多克隆抗體1500孵育洗膜后加入HRP標(biāo)記的羊抗兔IGG二抗110000孵育。GELDOC凝膠成像系統(tǒng)采集圖像QUANTITYONE軟件分析結(jié)果。結(jié)果1涂抹法制備PLBMS實(shí)驗(yàn)采用不同濃度卵磷脂PHOSPHATIDYLCHOLINEPC制備的PLBMS可穩(wěn)定35H而用不同比例的卵磷脂PC和膽固醇CHOLESTERYLCH制備的PLBMS可穩(wěn)定25H。兩性霉素B及ΑTOXIN形成孔道過程中脂質(zhì)膜很穩(wěn)定。2重建到平面雙分子層脂質(zhì)膜上的BKCA的單通道基本特性①重建的BKCA通道電導(dǎo)值大為2068±1686PSN4。②通道具有明顯的電壓依賴性在60MV60MV的測(cè)試電壓下隨著細(xì)胞膜電位去極化程度的增加BKCA通道的電流幅度AMPLITUDEAMP及通道的開放概率OPENPROBABILITYNPO顯著增加通道的平均開放時(shí)間OPENTIMETO延長(zhǎng)平均關(guān)閉時(shí)間CLOSETIMETC縮短。③通道具有明顯的CA2敏感性CISTRANS側(cè)浴液中CA2濃度分別分別由0MM增加到1ΜM和100ΜM時(shí)BKCA通道的開放概率NPO明顯增加呈CA2激活特性。④BKCA通道具有K選擇性CISTRANS側(cè)K濃度為140140MM時(shí)重建的BKCA通道反轉(zhuǎn)電位在0MV左右N4K濃度為40140MM時(shí)重建的BKCA通道反轉(zhuǎn)電位在30MV左右N2而根據(jù)NERNST方程計(jì)算K濃度為140140MM時(shí)K平衡電位KEQUILIBRIUMPOTENTIALEK為0MVK濃度為40140MM時(shí)EK為326MV。3在INSIDEOUT模式下HEK293細(xì)胞上BKCA的單通道的基本特性①HEK293細(xì)胞上的BKCA通道電導(dǎo)值大為2127±771PSN8。②通道具有明顯的電壓依賴性在0MV60MV的測(cè)試電壓下隨著細(xì)胞膜電位去極化程度的增加BKCA通道的電流幅度AMP及通道的開放概率NPO顯著增加通道的平均開放時(shí)間TO延長(zhǎng)平均關(guān)閉時(shí)間TC縮短。③通道具有明顯的CA2敏感性BKCA通道的開放概率NPO隨浴液中CA2FREE濃度增加明顯增加呈CA2激活特性。4考馬斯亮藍(lán)染色和WESTERNBLOT檢測(cè)結(jié)果制備的脂蛋白體PROLIPOSOME含BKCAΑ亞基分子量大小為100KDA制備的脂蛋白體同時(shí)含有其他蛋白質(zhì)。結(jié)論1涂抹法可用于平面雙分子層脂質(zhì)膜的制備。2平面雙分子層脂質(zhì)膜技術(shù)可用于BKCA通道的藥理學(xué)和動(dòng)力學(xué)特性的研究。3重建后的BKCA具有電導(dǎo)值大電壓依賴性CA2敏感性和K選擇性。4目前制備的BKCA脂蛋白體含有其他蛋白。

簡(jiǎn)介：目的建立兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞BONEMARROWMESENCHYMALSTEMCELLS，BMSCS的體外培養(yǎng)和成骨誘導(dǎo)體系。對(duì)BMSCS的抽取方式進(jìn)行改良，評(píng)價(jià)BMSCS體外傳代培養(yǎng)時(shí)不同培養(yǎng)基對(duì)BMSCS增殖能力的影響。比較自體BMSCS、成骨誘導(dǎo)后的BMSCS及二者聯(lián)合經(jīng)皮移植后體內(nèi)成骨能力的差異，評(píng)價(jià)其經(jīng)皮注射修復(fù)小段骨缺損的療效，為骨組織工程選擇種子細(xì)胞提供依據(jù)，為臨床上治療小段骨缺損以及骨不連提供一個(gè)新的思路。方法1抽取日本大耳白兔骨髓，用全骨髓培養(yǎng)法進(jìn)行BMSCS的體外培養(yǎng)、擴(kuò)增。