簡(jiǎn)介：目的研究慢性氟中毒大鼠成骨細(xì)胞中NOTCH經(jīng)典通路重要因子（NOTCH1、JAGGED1和HES1）及TWIST蛋白和MRNA表達(dá)變化，探討該信號(hào)通路在氟骨癥發(fā)生中的作用機(jī)制及與TWIST的可能關(guān)系。方法36只SD大鼠隨機(jī)分為3組，每組12只，組內(nèi)雌雄各半。對(duì)照組飲用自來(lái)水（含氟F﹣＜05MG／L），低氟組、高氟組分別飲用加氟5MGL、50MGL的自來(lái)水。實(shí)驗(yàn)8個(gè)月后股動(dòng)脈放血處死，采用氟離子選擇電極法檢測(cè)大鼠尿氟、骨氟含量。取大鼠股骨下段，HE切片觀察骨組織病理學(xué)變化，并測(cè)定骨皮質(zhì)厚度、骨小梁寬度等骨形態(tài)學(xué)指標(biāo)。采用免疫組織化學(xué)方法測(cè)定骨組織NOTCH1、JAGGED1、HES1及TWIST蛋白表達(dá)水平，原位雜交技術(shù)測(cè)定NOTCH1、JAGGED1、HES1及TWIST的MRNA表達(dá)水平。結(jié)果（1）實(shí)驗(yàn)組大鼠出現(xiàn)不同程度氟斑牙，且高氟組重于低氟組；染氟組大鼠尿氟、骨氟含量均明顯高于對(duì)照組，各組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜005，慢性氟中毒大鼠模型復(fù)制成功。2氟中毒組大鼠股骨出現(xiàn)骨皮質(zhì)增厚，骨小梁寬度增加，骨密度增加等骨質(zhì)硬化表現(xiàn)，與對(duì)照組比較，各檢測(cè)指標(biāo)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜005，且隨染氟濃度增加病變加重。（3）與對(duì)照組相比，染氟組大鼠成骨細(xì)胞中NOTCH1、JAGGED1、HES1和TWIST蛋白及MRNA表達(dá)均降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜005；兩染氟組間比較，TWIST蛋白及MRNA表達(dá)差異不明顯。（4）相關(guān)性分析顯示NOTCH1、JAGGED1及HES1蛋白表達(dá)水平兩兩呈正相關(guān)。結(jié)論過(guò)量氟可下調(diào)NOTCH通路重要因子（NOTCH1、JAGGED1和HES1）及TWIST在成骨細(xì)胞中的表達(dá)，四者的低表達(dá)均對(duì)高氟環(huán)境下成骨細(xì)胞分化及骨形成的抑制作用降低。提示慢性氟中毒大鼠骨質(zhì)硬化病變發(fā)生機(jī)制中NOTCH經(jīng)典通路起著重要作用并可能與TWIST有著協(xié)同關(guān)系。

簡(jiǎn)介：分類號(hào)R783密級(jí)公開(kāi)單位代碼10422學(xué)號(hào)201113932筘辦享碩。士學(xué)位論文SHANDONGUNIVERSITYMASTER’STHESIS論文題目CNTF在咬合創(chuàng)傷致大鼠咬肌損傷中的保護(hù)作用研究STUDYABOUTTHEPROTECTIVEEFFECTSOFCNTFONRATMASSETERINJURYINDUCEDBYOCCLUSALTRAUMA合作導(dǎo)師2014年04月30日厶⑧山東大學(xué)碩士學(xué)位論文目錄中文摘要1英文摘要3符號(hào)說(shuō)明6前言7第一部分CNTF、CNTFROT、結(jié)蛋白在咬合創(chuàng)傷大鼠咬肌中的表達(dá)變化材料與方法12結(jié)果19討論30第一部分外源性CNTF對(duì)咬合創(chuàng)傷損傷咬肌的修復(fù)作用材料與方法32結(jié)果33討侖40總結(jié)42附圖43參考文獻(xiàn)55致謝60攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文61

簡(jiǎn)介：目的比較分析應(yīng)用腓骨長(zhǎng)肌腱復(fù)合骨形態(tài)發(fā)生蛋白和脫蛋白松質(zhì)骨與單純腓骨長(zhǎng)肌腱重建前交叉韌帶術(shù)后的臨床療效通過(guò)臨床觀察和影像學(xué)證實(shí)該重建方法的可行性為術(shù)后膝關(guān)節(jié)功能恢復(fù)及早期康復(fù)訓(xùn)練提供依據(jù)。方法將2007年10月～2008年12月符合納入標(biāo)準(zhǔn)及排除標(biāo)準(zhǔn)的患者嚴(yán)格按隨機(jī)數(shù)字表隨機(jī)分為治療組和對(duì)照組。治療組患者采用腓骨長(zhǎng)肌腱復(fù)合骨形態(tài)發(fā)生蛋白和脫蛋白松質(zhì)骨重建前交叉韌帶對(duì)照組患者采用單純腓骨長(zhǎng)肌腱重建前交叉韌帶。分別在術(shù)前術(shù)后12個(gè)月時(shí)由另兩位醫(yī)師檢查并記錄每位患者的LACHMAN試驗(yàn)和軸移試驗(yàn)結(jié)果同時(shí)填寫LYSHOLM評(píng)分表。觀察并記錄患者住院與發(fā)熱天數(shù)手術(shù)時(shí)間術(shù)后24小時(shí)引流量髕骨上極10CM大腿周徑并在術(shù)后1周、3個(gè)月、12個(gè)月行患側(cè)膝關(guān)節(jié)CT掃描測(cè)量脛骨、股骨隧道的直徑。使用SPSS130軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。計(jì)量資料采用X±S表示先進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)和方差齊性檢驗(yàn)滿足要求者采用兩獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)若不符合正態(tài)分布采用MANNWHITNEYU檢驗(yàn)。LACHMAN試驗(yàn)和軸移試驗(yàn)等級(jí)資料結(jié)果采用MANNWHITNEYU檢驗(yàn)。結(jié)果納入研究的病例共37例治療組N18和對(duì)照組N19。兩組患者的性別、年齡、受傷至手術(shù)時(shí)間無(wú)顯著性差異P005。兩組患者間的住院天數(shù)P0891、發(fā)熱天數(shù)P0807、手術(shù)時(shí)間P0227、關(guān)節(jié)引流量P045和髕骨上極10CM大腿周徑P0052差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。