簡(jiǎn)介：目的1體外觀察羅格列酮RSG對(duì)MC3T3E1細(xì)胞增殖和成骨分化的影響。并初步探討其細(xì)胞通路機(jī)制。2體外觀察觀察不同濃度葡萄糖對(duì)小鼠原代成骨細(xì)胞增殖和細(xì)胞分化的影響。并初步探討其相關(guān)的機(jī)制。方法1于中科院上海細(xì)胞庫(kù)購(gòu)買MC3T3E1細(xì)胞傳代在終濃度1、5ΜMOLL的RSG處理細(xì)胞對(duì)照組用等量DMSO培養(yǎng)7天和14天行堿性磷酸酶ALP染色和ALP活性檢測(cè)培養(yǎng)21天行茜素紅染色REALTIMEPCR檢測(cè)轉(zhuǎn)錄因子RUNX2、成骨標(biāo)志物ALP、骨鈣素OCN基因的表達(dá)WESTERNBLOT檢測(cè)RUNX2、ALP、ΒCATENIN、ERK12和PERK12蛋白的表達(dá)。2取出生24小時(shí)內(nèi)小鼠顱骨原代成骨細(xì)胞。使用Ⅰ型膠原免疫熒光染色和VONKOSSA染色進(jìn)行鑒定。在終濃度為55MMOLL、155MMOLL、255MMOLL葡萄糖處理細(xì)胞觀察不同葡萄糖濃度下成骨細(xì)胞的細(xì)胞增殖、堿性磷酸酶ALP活性REALTIMEPCR檢測(cè)轉(zhuǎn)錄因子RUNX2、成骨標(biāo)志物ALP、骨鈣素OCN基因的表達(dá)。結(jié)果1干預(yù)組和對(duì)照組相比隨著RSG濃度的升高成骨細(xì)胞的增殖能力逐漸減弱ALP活性減低ALP染色顏色逐漸變淺茜素紅染色鈣結(jié)節(jié)數(shù)目逐漸減少。PCR和WESTERNBLOT檢測(cè)成骨相關(guān)指標(biāo)表達(dá)降低ERK12和ΒCATENIN的表達(dá)隨著RSG濃度的升高而降低。2155MMOLL組和255MMOLL組與對(duì)照組相比骨細(xì)胞的增殖能力逐漸減弱并且呈濃度依賴性。培養(yǎng)7天正常糖組相比實(shí)驗(yàn)組ALP染色顏色逐漸變淺。PCR結(jié)果顯示RUNX2MRNA、OCNMRNA、ALPMRNA表達(dá)下降差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P結(jié)論1羅格列酮可劑量依賴性的抑制成骨細(xì)胞增殖和成骨分化這種抑制作用可能是通過WNTΒCATENIN和ERK12通路實(shí)現(xiàn)的。2高糖能抑制成骨細(xì)胞的增殖和其成熟成骨細(xì)胞分化這可能就是糖尿病患者容易并發(fā)骨質(zhì)疏松的原因之一。

簡(jiǎn)介：目的利用有限元法評(píng)價(jià)不同骨質(zhì)疏松條件下PLUSHPS的穩(wěn)定性及PLUSHPS的穩(wěn)定性是否可以通過骨水泥強(qiáng)化而提高，為臨床不同骨質(zhì)疏松程度的胸腰椎骨折患者在手術(shù)方式的選擇上提供相關(guān)的生物力學(xué)依據(jù)。方法運(yùn)用AMIRA三維可視化軟件讀取掃描好的層厚為1MM的L1節(jié)段的DICOM格式的CT數(shù)據(jù)，形成L1椎體的輪廓。再導(dǎo)入到SOLIDWKS軟件中，通過對(duì)L1椎體材料屬性的賦值，建立正常骨質(zhì)，輕、中度骨質(zhì)疏松及嚴(yán)重骨質(zhì)疏松L1椎體的有限元模型，模擬手術(shù)中PLUSHPS的擰入并對(duì)輕、中度骨質(zhì)疏松及嚴(yán)重骨質(zhì)疏松椎體上的PLUSHPS進(jìn)行骨水泥強(qiáng)化，對(duì)建立好的五種模型進(jìn)行拔出力測(cè)試，選取12個(gè)節(jié)點(diǎn)的拔出力，做統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，并對(duì)五種模型上的PLUSHPS進(jìn)行應(yīng)力分析。