取第2代BMSCS進(jìn)行成骨誘導(dǎo)。定量測(cè)定培養(yǎng)液上清ALP活性，找出最強(qiáng)成骨活性的時(shí)間窗，并對(duì)成骨誘導(dǎo)前后的細(xì)胞增殖能力、成骨活性等生物學(xué)特性進(jìn)行比較。2隨機(jī)將16只日本大耳白兔32側(cè)髂部分為4組，前3組用骨穿針取骨髓，第4組用普通一次性20毫升加藥注射器抽取骨髓，分別用ΑMEM、DMEF12、DMEM、DMEM行全骨髓培養(yǎng)法制備BMSCS。比較4組細(xì)胞長(zhǎng)滿培養(yǎng)瓶所需天數(shù)及第2代BMSCS生長(zhǎng)曲線。3制作新西蘭大白兔橈骨中段15MM骨缺損模型，20只兔共40側(cè)骨缺損模型隨機(jī)分為5組，每組8側(cè)。A組經(jīng)皮植入自體110個(gè)BMSCS和110個(gè)己向成骨細(xì)胞誘導(dǎo)的BMSCS，B組植入210個(gè)已向成骨細(xì)胞誘導(dǎo)的BMSCS，C組植入210個(gè)BMSCS，D組植入纖維蛋白膠復(fù)合5MGBMP，E組為空白對(duì)照組。術(shù)后對(duì)動(dòng)物進(jìn)行大體觀察、攝X線片觀察各組不同時(shí)相骨缺損修復(fù)情況，比較不同時(shí)相的骨缺損區(qū)X線阻射密度、并于術(shù)后第4，8，12周取出骨缺損區(qū)標(biāo)本進(jìn)行大體觀察和組織學(xué)切片觀察；取第12周標(biāo)本進(jìn)行生物力學(xué)檢測(cè)。結(jié)果1骨髓穿刺針與普通一次性20毫升加藥注射器所取骨髓經(jīng)全骨髓培養(yǎng)法獲得的BMSCS的數(shù)量及細(xì)胞形態(tài)、生長(zhǎng)曲線沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。2ΑMEM培養(yǎng)基比DMEM、DMEF12行全骨髓培養(yǎng)法制備BMSCS所需時(shí)間大大縮短，加入骨誘導(dǎo)成分后成骨誘導(dǎo)效率更高。3BMSCS與成骨誘導(dǎo)后的BMSCS聯(lián)合移植組在12周內(nèi)骨缺損區(qū)新生骨的數(shù)量和質(zhì)量顯著優(yōu)于單純移植BMSCS或單純移植成骨誘導(dǎo)后的BMSCS，空白組骨缺損主要由纖維結(jié)締組織填充。X線顯示術(shù)后4周即可發(fā)現(xiàn)4組動(dòng)物的橈骨缺損區(qū)域均有明顯骨痂生成，第12周時(shí)A組即細(xì)胞聯(lián)合移植組的骨缺損完全愈合，各時(shí)相局部X線阻射密度值顯示，A、D組的新生骨痂最多，且可見髓腔再通現(xiàn)象；生物力學(xué)檢測(cè)顯示A組橈骨標(biāo)本的四點(diǎn)彎曲斷裂載荷均顯著高于其余2實(shí)驗(yàn)組。結(jié)論普通一次性20毫升加藥注射器可代替骨穿針抽取兔髂嵴部位骨髓；ΑMEM培養(yǎng)基比DMEM、DMEF12更適合兔BMSCS的培養(yǎng)及成骨方向的誘導(dǎo)；BMSCS與成骨誘導(dǎo)后的BMSCS聯(lián)合移植具有更強(qiáng)的成骨能力，可作為種子細(xì)胞應(yīng)用于骨組織工程。

簡(jiǎn)介：目的探討針極肌電圖及體感誘發(fā)電位技術(shù)在膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎中的變化特點(diǎn)及應(yīng)用價(jià)值。方法選取符合條件的55例膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎患者另選取47名同年齡的正常健康對(duì)照組進(jìn)行比較研究。對(duì)所有受試者檢查針極肌電圖及軀體感覺誘發(fā)電位。