術(shù)前LACHMAN試驗(yàn)結(jié)果P0419軸移試驗(yàn)結(jié)果P066LYSHOLM評(píng)分結(jié)果P072差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。術(shù)后12個(gè)月時(shí)兩組患者的各項(xiàng)檢查指標(biāo)和評(píng)分與術(shù)前相比均有好轉(zhuǎn)但兩組間的LACHMAN試驗(yàn)結(jié)果P0029軸移試驗(yàn)結(jié)果P0023LYSHOLM評(píng)分結(jié)果P0029差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。兩組患者術(shù)后1周時(shí)股骨隧道P0823、脛骨隧道P0731差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義兩組患者術(shù)后3個(gè)月時(shí)股骨隧道P0000、脛骨隧道P0000差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義兩組患者術(shù)后12個(gè)月時(shí)股骨隧道P0001、脛骨隧道P0000差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；治療組無(wú)1例出現(xiàn)骨隧道擴(kuò)大對(duì)照組有6例6膝出現(xiàn)了骨隧道擴(kuò)大其中1例是股骨隧道擴(kuò)大3例是脛骨隧道擴(kuò)大2例是股骨及脛骨隧道同時(shí)擴(kuò)大。結(jié)論腓骨長(zhǎng)肌腱復(fù)合骨形態(tài)發(fā)生蛋白和脫蛋白松質(zhì)骨重建前交叉韌帶的臨床效果優(yōu)于單純腓骨長(zhǎng)肌腱重建法并且能明顯減少股骨及脛骨骨隧道擴(kuò)大的發(fā)生。

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多負(fù)壓封閉引流與氧療聯(lián)合應(yīng)用治療創(chuàng)傷性骨外露的臨床觀察.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：背景多發(fā)性肌炎POLYMYOSITIS，PM是特發(fā)性炎癥性肌病IDIOPATHICINFLAMMATYMYOPATHY，IIMS最常見(jiàn)的亞型之一，臨床以進(jìn)行性骨骼肌無(wú)力、活動(dòng)期血清肌酸激酶CREATINEKINASE，CK增高和肌源性損害的電生理改變?yōu)樘攸c(diǎn)。其病理基礎(chǔ)在于細(xì)胞免疫介導(dǎo)的CD8T淋巴細(xì)胞識(shí)別攻擊MHCⅠMAJHISTOCOMPATIBILITYCOMPLEXⅠ表達(dá)陽(yáng)性的肌纖維引起肌纖維變性壞死，導(dǎo)致骨骼肌無(wú)力的發(fā)生。糖皮質(zhì)激素GLUCOCTICOID，GC因具有抗炎及免疫抑制作用，是目前PM的首選治療藥物?；A(chǔ)研究表明，GC與骨骼肌胞漿糖皮質(zhì)激素受體GLUCOCTICOIDRECEPT，GR相結(jié)合，通過(guò)轉(zhuǎn)錄激活糖皮質(zhì)激素反應(yīng)元件GLUCOCTICOIDRESPONSEELEMENT，GRE，促進(jìn)肌肉特異性肌萎縮相關(guān)泛素連接酶蛋白MUSCLESPECIFICRINGINGERPROTEIN1MURF1及MUSCLEATROPHYFBOXMAFBX的表達(dá)，靶向誘導(dǎo)各種骨骼肌蛋白的降解，導(dǎo)致骨骼肌萎縮和無(wú)力。既往研究發(fā)現(xiàn)，GC用于治療慢性阻塞性肺?。–HRONICOBSTRUCTIVEPULMONARYDISEASE，COPD）過(guò)程中患者可出現(xiàn)骨骼肌無(wú)力，骨骼肌活檢有Ⅱ型纖維萎縮，考慮肌無(wú)力與GC誘導(dǎo)的骨骼肌萎縮有關(guān)。PM患者應(yīng)用GC治療過(guò)程中，臨床肌無(wú)力、血清CK和肌肉病理變化之間的關(guān)系，以及如何判斷激素應(yīng)用過(guò)程中是否出現(xiàn)了GC導(dǎo)致的骨骼肌萎縮是臨床面臨的一個(gè)尚未解決的重要課題。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察PM患者GC應(yīng)用后骨骼肌病理變化，總結(jié)GC導(dǎo)致骨骼肌萎縮患者的臨床及病理特點(diǎn)，同時(shí)檢測(cè)骨骼肌GR及MURF1及MAFBX表達(dá)情況，探討PM患者中GC導(dǎo)致骨骼肌萎縮的可能機(jī)制，以其指導(dǎo)臨床。第一部分糖皮質(zhì)激素應(yīng)用對(duì)多發(fā)性肌炎患者臨床和病理的影響目的觀察GC應(yīng)用中PM患者的臨床肌無(wú)力癥狀、CK水平變化以及病理改變之間的關(guān)系，探討PM患者GC治療過(guò)程中GC相關(guān)肌萎縮的出現(xiàn)頻率和判斷標(biāo)準(zhǔn)。方法回顧性分析我院神經(jīng)肌肉病中心接受肌肉活檢前已經(jīng)應(yīng)用GC治療的PM患者24例，總結(jié)患者GC治療后肌無(wú)力癥狀和血清CK水平的變化以及肌活檢病理特點(diǎn)，所有肌肉標(biāo)本均行蘇木素伊紅（HEMATOXYLINEOSIN，HE）染色、改良GOMI三色（MODIFIEDGOMITRICHROMEMGT）染色、還原型輔酶NICOTINAEADENINEDINUCLEOTIDEHYDROGEN，NADH染色、三磷酸腺苷酶ADENOSIRIPHOSPHATASE，ATPASE染色和油紅“O”O(jiān)ILREDO，O染色。將特征性的臨床和病理改變分類匯總。結(jié)果GC應(yīng)用后骨骼肌無(wú)力緩慢改善者占142458％，癥狀無(wú)變化者占本組患者62425％。GC應(yīng)用后至肌活檢前血清CK明顯下降2124875％。臨床癥狀加重的4例患者，1例經(jīng)進(jìn)一步電鏡檢查確診為包涵體肌炎，其余3例雙下肢無(wú)力為主。