結(jié)果正常骨質(zhì)，輕、中度骨質(zhì)疏松，輕、中度骨質(zhì)疏松骨水泥強(qiáng)化，嚴(yán)重骨質(zhì)疏松，嚴(yán)重骨質(zhì)疏松骨水泥強(qiáng)化其最大軸向拔出力分別是1843±77N、1343±50N、1799±44N、844±41N、1206±43N，對(duì)其進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，正常骨質(zhì)與輕、中度骨質(zhì)疏松組之間具有顯著差異（P＜0000），正常骨質(zhì)組與嚴(yán)重骨質(zhì)疏松組之間具有顯著差異（P＜0000），輕、中度骨質(zhì)疏松組與輕、中度骨質(zhì)疏松骨水泥強(qiáng)化組之間具有顯著差異（P＜0000），嚴(yán)重骨質(zhì)疏松組與嚴(yán)重骨質(zhì)疏松骨水泥強(qiáng)化組之間具有顯著差異（P＜0000），正常骨質(zhì)組與輕、中度骨質(zhì)疏松骨水泥強(qiáng)化組之間沒有顯著差異（P＞005），正常骨質(zhì)組與嚴(yán)重骨質(zhì)疏松骨水泥強(qiáng)化組之間具有顯著差異（P＜0000）。結(jié)論不管在何種骨質(zhì)疏松條件下，PLUSHPS骨水泥強(qiáng)化后都可以顯著提高其固定效果。在輕、中度骨質(zhì)疏松條件下，PLUSHPS骨水泥強(qiáng)化后其拔出力與正常骨質(zhì)時(shí)拔出力無顯著差異，而嚴(yán)重骨質(zhì)疏松條件下，PLUSHPS骨水泥強(qiáng)化后其拔出力與正常骨質(zhì)時(shí)拔出力具有顯著的差異，即在輕、中度骨質(zhì)疏松條件下，骨水泥強(qiáng)化可以達(dá)到正常骨質(zhì)時(shí)PLUSHPS的固定強(qiáng)度，而嚴(yán)重骨質(zhì)疏松條件下，即使我們使用骨水泥強(qiáng)化也不能達(dá)到正常骨質(zhì)時(shí)PLUSHPS的固定強(qiáng)度。PLUSHPS在其拔出的過程中，應(yīng)力集中在椎弓根的尾部，這與臨床上椎弓根螺釘在尾部最易斷裂相一致。

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多髂骨移植術(shù)供骨區(qū)并發(fā)癥的相關(guān)因素研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：目的非特異性腰痛（NLBP）占到腰痛人群的85％左右。相比疾病來說，NLBP更接近于是一組癥狀的合稱，而癥狀的起因可能各不相同。腰椎節(jié)段性不穩(wěn)（LSI）被認(rèn)為是NLBP的一個(gè)重要亞組。作為脊柱最重要的穩(wěn)定系統(tǒng)，軀干肌群與腰椎穩(wěn)定性必然存在緊密聯(lián)系。本文的研究目的在于比較不同腰椎節(jié)段穩(wěn)定性在軀干肌群形態(tài)、張力、力量以及協(xié)調(diào)活動(dòng)模式等方面的差異并觀察相關(guān)因素對(duì)這種差異是否存在影響。方法通過相關(guān)測(cè)試采集18～40歲男性不同腰椎穩(wěn)定性NLBP亞組（LSI組10人，NONLSI組9人）以及正常對(duì)照（對(duì)照組，10人）組椎旁肌的形態(tài)、張力等數(shù)據(jù)以及脊柱各個(gè)肌群的最大力量和在等長(zhǎng)、等張測(cè)試中記錄的軀干肌群表面肌電信號(hào)，此外還分別記錄脊柱肌群的力量和脊柱運(yùn)動(dòng)角度。通過多元方差分析（MANOVA）比較組別以及各種因素對(duì)椎旁肌形態(tài)、張力，軀干肌群等長(zhǎng)協(xié)調(diào)活動(dòng)模式以及等長(zhǎng)協(xié)調(diào)活動(dòng)模式的影響。結(jié)果本研究中組別因素與其他所有因素均無交互作用。多裂肌的大小和物理特性在各組別間均不具有顯著性差異。脊柱肌群屈伸和回旋的最大力量，均表現(xiàn)出隨著位置引起主動(dòng)肌初長(zhǎng)度的增大，力量增大；組別間差異表現(xiàn)出兩個(gè)NLBP組比對(duì)照組屈肌力量更高，伸肌力量更小的趨勢(shì)，進(jìn)而出現(xiàn)LSI組屈伸力矩比大于對(duì)照組統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P結(jié)論本研究中腰痛以及腰椎穩(wěn)定性因素并未對(duì)軀干肌群的形態(tài)和物理學(xué)特性產(chǎn)生影響，提示軀干肌群的基本特性與NLBP和LSI之間并無直接關(guān)聯(lián)。