主要觀察①股內(nèi)側(cè)肌、股直肌及股外側(cè)肌的針電極插入電位時(shí)問、輕收縮及重收縮不同狀態(tài)下電生理表現(xiàn)②體感誘發(fā)電位的刺激閾值N8、P40潛伏期P40波幅。結(jié)果1對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組股內(nèi)側(cè)肌、股外側(cè)肌、股直肌針極肌電圖插入電位時(shí)間輕收縮運(yùn)動(dòng)單位波幅、時(shí)限輕收縮多相波百分比重收縮最高波幅比較均有差異P＜005。2對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組軀體感覺誘發(fā)電位的刺激閾值、P40潛伏期、波幅N8潛伏期有差異P＜005表現(xiàn)為實(shí)驗(yàn)組患者刺激閾值較對(duì)照組明顯提高、P40潛伏期延長(zhǎng)及波幅降低、N8潛伏期延長(zhǎng)。結(jié)論1膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎患者的股內(nèi)側(cè)肌、股直肌、股外側(cè)肌的針極肌電圖存在異常多呈神經(jīng)源性損傷主要表現(xiàn)為實(shí)驗(yàn)組輕收縮肌肉運(yùn)動(dòng)單位的波幅升高時(shí)程增寬、輕收縮多相波百分比增高、重收縮最高幅增高。2下肢體感誘發(fā)電位異常提示KOA患者存在脊髓及或中樞較高水平的感覺傳導(dǎo)通路障礙。3針極肌電圖技術(shù)聯(lián)合體感誘發(fā)電位技術(shù)為研究膝關(guān)節(jié)的神經(jīng)肌肉功能提供了一種新手段并為為臨床早期診斷KOA提供參考。

簡(jiǎn)介：目的探討創(chuàng)傷性膈肌破裂TRAUMATICDIAPHRAGMRUPTURETDR的診斷與治療方法方法回顧性分析我院19922002年間收治的4例TDR患者的臨床診治記錄結(jié)論TDR病因多種多樣癥狀、體癥也較為復(fù)雜早期常規(guī)檢查手段不易及時(shí)發(fā)現(xiàn)漏診率、誤診率較高早期診斷的關(guān)鍵是1、提高對(duì)TDR的認(rèn)識(shí)注意其發(fā)生的可能性2、詳細(xì)詢問病史全面進(jìn)行體格檢查將各系統(tǒng)的癥狀、體征綜合分析完善輔助檢查綜合應(yīng)用多種檢查方法3、在胸部外傷或復(fù)合性外傷患者中對(duì)受傷后期疑診TDR的患者可在完善輔助檢查后行剖胸探查術(shù)TDR治療的根本有效手段是修補(bǔ)破裂膈肌只要明確了診斷在患者身體條件允許的情況下都要進(jìn)行破裂膈肌的修補(bǔ)

簡(jiǎn)介：中圖分類號(hào)UDC學(xué)校代碼10055密級(jí)公開高蕊犬潺碩士學(xué)位論文1￡4010TUBERIN在人子宮肌和子宮肌瘤組織中表達(dá)及功能研究EXIANDFUNCTION“TUB,RININHUMANMYOMETRIUXPRESSLONANDUNCTLONOT1UBERLNANMYOMETRLUMLANDUTERINELEIOMYOMA申請(qǐng)學(xué)位醫(yī)堂亟±學(xué)科專業(yè)魚瘞堂南開大學(xué)研究生院二。一O年五月南開大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行研究工作所取得的研究成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本學(xué)位論文的研究成果不包含任何他人創(chuàng)作的、已公開發(fā)表或者沒有公開發(fā)表的作品的內(nèi)容。對(duì)本論文所涉及的研究工作做出貢獻(xiàn)的其他個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名崔童堡2010年5月25日非公開學(xué)位論文標(biāo)注說明根據(jù)南開大學(xué)有關(guān)規(guī)定，非公開學(xué)位論文須經(jīng)指導(dǎo)教師同意、作者本人申請(qǐng)和相關(guān)部門批準(zhǔn)方能標(biāo)注。