24例患者肌肉活檢病理檢查示炎細(xì)胞浸潤(rùn)122450％，兩型纖維大小不等2024833％脂滴增多142458％ATPASE染色示選擇性Ⅱ型纖維萎縮324例125％。3例患者接受類固醇治療后CK明顯下降，但肌無(wú)力癥狀加重，肌活檢示選擇性Ⅱ型纖維萎縮，Ⅰ型纖維內(nèi)脂質(zhì)增多，符合GC導(dǎo)致的骨骼肌萎縮，即類固醇肌病。結(jié)論1GC應(yīng)用后對(duì)大多數(shù)PM患者可改善骨骼肌無(wú)力癥狀，肌活檢炎細(xì)胞浸潤(rùn)檢出率下降。2類固醇相關(guān)的肌萎縮占125％。主要特征是臨床肌無(wú)力癥狀加重，但CK明顯下降，骨骼肌病理表現(xiàn)為Ⅰ型纖維內(nèi)脂滴明顯增多，選擇性Ⅱ型肌纖維萎縮。第二部分多發(fā)性肌炎患者糖皮質(zhì)激素治療導(dǎo)致肌萎縮的臨床及病理機(jī)制研究目的分析PM患者GC治療導(dǎo)致骨骼肌萎縮患者的臨床及肌肉病理特點(diǎn)，探討GC導(dǎo)致的骨骼肌萎縮在PM患者中的可能機(jī)制。方法本研究為回顧性病例對(duì)照研究，通過(guò)嚴(yán)格的納入標(biāo)準(zhǔn)及排除標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)合骨骼肌活檢病理結(jié)果選取16例患者，對(duì)照組4例PM組6例PMGC組6例，GC組患者ATPASE染色PH104有Ⅱ型纖維萎縮?；仡櫺苑治龈鹘M患者受累肌群、CK及肌電圖等各項(xiàng)臨床及實(shí)驗(yàn)室資料同時(shí)肌肉標(biāo)本HE染色觀察炎細(xì)胞浸潤(rùn)情況，ATPASE染色觀察骨骼肌纖維萎縮具體情況。免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)骨骼肌標(biāo)本中GR和MHCⅠ的表達(dá)。蛋白免疫印跡檢測(cè)GR、MURF1和MAFBX的表達(dá)情況。結(jié)果1GC應(yīng)用肌萎縮組受累肌群以雙下肢近端為著，血清CK顯著下降，組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜001。2GR在PM組表達(dá)明顯降低，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜005GC組GR表達(dá)顯著增高，兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜0053MAFBX在PM組與GC組均表達(dá)增加，與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜005，但兩組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＞005。MURF1僅在GC組表達(dá)顯著增高，與GR表達(dá)趨勢(shì)一致，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜005。結(jié)論1PM患者GC治療中出現(xiàn)雙下肢無(wú)力為主且進(jìn)行性加重，血清CK顯著降低，肌電圖無(wú)明顯異常，需警惕GC導(dǎo)致骨骼肌萎縮的出現(xiàn)2GR在PM患者GC誘導(dǎo)的骨骼肌萎縮中發(fā)揮關(guān)鍵作用，GR表達(dá)與MURF1表達(dá)趨勢(shì)一致，推測(cè)MURF1可能是GR特異性的靶蛋白，為靶向干預(yù)GC誘導(dǎo)肌萎縮提供了理論依據(jù)

簡(jiǎn)介：目的骨缺損DEFECTOFBONE是骨科常見(jiàn)疾病之一因骨腫瘤、骨髓炎、外傷等原因?qū)е鹿桥c關(guān)節(jié)的缺損尤其是伴有周圍軟組織損傷的大段骨缺損修復(fù)是臨床醫(yī)師面臨的一個(gè)難題。治療骨缺損的方法主要有1自體骨移植2異體骨移植3骨替代材料4膜引導(dǎo)性組織再生5骨延長(zhǎng)轉(zhuǎn)移6組織工程。自體骨移植是治療骨缺損傳統(tǒng)的方法是目前最理想、有效的骨移植材料。1877年ALBERT首次提出利用腓骨作為骨缺損的替代材料用于治療先天性股骨及脛骨缺損并獲得成功。目前采用帶血管蒂的腓骨移植應(yīng)用比較廣泛但由于骨腫瘤切除或者其他骨病行保肢治療過(guò)程中骨與軟組織廣泛切除后或者伴有軟組織嚴(yán)重?fù)p傷造成局部組織結(jié)構(gòu)紊亂時(shí)受區(qū)血管尋找困難此種方法則難以采用。本組臨床研究的目的是通過(guò)觀察利用自體游離不帶血管蒂腓骨移植結(jié)合內(nèi)固定加外固定治療超長(zhǎng)段骨缺損術(shù)后定期隨訪通過(guò)影像學(xué)檢查移植骨愈合情況依據(jù)ENNEKING評(píng)分系統(tǒng)對(duì)患肢功能進(jìn)行評(píng)價(jià)評(píng)估該手術(shù)方式的可行性為臨床使用自體游離不帶血管蒂的腓骨移植治療大段骨缺損提供治療依據(jù)。方法選擇2002年2月～2008年12月于我院行自體游離不帶血管腓骨聯(lián)合內(nèi)、外固定修復(fù)大段骨缺損的15例患者其中男9例女6例缺損長(zhǎng)度8～19CM平均1165CM切取腓骨長(zhǎng)度93～225CM平均1541CM年齡5～55歲平均2753歲隨訪時(shí)間12～106月平均2733月。其中肱骨近端1例橈骨遠(yuǎn)端3例脛骨8例其中脛骨近端4例、脛骨中段2例、脛骨遠(yuǎn)端2例股骨遠(yuǎn)端3例。骨髓炎1例良性腫瘤2例交界性腫瘤4例其中膝關(guān)節(jié)假體置換術(shù)后感染2例惡性腫瘤8例。第一次手術(shù)11例第二次手術(shù)1例第三次及以上手術(shù)3例。經(jīng)隨訪12～106月平均隨訪2733月。參照ENNEKING系統(tǒng)評(píng)價(jià)患肢功能以正常肢體功能的百分?jǐn)?shù)表示對(duì)移植腓骨的轉(zhuǎn)歸參照國(guó)際挽救肢體討論會(huì)上制定的“同種及帶血管骨移植放射學(xué)評(píng)價(jià)方法”進(jìn)行評(píng)價(jià)。將數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SASV80統(tǒng)計(jì)軟件檢驗(yàn)水準(zhǔn)Α005。