腰痛和腰椎不穩(wěn)對(duì)于軀干肌群機(jī)能特性的影響主要表現(xiàn)為NLBP患者腹肌和背肌的力量不均衡，背肌相對(duì)薄弱；LSI的NLBP患者總是表現(xiàn)出拮抗肌更高的激活水平或更多地與主動(dòng)肌的同步收縮，表明腰椎節(jié)段穩(wěn)定性的改變會(huì)引起肌群工作模式的改變。與基礎(chǔ)特性相比，機(jī)能特性的改變與NLBP的發(fā)生關(guān)系更為密切。LSI組與NONLSI組在軀干肌群機(jī)能特性方面表現(xiàn)出較多差異，充分說明NLBP不是一個(gè)同質(zhì)性群體，在研究中對(duì)其進(jìn)行亞組劃分是可行的，并且是必要的。

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多股骨隧道角度對(duì)前交叉韌帶重建術(shù)后骨隧道影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：研究目的探討TGFΒ1誘導(dǎo)骨骼肌肌源性干細(xì)胞ＭＤＳＣ合成細(xì)胞外基質(zhì)的機(jī)制。方法采用差速貼壁法分離出大鼠骨骼肌肌源性干細(xì)胞，培養(yǎng)基中加入TGFΒ1。將體外培養(yǎng)的細(xì)胞分為三組，A對(duì)照組；B10NGMLTGFΒ1；C10NGMLTGFΒ110NGML抗CTGF中和抗體。在相差顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，利用免疫組織化學(xué)方法，RTPCR，WESTBLOT檢測(cè)細(xì)胞表達(dá)CTGF、COLⅠ、COLIII的變化情況。結(jié)果在體外TGFΒ1能誘導(dǎo)MDSC高表達(dá)CTGF，促進(jìn)細(xì)胞合成和分泌COLⅠ和COLIII，CTGF抗體能降低細(xì)胞表達(dá)和合成COLⅠ和COLIII，部分逆轉(zhuǎn)TGFΒ1對(duì)MDSC合成ECM的作用。結(jié)論TGFΒ1能在體外誘導(dǎo)MDSC合成和分泌細(xì)胞外基質(zhì)，促進(jìn)組織纖維化；TGFΒ1CTGF信號(hào)傳導(dǎo)通路是介導(dǎo)TGFΒ1促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)的合成分泌的機(jī)制之一。

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多骨水泥治療骨質(zhì)疏松性椎體壓縮骨折新進(jìn)展.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：分類號(hào)R782密級(jí)98‘587單位代碼10422學(xué)號(hào)200320701JL莨，．乏博士學(xué)位論文SHANDONGUNIVERSITYDOCTOR7STHESIS論文題目ADBMP2基因轉(zhuǎn)染肌衛(wèi)星細(xì)胞成骨誘導(dǎo)及骨缺損修復(fù)實(shí)驗(yàn)研究學(xué)號(hào)博士生導(dǎo)師專業(yè)200320701張風(fēng)河魏奉才教授整形外科學(xué)2006年4月10日山東大學(xué)博士學(xué)位論文ADBMP2基因轉(zhuǎn)染肌衛(wèi)星細(xì)胞成骨誘導(dǎo)及骨缺損修復(fù)實(shí)驗(yàn)研究博士研究生張風(fēng)河專導(dǎo)業(yè)師整形外科學(xué)魏奉才教授中文摘要目的1．探討GFP轉(zhuǎn)基因鼠咀嚼肌肌衛(wèi)星細(xì)胞的分離，鑒定及體外培養(yǎng)方法，研究其生物學(xué)特性及體外細(xì)胞培養(yǎng)傳代對(duì)咀嚼肌衛(wèi)星細(xì)胞GFP熒光保持的影響，從而探討GFP轉(zhuǎn)基因鼠咀嚼肌衛(wèi)星細(xì)胞移植入野生型小鼠后是否可以作為追蹤細(xì)胞轉(zhuǎn)歸的有效方法。