未經(jīng)批準(zhǔn)的均為公開學(xué)位論文，公開學(xué)位論文本說明為空白。論文題目申請(qǐng)密級(jí)口限制≤2年口秘密≤10年口機(jī)密≤20年保密期限20年月日至20年月日審批表編號(hào)批準(zhǔn)日期20年月日限制★2年最長(zhǎng)2年，可少于2年秘密★L(fēng)O年最長(zhǎng)5年，可少于5年機(jī)密★20年最長(zhǎng)10年，可少于10年

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多男性股骨頸骨折和非創(chuàng)傷性股骨頭壞死患者松質(zhì)骨強(qiáng)度測(cè)量和差異研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：目的探究骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞BMMSCS經(jīng)過糖基化修飾后向損傷組織靶向遷移能力的改變情況；通過體外對(duì)比檢測(cè)普通BMMSCS和糖基化的BMMSCS在配體形成、與選擇素結(jié)合能力等方面的差異，最終在骨缺損模型中對(duì)比普通BMMSCS與糖基化的BMMSCS向骨缺損處的靶向遷移情況，為骨缺損的治療奠定一定的實(shí)驗(yàn)理論基礎(chǔ)。方法首先選用1只新西蘭兔，2個(gè)月齡，體質(zhì)量15KG，抽提骨髓，體外分離、培養(yǎng)、擴(kuò)增BMMSCS；免疫組織化學(xué)法及成骨誘導(dǎo)法鑒定所培養(yǎng)的細(xì)胞；一部分BMMSCS運(yùn)用脂質(zhì)體法將含有Α13巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶VI（FUT6）基因的質(zhì)粒（PCDNA31）轉(zhuǎn)染BMMSCS（實(shí)驗(yàn)組），另一部分則未轉(zhuǎn)染FUT6基因（對(duì)照組）；通過抗性篩選試劑（G418）篩選實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞后建立穩(wěn)定表達(dá)FUT6的BMMSCS細(xì)胞株（FUT6BMMSCS）。ELISA法檢測(cè)BMMSCS和FUT6BMMSCS的FUT6表達(dá)量及唾液酸化路易斯寡糖（SLEX）的生成量；流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)BMMSCS和FUT6BMMSCS與E選擇素、P選擇素的結(jié)合能力；BMMSCS和FUT6BMMSCS于體外用EGFP標(biāo)記；12只新西蘭兔尺骨缺損造模（缺損程度15～20CM）后分為2組（每組6只）后通過靜脈分別回輸標(biāo)記細(xì)胞于兩組同質(zhì)骨缺損動(dòng)物模型體內(nèi)，術(shù)后6、12、24H用熒光顯微鏡觀察骨缺損處髓腔組織中熒光細(xì)胞數(shù)量，評(píng)估各組熒光細(xì)胞的靶向遷移情況。結(jié)果BMMSCS易于從骨髓液中分離提取，并能夠在體外培養(yǎng)、擴(kuò)增；FUT6BMMSCS可高表達(dá)FUT6并上調(diào)SLEX結(jié)構(gòu)的生成，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜005）；流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)顯示FUT6BMMSCS相較BMMSCS與E選擇素結(jié)合力由150％提高至689；與P選擇素結(jié)合力由127提高至597；術(shù)后6、12、24H熒光顯微鏡觀察FUT6BMMSCS均較BMMSCS在骨缺損處髓腔組織中數(shù)量更多，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜005）。結(jié)論糖基化改造的BMMSCS較普通BMMSCS具有明顯的向損傷部位靶向遷移的能力。