結(jié)果本組15例患者平均隨訪2733個(gè)月所有患者均骨性愈合1例于術(shù)后3個(gè)月因外傷致移植腓骨骨折行管型石膏固定6個(gè)月后骨折處骨性愈合1例于術(shù)后6個(gè)月發(fā)生腫瘤肺部轉(zhuǎn)移死亡其余均無(wú)瘤存活無(wú)感染、骨不連或其他并發(fā)癥發(fā)生。1患肢術(shù)后功能評(píng)價(jià)本組患者肢體功能恢復(fù)4667～9667％平均約7133％。上肢組患者中重建腕關(guān)節(jié)外形接近正常腕關(guān)節(jié)外觀及功能恢復(fù)良好平均80％下肢組患者術(shù)后患肢肢體的長(zhǎng)度接近于正常保留膝關(guān)節(jié)面的患者術(shù)后關(guān)節(jié)功能恢復(fù)較好功能評(píng)分平均約6818％。2影像學(xué)檢查觀察骨愈合時(shí)間根據(jù)術(shù)后X線片所示本組全部患者移植骨于術(shù)后9～20周后均骨性愈合平均約157周。上肢平均愈合時(shí)間為115周下肢平均愈合時(shí)間為17周。與帶血管蒂腓骨移植平均愈合時(shí)間為14周相比推遲約2周。3移植骨長(zhǎng)度與愈合時(shí)間關(guān)系隨著移植骨長(zhǎng)度的增加愈合時(shí)間相對(duì)增長(zhǎng)。結(jié)論1在骨缺損長(zhǎng)度≥8CM的治療上不帶血管蒂的自體游離腓骨移植均獲得成功此方法是一種手術(shù)時(shí)間短簡(jiǎn)單、安全、易于推廣的方法。2移植骨愈合過(guò)程與相應(yīng)部位骨折愈合規(guī)律一致移植骨的長(zhǎng)度與愈合時(shí)間具有一定的相關(guān)性。3本組病例中通過(guò)將腓骨插入骨髓腔內(nèi)1～2CM增加腓骨與受區(qū)骨的接觸面積可以促進(jìn)移植骨的愈合。4內(nèi)固定對(duì)移植骨再骨折并無(wú)明顯影響同時(shí)聯(lián)合牢固的外固定防止微動(dòng)的發(fā)生均能促進(jìn)移植骨的愈合。5在遠(yuǎn)期愈后患肢功能恢復(fù)效果上不帶血管蒂的自體腓骨移植與帶血管蒂的腓骨移植并無(wú)明顯差異。6術(shù)后即可早期進(jìn)行功能鍛煉在防止肌肉萎縮、關(guān)節(jié)僵直、促進(jìn)骨折愈合與功能恢復(fù)具有積極作用。

簡(jiǎn)介：目的本課題以補(bǔ)腎活血生骨法為理論指導(dǎo)，觀察中藥復(fù)方制劑骨復(fù)生方對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物激素性股骨頭缺血性壞死血液流變學(xué)指標(biāo)的影響，探討其防治激素性股骨頭壞死的作用機(jī)制，為骨復(fù)生方臨床治療激素性股骨頭壞死提供理論依據(jù)。方法實(shí)驗(yàn)參考賀西京報(bào)道的家兔激素性股骨頭壞死的造模方法，將50只新西蘭大耳白兔雌雄均可，隨機(jī)分為空白組、模型組、中藥高劑量治療組、中藥中劑量治療組和中藥低劑量治療組，每組10只，治療組都采用骨復(fù)生方灌胃治療?？瞻捉M每4天肌注射生理鹽水2MLKG次1，余組均每周兩次肌注醋酸氫化潑尼松8MGKG次1，連續(xù)注射8周，共16次。每次注射均在上午8點(diǎn)到11點(diǎn)之間，同時(shí)為預(yù)防感染，動(dòng)物每周23肌注青霉素鈉，每次8萬(wàn)單位只。8周后誘導(dǎo)出激素性股骨頭缺血性壞死的早期動(dòng)物模型，從造模成功后的第1天開(kāi)始對(duì)各治療組用中藥制劑骨復(fù)生方灌胃治療，連續(xù)治療4周后，禁食12小時(shí)，置于實(shí)驗(yàn)用固定臺(tái)上，綁定四肢及頭部，麻醉后剃除胸前區(qū)毛，用20ML注射器心臟采血，測(cè)定血液流變學(xué)指標(biāo)，并進(jìn)行分析比較。血液流變學(xué)檢測(cè)結(jié)果用T檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差X±S表示。結(jié)果1一般情況與空白組對(duì)比模型組、中藥低劑量組家兔體重顯著下降P＜001；與模型組對(duì)比，中藥高劑量治療組家兔體重增加明顯P＜005?？瞻捉M家兔精神狀態(tài)良好，毛柔順潤(rùn)澤、潔凈，活動(dòng)自如，飲食及二便如常。模型組精神狀態(tài)最差，自潔性差，毛雜亂、色枯稿無(wú)光，自發(fā)活動(dòng)明顯減少，明顯跛行，對(duì)外界的刺激的敏感性顯著降低，飲食及二便量很少。中藥低劑量治療組精神狀態(tài)較差，毛雜亂、顯干枯，活動(dòng)少，跛行明顯，飲食及二便量較少。中藥中劑量治療組精神狀態(tài)較中藥高劑量治療組差，光澤度差，活動(dòng)較少，跛行，對(duì)外界刺激敏感度較低，飲食及二便量略減少。中藥高劑量治療組精神狀態(tài)較空白組略差，明顯好于中劑量組，毛色潤(rùn)澤，活動(dòng)多，跛行不明顯，對(duì)外界刺激較敏感，飲食及二便基本正常。2血液流變學(xué)①模型組血液流變學(xué)指標(biāo)普遍增高，與空白組比較模型組全血高切明顯增高P＜005，全血低切有顯著增高P＜001，模型組血漿粘度、紅細(xì)胞壓積和纖維蛋白原都明顯升高P＜005，模型組全血還原粘度高切明顯升高P＜005，全血還原粘度低切有顯著升高P＜001，紅細(xì)胞聚集指數(shù)和電泳指數(shù)明顯升高P＜001，而變性指數(shù)降低P＜005。②治療組血液流變學(xué)指標(biāo)普遍降低，與模型組比較，血液流變學(xué)各指標(biāo)有顯著性差異P＜005，中藥高劑量治療組各指標(biāo)均出現(xiàn)明顯變化，治療后下降的指標(biāo)有全血粘度低切、高切、全血還原粘度高切、血漿粘度和纖維蛋白原、紅細(xì)胞聚集指數(shù)、紅細(xì)胞壓積和電泳指數(shù)，全血還原粘度低切顯著下降P＜001，而紅細(xì)胞變形指數(shù)增高P＜005。中藥中劑量治療的全血還原粘度低切、全血粘度低切血漿粘度都下降P＜005，而對(duì)全血粘度高切影響不大。中藥低劑量治療組全血粘度、血漿粘度與模型組相比，有所改善，但是沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論1補(bǔ)腎活血生骨方劑骨復(fù)生方能明顯改善激素性股骨頭壞死家兔的一般狀態(tài)，提高對(duì)刺激的反應(yīng)、緩解疼痛和改善關(guān)節(jié)功能。2補(bǔ)腎活血生骨方劑骨復(fù)生可明顯降低全血粘度、血漿粘度、紅細(xì)胞聚集指數(shù)、紅細(xì)胞壓積、纖維蛋白原和紅細(xì)胞剛性指數(shù)，改善毛細(xì)血管通透性，提高紅細(xì)胞變形指數(shù)，從而改善股骨頭微循環(huán)，增強(qiáng)骨的血液供應(yīng)，防止和減輕骨細(xì)胞壞死，促進(jìn)壞死骨的修復(fù)和新生骨的再生。對(duì)激素性股骨頭缺血性壞死有明顯的預(yù)防和治療作用。