2．研究腺病毒介導(dǎo)的BMP．2基因轉(zhuǎn)染GFP轉(zhuǎn)基因鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞SMSCS后經(jīng)體外誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化為成骨樣細(xì)胞的能力，探討骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞作為骨組織工程種子細(xì)胞的可能性。3．觀察腺病毒介導(dǎo)的BMP一2基因轉(zhuǎn)染GFP轉(zhuǎn)基因鼠肌衛(wèi)星細(xì)胞后體內(nèi)骨誘導(dǎo)能力及骨缺損修復(fù)能力。方法1取10只新生三日齡綠色熒光蛋白GFP轉(zhuǎn)基因小鼠面部咀嚼肌，采用酶消

簡(jiǎn)介：哮喘ASTHMA作為一種慢性呼吸道疾病，正日益成為嚴(yán)重威脅人類健康的重大問題。令人遺憾的是，科學(xué)界對(duì)哮喘病的病因和發(fā)展過程至今還沒有完全認(rèn)識(shí)清楚，其病理機(jī)制也一直是醫(yī)學(xué)上的重要難題。氣道是氣體進(jìn)出肺的通道。有哮喘的人呼吸道發(fā)炎，這使得呼吸道變腫脹也非常敏感。他們往往對(duì)某些吸入物質(zhì)反應(yīng)強(qiáng)烈。當(dāng)氣道反應(yīng)，周圍的肌肉收緊時(shí)，氣道縮小，造成流入肺部的氣體不足。甚至腫脹也可以惡化，使氣道更窄。氣道平滑肌的增生則是哮喘的主要發(fā)病癥狀之一，有報(bào)道證明在哮喘個(gè)體的肌細(xì)胞的增生速度遠(yuǎn)高于非哮喘個(gè)體。雖然皮質(zhì)類固醇通過減少細(xì)胞周期蛋白D1的表達(dá)以及視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤蛋白磷酸化，能抑制正常氣道中肌細(xì)胞的增生，但是在哮喘個(gè)體中卻沒有效果。盡管做了如此多的研究，但是關(guān)于氣道平滑肌增生還有很多問題額待解決。氣道上皮組織在呼吸道系統(tǒng)的防御中起著至關(guān)重要的作用，氣道上皮組織通過其攔截系統(tǒng)阻止組織外源有害刺激對(duì)氣道上皮的損害，從而保護(hù)呼吸道，上皮脫落，特別是在痰中有成團(tuán)的上皮細(xì)胞以及支氣管中的上皮脫落是上皮受損的明顯現(xiàn)象，在接下來的上皮修復(fù)過程中，氣道上皮會(huì)分泌促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)、遷移的信號(hào)因子，這些因子中很多都能刺激起氣道平滑肌的增生。氣道中無論是氣道平滑肌還是氣道上皮在哮喘發(fā)生時(shí)都有顯著的病理特征，但是兩者之間存在怎樣的信號(hào)交流，目前還沒有完整的理論和解釋。目前研究人員做了大量關(guān)于氣道平滑肌的研究，但是關(guān)于氣道上皮組織對(duì)氣道平滑肌增生的影響尚未有報(bào)道。本課題組在體外用多聚左旋精氨酸POLYL，ARGININE，PLA構(gòu)建上皮細(xì)胞AEC損傷模型，并與正常平滑肌細(xì)胞ASMC共培養(yǎng)我們?cè)谙l(fā)病過程中，嗜酸性粒細(xì)胞是主要的效應(yīng)細(xì)胞，嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白ECP是其主要效應(yīng)成分。PLA作為ECP的類似物，可以在體外模擬細(xì)胞受損傷的狀態(tài)。而為了更真實(shí)地模擬哮喘發(fā)生時(shí)氣道上皮組織的狀況，本課題還在共培養(yǎng)過程中對(duì)AEC施加外部壓力。最后檢測(cè)共培養(yǎng)系統(tǒng)中ASMC增殖情況，以此對(duì)氣道上皮組織對(duì)氣道平滑肌增生的影響作一個(gè)初步探索①為了構(gòu)建體外模型本課題在體外收集并培養(yǎng)AEC和ASMC，并用形態(tài)學(xué)和免疫熒光學(xué)方法對(duì)收集到的細(xì)胞進(jìn)行鑒定。