簡(jiǎn)介：重慶醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文兒童肱骨外髁骨折后骨不連及肘外翻畸形的防治研究姓名封林申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)兒科（骨科）指導(dǎo)教師覃佳強(qiáng)20070501重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文兒童肱骨外髁骨折后骨不連及肘外翻畸形的防治研究摘要背景及目的肱骨外髁骨折是兒童最常見的肘部損傷之一，由于解剖上的特點(diǎn)及認(rèn)識(shí)上的差別，臨床上易造成漏診或延誤診治情況，而一旦治療不當(dāng)將遺留肘部畸形，導(dǎo)致功能障礙及其它中、遠(yuǎn)期并發(fā)癥，其中產(chǎn)生骨不連及肘外翻畸形的情況時(shí)有發(fā)生。由于兒童肱骨外髁骨折涉及到外上髁骨骺、肱骨小頭及滑車，骨不連會(huì)造成骨骺生長(zhǎng)抑制或生長(zhǎng)不均衡、肘部畸形以及遲發(fā)性尺神經(jīng)麻痹。骨不連加之伴發(fā)畸形，治療上要考慮增加骨愈合的幾率、減少損傷、盡可能恢復(fù)關(guān)節(jié)功能及外觀等諸多方面因素，增加了治療的難度，成為臨床上一大難題。近年來，經(jīng)過積極探索，積累了一些經(jīng)驗(yàn)，為此，本研究旨在探討兒童肱骨外髁骨折后遺畸形如骨不連、肘外翻等的成因及其預(yù)防，提高對(duì)兒童肱骨外髁骨折的認(rèn)識(shí)，并提供不同情況下相對(duì)適當(dāng)?shù)闹委煼桨?，盡可能挽回失去的功能和外觀。方法回顧性總結(jié)分析我院2004～2006年間27例肱骨外髁骨折后骨不連、肘外翻畸形的病例，其中男19例，女8例；右側(cè)16例，左側(cè)11例；受傷年齡3～10歲，平均56歲；手術(shù)年齡5～14歲，平均9歲；1

簡(jiǎn)介：碩士學(xué)位論文固定橋修復(fù)前后牙槽骨組織改建過程的生物力學(xué)研究固定橋修復(fù)前后牙槽骨組織改建過程的生物力學(xué)研究苗沛培養(yǎng)類別全日制學(xué)位類型學(xué)術(shù)學(xué)位一級(jí)學(xué)科專業(yè)類口腔醫(yī)學(xué)二級(jí)學(xué)科專業(yè)口腔臨床醫(yī)學(xué)（修復(fù)）研究方向口腔生物力學(xué)指導(dǎo)教師辛海濤教授（主任醫(yī)師）培養(yǎng)單位口腔醫(yī)院修復(fù)科二O一三年五月第四軍醫(yī)大學(xué)THEFOURTHMILITARYMEDICALUNIVERSITY分類號(hào)R7836UDC61631密級(jí)公開第四軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文目錄縮略語表1中文摘要2英文摘要5前言9文獻(xiàn)回顧10正文18實(shí)驗(yàn)一固定橋修復(fù)前后牙槽骨組織功能性改建模型的建立181材料192方法193結(jié)果234討論26實(shí)驗(yàn)二固定橋修復(fù)前后牙槽骨組織改建過程的研究291材料292方法293結(jié)果304討論33實(shí)驗(yàn)三載荷大小對(duì)固定橋修復(fù)后基牙牙槽骨組織改建的影響351材料352方法353結(jié)果364討論40實(shí)驗(yàn)四基牙附著水平不同對(duì)修復(fù)后固定橋牙槽骨組織改建的影響421材料422方法423結(jié)果43