簡(jiǎn)介：背景和目的日本骨科學(xué)會(huì)JOA自1985年起每5年就開(kāi)展一次全國(guó)性的有關(guān)骨移植材料使用情況的調(diào)查，發(fā)現(xiàn)隨著現(xiàn)代醫(yī)療條件的改善，骨移植材料的使用每年都在增加，2007年最新一次發(fā)布的結(jié)果顯示2000年至2004年5年間的163，564例組織移植病例中824％為骨移植，其中植骨材料的選擇自體骨依然是首選，占564％；各種合成骨移植替代物占40％；骨庫(kù)同種異體骨僅占36％，但與前五年同期比較三者各自所占移植總量的比值卻表現(xiàn)為自體骨移植所占比例不斷下降，人工骨移植比例持續(xù)上升，骨庫(kù)同種異體骨增速最快，三者平均每年較前年遞增倍數(shù)分別為132，168，和172倍1，故而部分專家建議對(duì)于小兒骨缺損修復(fù)則不再首選自體骨移植。其原因主要是考慮自體骨移植局部效果雖好，但仍屬于“拆東墻補(bǔ)西墻”，且兒童青少年往往骨量有限，無(wú)法滿足大量植骨的需要，造成術(shù)中困難，對(duì)較大骨囊腫造成囊腔內(nèi)殘留死腔而致術(shù)后復(fù)發(fā)，而且取自體骨增加手術(shù)時(shí)間、費(fèi)用和感染幾率，造成取骨區(qū)疼痛，影響兒童骨骼發(fā)育2。而親屬骨作為同種異體骨也并非臨床植骨的最優(yōu)選擇，且難以保證其確切的療效3。各國(guó)的研究者們?cè)?jīng)嘗試采用多種人工替代材料修復(fù)這些骨缺損4，如各種人工合成材料、同種異體骨、人同種異體的脫鈣骨基質(zhì)等，雖然這些材料分別從某些特定的方面一定程度上彌補(bǔ)了自體骨植骨的缺點(diǎn)，但其固有缺陷決定了這些材料在骨需求量大，患者自身情況差時(shí)均不能較好地滿足臨床的需要及患者的要求。鑒于以組織工程骨修復(fù)大動(dòng)物長(zhǎng)骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究已取得了突破性的進(jìn)展5，有必要在此工作基礎(chǔ)上謹(jǐn)慎地進(jìn)行一部分臨床試用性研究為今后組織工程骨正式走上臨床，形成對(duì)長(zhǎng)骨缺損的正規(guī)化、規(guī)?；刂委熌Ｊ酵瓿膳R床觀察數(shù)據(jù)的初步積累，進(jìn)一步完善以組織工程骨修復(fù)長(zhǎng)骨缺損治療及隨訪的標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程6。然而目前我們所研制的組織工程骨構(gòu)建需要花費(fèi)較長(zhǎng)的時(shí)間7且保存條件苛刻，不能達(dá)到“隨取隨用”的最終要求8。早期的研究發(fā)現(xiàn)，部分蛋白制品通過(guò)冷凍干燥技術(shù)處理后的真空包裝可以達(dá)到在室溫下保存2年而不發(fā)生變質(zhì)的良好效果9，從最早應(yīng)用于處理生物學(xué)材料直到今天PHILIPJ等使用凍干同種異體骨成功修復(fù)牙周骨缺損10，凍干技術(shù)在骨組織保存方面的研究走過(guò)了近六十年的發(fā)展歷程，且還有研究表明，長(zhǎng)期深低溫保存對(duì)于骨組織組織學(xué)以及力學(xué)性能的影響可以忽略不計(jì)11，這無(wú)疑為組織工程骨這種對(duì)成骨效能和力學(xué)強(qiáng)度同時(shí)均有較高要求的組織工程產(chǎn)品的保存乃至產(chǎn)業(yè)化指出了今后的發(fā)展方向。此項(xiàng)研究的臨床試用是在獲得了第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)后進(jìn)行的，實(shí)施本項(xiàng)試用的西南醫(yī)院骨科已成為全軍首家獲得總后勤部衛(wèi)生部批文的單位。方法1本課題按照組織工程骨修復(fù)長(zhǎng)骨缺損臨床試用標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程SOP為特定的患者于術(shù)前34周開(kāi)始構(gòu)建個(gè)體化的組織工程骨，并在此過(guò)程中按規(guī)程中預(yù)定的檢驗(yàn)項(xiàng)目對(duì)構(gòu)建過(guò)程中的每個(gè)階段的目標(biāo)細(xì)胞或組織進(jìn)行嚴(yán)格的篩選和測(cè)定，始終信守首先保障受試者人身安全的承諾。2組織工程骨構(gòu)建成功后由指定醫(yī)師按照SOP中預(yù)定的臨床路徑展開(kāi)對(duì)受試者圍手術(shù)期的各項(xiàng)診療、隨訪觀察和與受試者之間進(jìn)行對(duì)其康復(fù)進(jìn)程的長(zhǎng)期動(dòng)態(tài)交流，以便及時(shí)發(fā)現(xiàn)可能出現(xiàn)的問(wèn)題，給予受試者有益的建議和幫助。臨床療效評(píng)價(jià)主要通過(guò)對(duì)受試者影像學(xué)及血液學(xué)各項(xiàng)指標(biāo)的持續(xù)監(jiān)測(cè)進(jìn)行。3將當(dāng)天手術(shù)預(yù)留的組織工程骨同期植入6周齡BALBC裸鼠皮下，通過(guò)對(duì)其定期行X線檢查、CT掃描以及取植入骨組織行切片、組織化學(xué)染色的方法評(píng)價(jià)植入骨的成骨情況，同時(shí)向裸鼠皮下注射與植入骨內(nèi)等量的種子細(xì)胞混懸液，通過(guò)觀察其生活習(xí)性有無(wú)改變及定期稱重、取其重要臟器行切片、HE染色觀察的方法初步評(píng)價(jià)種子細(xì)胞的致瘤性。4將個(gè)體化的組織工程骨按標(biāo)準(zhǔn)程序凍干后與未凍干的組織工程骨一并提取其中的成骨相關(guān)蛋白后通過(guò)WESTERNBLOTTING技術(shù)對(duì)其中BMP2、TGFΒ1以及IGF1的表達(dá)進(jìn)行測(cè)定，初步對(duì)個(gè)體化組織工程骨成骨機(jī)制和凍干對(duì)組織工程骨成骨能力的影響做一探索性研究。