鑒定結(jié)果表明，用組織塊貼壁法獲得了大量的原代ASMC，用胰蛋白酶冷消化法獲得了大量的AEC。②PLA對(duì)大鼠氣道上皮細(xì)胞活性影響研究設(shè)置不同050ΜM每5ΜM濃度差為一個(gè)間隔梯度共10個(gè)濃度梯度的PLA對(duì)AEC進(jìn)行處理，處理時(shí)間為24H。然后用臺(tái)盼藍(lán)進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。最后結(jié)果顯示，與對(duì)照組比較，即使小濃度的PLA5ΜM也對(duì)氣道上皮細(xì)胞有明顯的毒性作用P20ΜM時(shí)各組分之間的P001。③AEC損傷模型構(gòu)建對(duì)AEC進(jìn)行高濃度50ΜMPLA短時(shí)間處理10分鐘，構(gòu)建氣道上皮細(xì)胞損傷模型。④共培養(yǎng)裝置的設(shè)計(jì)為了在共培養(yǎng)時(shí)能對(duì)氣道上皮細(xì)胞進(jìn)行單獨(dú)施壓，我們改進(jìn)了共培養(yǎng)的壓力提供裝置。最后，我們?cè)谠O(shè)計(jì)的裝置能提供我們需要的穩(wěn)定壓力14KPA。⑤本實(shí)驗(yàn)設(shè)置5個(gè)實(shí)驗(yàn)組ASMC單獨(dú)培養(yǎng)為對(duì)照組A、ASMC與AEC共培養(yǎng)B、ASMC與受損傷的AEC共培養(yǎng)C、ASMC與未受損傷的AEC共培養(yǎng)并施加外部壓力D、ASMC與受損傷的AEC共培養(yǎng)并施加外部壓力E⑥共培養(yǎng)條件下ASMC增值檢測(cè)每12H用MTT測(cè)量一次ASMC的生長(zhǎng)OD值，共取5個(gè)時(shí)間點(diǎn)，既12H、24H、36H、48H、60H分別測(cè)量一次每組細(xì)胞的OD值，用軟件進(jìn)行相關(guān)的分析結(jié)果顯示60H時(shí)，BCDE組與A組以及BCDE組之間P均我們最后得出結(jié)論，在體外研究中，氣道上皮在損傷和接受外部刺激后，加劇了氣道平滑肌的增生。

簡(jiǎn)介：分類號(hào)VDC密級(jí)編號(hào)中南大學(xué)CENTRALSOUTHUNIVERSITY同等學(xué)歷碩士學(xué)位論文論文題目嬰兒室間隔缺損合并肺動(dòng)脈高壓學(xué)科專業(yè)研究生導(dǎo)師姓名及其專業(yè)技術(shù)職稱心房肌I、Ⅲ型膠原蛋白的表達(dá)改變外科學(xué)胸心外科陽廣賢楊一峰教授中南大學(xué)二。一一年五月原創(chuàng)性聲明本人聲明，所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)7IFJJSH導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了論文中特另TLDN以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得中南大學(xué)或其他單位的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我共同工作的同志對(duì)本研究所作的貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明。金作者簽名塑墼眺型年土月竺日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人了解中南大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文并根據(jù)國(guó)家或湖南省有關(guān)部門規(guī)定送交學(xué)位論文，允許學(xué)位論文被查閱和借閱；學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容，可以采用復(fù)印、縮印或其它手段保存學(xué)位論文。同時(shí)授權(quán)中國(guó)科學(xué)技術(shù)信息研究所將本學(xué)位論文收錄到中國(guó)學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)，并通過網(wǎng)絡(luò)向社會(huì)公眾提供信息服務(wù)。作者簽名翩簽翹嗍址年L月2日