結(jié)果1按照組織工程骨臨床試用標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程構(gòu)建個(gè)體化工程骨的過(guò)程中，種子細(xì)胞增殖迅速，誘導(dǎo)分化效率高，構(gòu)建的骨組織內(nèi)細(xì)胞基質(zhì)分泌旺盛，幾乎充滿支架材料的每個(gè)孔隙。2嚴(yán)格按照組織工程骨SOP成功完成了30例試用者所需組織工程骨的構(gòu)建，所有試用者手術(shù)過(guò)程順利并獲得了較完備的臨床隨訪資料。資料顯示腔隙性骨缺損植骨區(qū)于術(shù)后平均3月左右均可見(jiàn)較高密度的鈣化影，術(shù)后12月左右病灶獲得基本修復(fù)，CT檢查發(fā)現(xiàn)髓腔樣結(jié)構(gòu)。術(shù)后隨訪15年的病例可發(fā)現(xiàn)完全的髓腔再通，抽血檢查結(jié)果顯示各項(xiàng)指標(biāo)基本正常，符合術(shù)前對(duì)組織工程骨成骨效能較高且安全性良好的預(yù)測(cè)。3裸鼠皮下異位成骨實(shí)驗(yàn)中，術(shù)后1、2、3月復(fù)查X線片可觀察到植骨區(qū)逐漸出現(xiàn)高密度影的同時(shí)對(duì)照側(cè)DBM始終未顯影；術(shù)后3月組織學(xué)HE及MASSON染色切片可觀察到組織塊內(nèi)部及外部均有編織骨形成，并有較多的成骨細(xì)胞及小血管長(zhǎng)入；皮下注射種子細(xì)胞混懸液實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，實(shí)驗(yàn)裸鼠未見(jiàn)明顯生活習(xí)性改變，切取其心、肺、肝、腎做HE染色觀察未見(jiàn)組織破壞或腫瘤樣組織形成。4個(gè)體化組織工程骨內(nèi)BMP2、TGFΒ1以及IGF1三種抗體均呈陽(yáng)性表達(dá)，細(xì)胞上架后電泳灰度值經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析均與上架前有顯著差異P＜001，表示細(xì)胞分泌蛋白量較未上架時(shí)有顯著意義的增加，同一樣本不同時(shí)間點(diǎn)電泳灰度值比較顯示上架第5、7、9天與上架3、12、15天相比較有顯著差異P＜005表示三種蛋白的表達(dá)高峰時(shí)段為上架后59天。結(jié)論1構(gòu)建的個(gè)體化組織工程骨用于臨床修復(fù)骨缺損未見(jiàn)明顯的排斥反應(yīng)，提示個(gè)體化的組織工程骨具有良好的組織相容性好和較為廣泛的臨床應(yīng)用前景。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床應(yīng)用均觀察到體外構(gòu)建的組織工程骨具有良好的誘導(dǎo)成骨和促進(jìn)骨愈合作用。2通過(guò)對(duì)組織工程骨臨床試用者較長(zhǎng)期的血清學(xué)持續(xù)監(jiān)測(cè)和放射學(xué)動(dòng)態(tài)觀察，初步證實(shí)了組織工程骨用于修復(fù)各類長(zhǎng)骨缺損有較強(qiáng)的生物安全性。3個(gè)體化的組織工程骨修復(fù)小兒長(zhǎng)骨缺損顯示出了可喜的臨床效果，這為治療各種病因造成的小兒骨缺損的這一臨床難題提供了新的思路和方法。4根據(jù)我科制定并已提交SFDA討論審定的組織工程骨構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程所制備的個(gè)體化組織工程骨可分泌較多的BMP2、TGFΒ1以及IGF1，且凍干后的個(gè)體化組織工程骨依然存在較高的成骨活性，為組織工程骨產(chǎn)品的較長(zhǎng)期保存提供了可行性技術(shù)支持。

簡(jiǎn)介：最為理想的生物材料就是機(jī)體自身的組織天然生物材料經(jīng)過(guò)億萬(wàn)年的演變進(jìn)化形成具有結(jié)構(gòu)復(fù)雜精巧、效能奇妙多彩的功能原理和作用機(jī)制。新鮮自體骨是由無(wú)機(jī)材料和有機(jī)材料巧妙地結(jié)合在一起形成的復(fù)合體其中無(wú)機(jī)材料的大部分是羥基磷灰石結(jié)晶具有較高的骨誘導(dǎo)性無(wú)免疫排斥反應(yīng)但是會(huì)增加手術(shù)創(chuàng)傷并且病人還會(huì)出現(xiàn)局部疼痛、感覺(jué)異?；蜻^(guò)敏等并發(fā)癥骨的來(lái)源也十分有限。近年來(lái)利用組織工程化骨修復(fù)骨缺損不僅提供了一種修復(fù)骨缺損的方法而且也提供了一種全新思路骨組織工程學(xué)的研究為治療骨缺損帶來(lái)了新的希望。目前體外構(gòu)建的組織工程化人工骨雖然還停留在實(shí)驗(yàn)室及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)階段但隨著細(xì)胞生物學(xué)、工程學(xué)、免疫學(xué)、材料學(xué)等相關(guān)學(xué)科的發(fā)展骨組織工程學(xué)的研究也將會(huì)取得突破性進(jìn)展在工業(yè)化生產(chǎn)和臨床應(yīng)用上有著極其廣闊的應(yīng)用前景它將會(huì)成為21世紀(jì)極具發(fā)展?jié)摿Φ母咝录夹g(shù)產(chǎn)業(yè)蘊(yùn)藏著巨大的經(jīng)濟(jì)與社會(huì)效益。作為人類骨組織的主要無(wú)機(jī)成分羥基磷灰石生物陶瓷價(jià)廉易得具有良好的生物相容性可降解又具備骨引導(dǎo)、骨融合性尤其是含孔的珊瑚羥基磷灰石可提供很大的表面積體積比能保證細(xì)胞的增殖、分化和高代謝活動(dòng)所以特別適合用于骨組織工程。隨著現(xiàn)代工業(yè)化機(jī)械化程度的提高由于創(chuàng)傷、感染、腫瘤、事故、戰(zhàn)爭(zhēng)、地震等所致的大量污染性骨缺損發(fā)生率大幅度升高。對(duì)其傳統(tǒng)治療方法即先清創(chuàng)、待傷口關(guān)閉、無(wú)感染跡象3～6個(gè)月后、再行二期植骨修復(fù)；而一期植骨常因發(fā)生較高的感染率而被視為禁忌且臨床上細(xì)菌耐藥性的問(wèn)題日益嚴(yán)重植骨材料加載抗生素的作用越來(lái)越局限化對(duì)抗菌劑提出了更高的要求。為解決傳統(tǒng)治療方法所帶來(lái)的增加治療時(shí)間、難度、患者的痛苦和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)等一系列問(wèn)題改變傳統(tǒng)觀念近年來(lái)國(guó)內(nèi)外學(xué)者在抗菌骨移植材料的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)和臨床實(shí)踐方面進(jìn)行了大量的研究取得了一定的進(jìn)展。為此我們研制一種抗菌性骨支架修復(fù)材料并經(jīng)以下系列實(shí)驗(yàn)研究證明這一抗菌性骨修復(fù)材料具有良好的生物相容性可在局部緩釋銀離子有效地抑制污染性骨缺損清創(chuàng)術(shù)后局部殘留的細(xì)菌。實(shí)驗(yàn)分四個(gè)部分進(jìn)行觀察研究課題研究第一部分載銀珊瑚羥基磷灰石人工骨的制備及性能表征。目的制備載銀珊瑚羥基磷灰石人工骨并觀察其理化性能表征。方法實(shí)驗(yàn)于20080508在清華大學(xué)材料科學(xué)與工程系實(shí)驗(yàn)室完成。實(shí)驗(yàn)材料在加工好的珊瑚羥基磷灰石CALHYDROXYAPATITECHA顆粒與相應(yīng)濃度硝酸銀SILVERNITRATEAGNO3溶液浸泡一定時(shí)間后置入凍干機(jī)凍干制得載銀珊瑚羥基磷灰石SILVERLOADEDCALHYDROXYAPATITESLCHA或AGCHA。應(yīng)用X射線衍射法對(duì)AGCHA、CHA和純珊瑚樣品晶體的物相、結(jié)構(gòu)和位相進(jìn)行分析；應(yīng)用FTIR光譜法對(duì)樣品的材料組成進(jìn)行分析；應(yīng)用掃描電鏡觀察材料的顯微形貌和孔徑；利用壓縮試驗(yàn)及三點(diǎn)彎曲試驗(yàn)評(píng)價(jià)骨修復(fù)支架材料的機(jī)械性能。應(yīng)用SPSS130軟件對(duì)機(jī)械性能測(cè)試結(jié)果行單向方差分析及LSD法兩兩比較Α005。結(jié)論珊瑚羥基磷灰石經(jīng)載銀后未改變其理化性能依然維持著三維多孔框架結(jié)構(gòu)；制備原理主要為鈣銀離子之間的置換反應(yīng)其次為銀離子的溶出沉積反應(yīng)并且隨著制備過(guò)程中硝酸銀溶液濃度的遞增AGCHA的載銀量也隨之遞增。課題研究第二部分載銀珊瑚羥基磷灰石人工骨的載銀量及體外緩釋實(shí)驗(yàn)研究目的研制載銀珊瑚羥基磷灰石抗菌性人工骨支架材料通過(guò)對(duì)其自身載銀量及體外緩釋實(shí)驗(yàn)完善對(duì)該抗菌性磷灰石類復(fù)合人工骨的認(rèn)識(shí)。方法應(yīng)用電感耦合等離子體發(fā)射光譜INDUCTIVELYCOUPLEDPLASMAOPTICALEMISSIONSPECTROMETRYICPOES測(cè)定載銀材料中銀的平均含量并在模擬體液STIMULATEDBODYFLUIDSBFPH725中通過(guò)體外釋放試驗(yàn)測(cè)定銀離子釋放濃度與時(shí)間的變化曲線探討材料結(jié)構(gòu)與釋放銀的關(guān)聯(lián)性。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS130統(tǒng)計(jì)軟件處理用相關(guān)回歸分析和曲線擬合載銀量與AGNO3濃度關(guān)系曲線建立回歸方程。結(jié)論載銀珊瑚羥基磷灰石之所以能保持長(zhǎng)時(shí)間的銀離子釋放與羥基磷灰石本身的空間晶格結(jié)構(gòu)關(guān)系密切這種可逆的離子置換過(guò)程使其釋放性能更顯著能更有效地避免銀離子突釋保持長(zhǎng)時(shí)間的持續(xù)釋放有效地減少金屬銀的使用量達(dá)到減毒增效的作用。課題研究第三部分載銀珊瑚羥基磷灰石人工骨的細(xì)胞相容性研究目的研制載銀珊瑚羥基磷灰石抗菌性人工骨支架材料觀察其在體外與小鼠胚胎成骨細(xì)胞株MC3T3E1的細(xì)胞相容性。方法實(shí)驗(yàn)于20090609在廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院實(shí)驗(yàn)科完成。采用體外細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)將MC3T3E1細(xì)胞種植于103、8105、105MOLLAGCHACHA及純珊瑚支架材料上。實(shí)驗(yàn)評(píng)估①M(fèi)TT法測(cè)定MC3T3E1細(xì)胞接種在不同支架材料上生長(zhǎng)135D后的吸光光度值繪制細(xì)胞在不同骨材料上的生長(zhǎng)曲線評(píng)價(jià)材料上細(xì)胞的增殖情況；②堿性磷酸酶ALP活性法測(cè)定細(xì)胞接種在不同支架材料上246D的吸光光度值計(jì)算培養(yǎng)液中堿性磷酸酶值；③倒置相差顯微鏡下直接觀察培養(yǎng)板上MC3T3E1細(xì)胞的生長(zhǎng)形貌；④應(yīng)用激光共聚焦顯微鏡CONFOCALLASERSCANNINGMICROSCOPESCLSM直接觀察支架材料上MC3T3E1細(xì)胞的生長(zhǎng)形貌；⑤應(yīng)用掃描電鏡SEM觀察細(xì)胞在材料上生長(zhǎng)的微觀形貌。應(yīng)用SPSS130軟件對(duì)各框架材料上的細(xì)胞生長(zhǎng)情況結(jié)果行析因方差分析及LSD法兩兩比較ΑO05。結(jié)論通過(guò)MTT、ALP活性、倒置相差顯微鏡、激光共聚焦及掃描電鏡全方位多角度觀察了細(xì)胞在天然框架材料上的反應(yīng)。細(xì)胞增殖、生長(zhǎng)良好表明材料具有良好的細(xì)胞相容性。MTT、ALP活性的定量結(jié)果表明低載銀量珊瑚羥基磷灰石材料與非載銀骨替代材料的生物相容性基本一致。課題研究第四部分載銀珊瑚羥基磷灰石人工骨修復(fù)兔橈骨污染性骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究目的通過(guò)體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)檢測(cè)該抗菌性人工骨植入動(dòng)物體內(nèi)的組織相容性、骨傳導(dǎo)性和材料的生物降解等組織自愈合生物學(xué)性能。