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多ICOS-ICOSL和PD-1-PD-L1共刺激分子在骨性關(guān)節(jié)炎滑膜損傷中變化情況的研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：目的探討枕肌下小切口減壓術(shù)治療CHIARI畸形Ⅰ型的療效。資料和方法一般資料2009年1月2010年10月山東大學(xué)齊魯醫(yī)院神經(jīng)外科收治17例CHIARI畸形Ⅰ型患者其中男性7例412％女性10例588％年齡14～67歲平均40歲。肢體麻木無力為主要癥狀者16例94％痛溫覺為主的感覺減退者10例588％共濟(jì)失調(diào)者4例235％吞咽困難、飲水嗆咳等后組顱神經(jīng)癥狀者2例118％無癥狀者14歲男性1例59％。MRI示單純小腦扁桃體下疝者4例合并脊髓空洞者13例伴顱底凹陷者5例寰枕融合者1例對(duì)其中16例CHIARI畸形Ⅰ型其中合并脊髓空洞癥患者行枕肌下小切口減壓術(shù)后回顧性分析。手術(shù)過程手術(shù)方式如下全麻成功后患者取俯臥位頭架固定標(biāo)記后正中枕外粗隆至C2棘突長(zhǎng)約3CM直切口。顯露枕骨鱗部及寰、樞椎。磨除枕骨大孔后緣約22CM骨質(zhì)磨除寰椎后弓以及樞椎的上12棘突及椎板約25CM。根據(jù)寰枕韌帶的緊縮程度決定是否行寰枕韌帶松解以緩解對(duì)硬腦膜的束縛。術(shù)中不切開硬膜可較大程度的避免顱內(nèi)感染的發(fā)生。其中1例67歲老年女性因肺部感染手術(shù)耐受力差未行手術(shù)治療1例27歲合并顱底凹陷的女性先行一期經(jīng)口齒狀突磨除術(shù)二期行枕肌下小切口減壓術(shù)。結(jié)果行枕肌下小切口減壓術(shù)治療的16例患者術(shù)后臨床癥狀均有明顯改善脊髓空洞也有不同程度縮小甚至消失。結(jié)論枕肌下小切口減壓術(shù)能使頸延髓充分減壓恢復(fù)腦脊液循環(huán)有效緩解臨床癥狀對(duì)脊髓空洞也有較好的療效是治療CHIARI畸形Ⅰ型比較簡(jiǎn)單有效的方法。

簡(jiǎn)介：目的本試驗(yàn)應(yīng)用阿托伐他汀來干預(yù)肺纖維化模型大鼠的肺成纖維細(xì)胞以及由轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子Β1TGFΒ1誘導(dǎo)的大鼠肺成纖維細(xì)胞向肌成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化過程，觀察該藥對(duì)細(xì)胞增殖的影響，以及對(duì)肌成纖維細(xì)胞的標(biāo)志Α平滑肌肌動(dòng)蛋白ΑSMA表達(dá)的影響，并應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量RTPCR技術(shù)測(cè)定藥物對(duì)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)蛋白SMAD3MRNA含量的影響，從而了解阿托伐他汀抗大鼠肺纖維化作用，并進(jìn)一步探究其作用機(jī)制。方法選用雌性WISTAR大鼠體重150170G分為兩組，每組兩只，試驗(yàn)組大鼠給予一次性氣管內(nèi)注入博萊霉素溶液5MGKG體重建立肺纖維化模型，對(duì)照組大鼠給予等量生理鹽水。手術(shù)后在原條件下繼續(xù)飼養(yǎng)一周后無菌條件下取鼠肺，應(yīng)用消化法于DMEM培養(yǎng)基中進(jìn)行成纖維細(xì)胞的分離培養(yǎng)，自然法純化，傳代至第四代始，以成纖維細(xì)胞內(nèi)波形蛋白為目標(biāo)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行免疫細(xì)胞化學(xué)染色，同時(shí)應(yīng)用形態(tài)學(xué)方法來鑒定細(xì)胞。選取0、01、1、5、10ΜM五個(gè)濃度劑量的阿托伐他汀分別對(duì)試驗(yàn)組細(xì)胞進(jìn)行干預(yù)，應(yīng)用MTT法連續(xù)七天測(cè)定細(xì)胞增殖情況，繪制生長(zhǎng)曲線；對(duì)照組、試驗(yàn)組細(xì)胞又分別分出無干預(yù)因素組、TGFΒ1單獨(dú)干預(yù)組、TGFΒ1聯(lián)合不同濃度藥物干預(yù)組，仍然應(yīng)用MTT法觀察藥物對(duì)細(xì)胞增殖的抑制情況；SP法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行免疫細(xì)胞化學(xué)染色，觀察藥物對(duì)肌成纖維細(xì)胞標(biāo)志物ΑSMA表達(dá)的影響；熒光定量RTPCR技術(shù)測(cè)定藥物對(duì)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)蛋白SMAD3MRNA含量的影響。結(jié)果1大鼠肺成纖維細(xì)胞的原代培養(yǎng)及純化經(jīng)純化傳代后，成纖維細(xì)胞形態(tài)單一，胞體較大，均大致呈梭形，均有細(xì)長(zhǎng)纖維絲。胞漿清晰。與博萊霉素試驗(yàn)組細(xì)胞相比，生理鹽水對(duì)照組細(xì)胞胞體略小，開始時(shí)生長(zhǎng)較緩慢，隨著代數(shù)增高生長(zhǎng)逐漸變快。而博萊霉素組細(xì)胞胞體較大，形狀也不如鹽水組細(xì)胞規(guī)則，有一些胞突，核漿比例高，生長(zhǎng)速度明顯快于對(duì)照組。2成纖維細(xì)胞的鑒定形態(tài)學(xué)鑒定所培養(yǎng)細(xì)胞在光鏡下呈典型的梭形，胞體狹長(zhǎng)、透亮，胞漿豐富，胞膜清晰。經(jīng)波形蛋白免疫細(xì)胞化學(xué)染色SP法鑒定，陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)，實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組成纖維細(xì)胞均可達(dá)95％以上。3阿托伐他汀對(duì)纖維化大鼠肺成纖維細(xì)胞增殖的影響應(yīng)用重復(fù)測(cè)量設(shè)計(jì)資料方差分析可知，各劑量組中不同干預(yù)天數(shù)所測(cè)得的OD值之間存在顯著差異P＜001。各時(shí)間點(diǎn)所測(cè)0D值與不同用藥物劑量之間存在交互作用P＜001。各劑量組對(duì)細(xì)胞的抑制作用之間存在顯著差別P＜001。4阿托伐他汀對(duì)TGFB1誘導(dǎo)的肌成纖維細(xì)胞增殖的影響無論是博萊霉素實(shí)驗(yàn)組還是生理鹽水對(duì)照組的藥物因素對(duì)肺成纖維細(xì)胞增殖均有影響P＜001，事后兩兩比較顯示兩組細(xì)胞中除無干預(yù)因素組與1ΜM藥物組、FGFΒ1單獨(dú)誘導(dǎo)組與01ΜM藥物組OD值之間無差異P＞005之外，其余各組兩兩互比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜001。區(qū)組因素對(duì)細(xì)胞OD值有影響，實(shí)驗(yàn)組OD值較對(duì)照組要高P＜001。5阿托伐他汀對(duì)TGFΒ1誘導(dǎo)的大鼠肺肌成纖維細(xì)胞標(biāo)志性產(chǎn)物ΑSMA表達(dá)的影響免疫細(xì)胞化學(xué)染色結(jié)果顯示無論對(duì)于實(shí)驗(yàn)組還是對(duì)照組，藥物因素對(duì)ΑSMA的表達(dá)量灰度值都有影響P＜001。各劑量組之間ΑSMA的表達(dá)量差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜001。區(qū)組因素對(duì)ΑSMA的表達(dá)量有影響，實(shí)驗(yàn)組ΑSMA的表達(dá)量較對(duì)照組要高P＜001。6阿托伐他汀對(duì)TGFΒ1誘導(dǎo)的大鼠肺肌成纖維細(xì)胞內(nèi)信號(hào)蛋白SMAD3MRNA表達(dá)量的影響實(shí)時(shí)熒光定量RTPCR結(jié)果顯示無論是博萊霉素實(shí)驗(yàn)組還是生理鹽水對(duì)照組的藥物因素對(duì)SMAD3MRNA表達(dá)量均有影響P＜001，事后兩兩比較顯示無干預(yù)因素組與5ΜM藥物組、01ΜM與TGFΒ1單獨(dú)組、1ΜM與01ΜM藥物組SMAD3MRNA表達(dá)量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＞005。實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組細(xì)胞SMAD3MRNA表達(dá)量相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＞005。結(jié)論1肺纖維化大鼠肺組織內(nèi)成纖維細(xì)胞與正常肺組織內(nèi)成纖維細(xì)胞相比具有表型輕度分化和增殖速度快的特點(diǎn)。2阿托伐他汀能夠抑制肺纖維化大鼠肺成纖維細(xì)胞的增殖。3該藥同時(shí)能夠抑制TGFΒ1誘導(dǎo)的肌成纖維細(xì)胞的分化，這主要表現(xiàn)在抑制細(xì)胞生長(zhǎng)增殖、改變細(xì)胞形態(tài)、減少肌成纖維細(xì)胞的標(biāo)志性產(chǎn)物ΑSMA的產(chǎn)生上。4阿托伐他汀可通過抑制細(xì)胞內(nèi)信號(hào)蛋白SMAD3MRNA的表達(dá)來影響’TGFΒ1誘導(dǎo)的成纖維細(xì)胞向肌成纖維細(xì)胞的分化。

簡(jiǎn)介：目的探討短期凍存對(duì)兔BMSCS的增殖、生物特征及成骨能力的影響，為進(jìn)一步研究作基礎(chǔ)。方法第5代兔BMSCS凍存，30D后復(fù)蘇、體外培養(yǎng)至第10代，設(shè)相同代數(shù)未凍存的BMSCS為對(duì)照組。MTT、細(xì)胞周期、細(xì)胞表面標(biāo)志及成骨誘導(dǎo)分化后ALP含量、Ⅰ型膠原及鈣結(jié)節(jié)染色作為其增殖、生物特征及成骨能力的評(píng)價(jià)指標(biāo)。結(jié)果凍存后BMSCS存活率為（8438±378）％，生長(zhǎng)潛伏期延長(zhǎng)，傳代后逐漸恢復(fù)增殖指數(shù)和G1期細(xì)胞所占比例分別為（429±34）％、（570±34）％，細(xì)胞表面標(biāo)志CD44陽性率為9362±105％，不表達(dá)CD45成骨誘導(dǎo)第7、14DALP含量UGPROT分別為673±192、1599±436，第14、21天，Ⅰ型膠原、鈣結(jié)節(jié)茜素紅染色陽性以上結(jié)果與未凍存組相比差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＞005。結(jié)論短期凍存對(duì)兔BMSCS增殖、生物特征及成骨分化潛能無明顯影響，凍存后可繼續(xù)進(jìn)一步研究。

簡(jiǎn)介：學(xué)校代碼10610學(xué)號(hào)S032827四川大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)碩士專業(yè)學(xué)位論文指導(dǎo)教師姓名＼職稱劍福攔熬攫二OO六年五月四川大學(xué)華西口腔醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文縮略詞CTMRIMIMICS3DPMMAMMA縮略詞表英文全稱COMPUTEDTOMOGRAPHYMAGNETICRESONANCEIMAGINGMATERIALISE’SINTERACTIVEMEDICALIMAGECONTROLSYSTEMTHETHREEDIMENSIONALPOLYMETHYLMETHACRYLATEMETHYLMETHACRYLATE中文名稱計(jì)算機(jī)斷層掃描核磁共振成像MATERIALISE的交互式醫(yī)學(xué)影像控制系統(tǒng)三維聚甲基丙烯酸甲酯甲基丙烯酸甲酯4