方法新西蘭大白兔36只隨機(jī)分為4組每組9只。選用新西蘭大白兔制作兔橈骨15MM節(jié)段性污染性骨與骨膜缺損模型將36只大白兔稱重按體重大小順序編號(hào)按隨機(jī)數(shù)目表法隨機(jī)分為A～D組。A組植入載銀珊瑚羥基磷灰石材料；B組植入珊瑚羥基磷灰石材料；C組植入原位自體骨材料；D組無(wú)任何植入做為對(duì)照組。分別于術(shù)后2610周分三次處死動(dòng)物取材每次每組3只通過(guò)大體觀察、影像學(xué)檢查、組織學(xué)檢查觀察比較各組骨缺損修復(fù)情況應(yīng)用SPSS130軟件對(duì)X線觀察結(jié)果行重復(fù)測(cè)量方差分析及LSD法兩兩比較Α005比較上述各組對(duì)大段骨缺損的修復(fù)作用。結(jié)果不同組材料對(duì)骨缺損修復(fù)的大體觀察結(jié)果可見(jiàn)2W時(shí)A、B兩組移植物表面有肉芽組織和部分半透明骨質(zhì)覆蓋與宿主骨斷端間有部分骨痂連接移植物無(wú)明顯移位；C組移植物與宿主骨有部分骨痂連接移植物無(wú)活動(dòng)；D組骨缺損區(qū)填充以肌纖維組織。6W時(shí)A、B兩組移植物表面有薄層骨質(zhì)覆蓋與宿主骨斷端間有大量骨痂連接較穩(wěn)固；C組移植物與宿主骨皮質(zhì)連續(xù)但不均勻移植物無(wú)明顯移位；D組缺損區(qū)仍填充以肌纖維組織。10W時(shí)A、B兩組移植物表面有明顯連續(xù)骨質(zhì)覆蓋移植物穩(wěn)固；C組移植物與宿主骨皮質(zhì)連續(xù)成一體；D組缺損區(qū)仍填充以肌纖維組織。X線檢查結(jié)果可見(jiàn)不同時(shí)間點(diǎn)各組之間比較有顯著性差異F11537P0000；自體骨成骨情況最好與其他各組之間比較有顯著性差異P值分別為0004、0010、0000說(shuō)明自體骨組織在大段骨缺損修復(fù)時(shí)仍然是最好的材料；AGCHA組與CHA組兩組比較無(wú)顯著性差異P值分別為0524說(shuō)明珊瑚羥基磷灰石經(jīng)一定量載銀后其成骨作用未受明顯影響；對(duì)照組與其他各組之間比較有顯著性差異P0000、0000、0000說(shuō)明污染性兔橈骨大段骨缺損后其成骨作用明顯受到抑制其模型制作是成功的。結(jié)論根據(jù)仿生的思路和以往對(duì)骨修復(fù)框架材料的研究我們制備了一種新型的抗菌性框架材料用于污染性骨缺損修復(fù)。此材料成分和結(jié)構(gòu)均與天然骨無(wú)機(jī)成分有相似性多孔結(jié)構(gòu)與松質(zhì)骨類似。通過(guò)體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明了此材料具有良好的生物相容性和骨傳導(dǎo)性是有效的骨修復(fù)框架材料可以達(dá)到與自體骨材料相同的效果有希望成為污染性骨缺損修復(fù)的優(yōu)選材料具有廣闊的市場(chǎng)前景。綜上所述抗菌性載銀珊瑚羥基磷灰石骨替代材料的制備過(guò)程簡(jiǎn)單抗菌劑銀離子的緩釋性能較為理想在污染性大段骨缺損處有良好的骨傳導(dǎo)性及成骨作用可以預(yù)想該抗菌人工骨材料是一種治療污染性骨缺損的良好骨修復(fù)材料。

簡(jiǎn)介：分類號(hào)分類號(hào)R783R7835學(xué)校代碼學(xué)校代碼1039210392學(xué)科專業(yè)代碼學(xué)科專業(yè)代碼100302100302學(xué)號(hào)號(hào)21209043882120904388碩士學(xué)位論文碩士學(xué)位論文成人骨性Ⅱ類不同垂直骨面型患者切牙區(qū)和頦部形態(tài)成人骨性Ⅱ類不同垂直骨面型患者切牙區(qū)和頦部形態(tài)的三維研究的三維研究THETHREEDIMENSIONRESEARCHOFINCISREGIONCHINMPHOLOGYINSKELETALCLASSⅡADULTPATIENTSOFDIFFERENTVERTICALFACIALTYPES學(xué)位類型學(xué)位類型醫(yī)學(xué)碩士醫(yī)學(xué)碩士所在學(xué)院所在學(xué)院口腔醫(yī)學(xué)院口腔醫(yī)學(xué)院申請(qǐng)人姓名申請(qǐng)人姓名孫毅孫毅學(xué)科專業(yè)學(xué)科專業(yè)口腔臨床醫(yī)學(xué)口腔臨床醫(yī)學(xué)導(dǎo)師師史建陸史建陸副教授副教授研究起止時(shí)間研究起止時(shí)間2012年9月至月至2015年3月答辯委主席答辯委主席厲松教授教授答辯日期答辯日期2015年6月8日二○一五年五月目錄附錄1中文摘要2ABSTRACT4正文6前言6第一部分成人骨性Ⅱ類不同垂直骨面型患者切牙區(qū)牙槽骨形態(tài)和切牙位置的三維研究1材料和方法102結(jié)果223討論424結(jié)論49第二部分成人骨性Ⅱ類不同垂直骨面型患者頦部形態(tài)的三維研究1材料和方法502結(jié)果533討論564結(jié)論59全文總結(jié)60參考文獻(xiàn)61綜述71致謝81

簡(jiǎn)介：腫瘤、創(chuàng)傷、感染等因素所造成的大面積骨缺損修復(fù)一直是困擾骨科醫(yī)生的難題。目前，骨缺損的治療主要還是依賴傳統(tǒng)的骨移植術(shù)，但傳統(tǒng)方式一般會(huì)經(jīng)歷多次手術(shù)、存在諸多副作用及因手術(shù)失敗引起的截肢或喪失骨負(fù)重等可能性，因此迫切需要新的替代方法以滿足臨床治療需求。生長(zhǎng)因子的應(yīng)用為骨缺損治療提供了一種可供選擇的治療方式。目前經(jīng)FDA批準(zhǔn)的用于臨床骨修復(fù)的生長(zhǎng)因子主要是BMPS家族蛋白，其中RHBMP2的活性最強(qiáng)，但在臨床運(yùn)用中RHBMP2卻存在治療費(fèi)用較高，有效劑量難以控制易導(dǎo)致異位成骨、過(guò)量成骨、新生骨快速吸收等成骨異?，F(xiàn)象出現(xiàn)。本文針對(duì)RHBMP2在臨床運(yùn)用中出現(xiàn)的問(wèn)題，試圖尋找到一種替代因子或與RHBMP2聯(lián)用能解決其成骨異常問(wèn)題的因子。力生長(zhǎng)因子E肽CTERMINAL24AMINOACIDPEPTIDEOFMECHANOGROWTHFACT，MGF24E是近年來(lái)引起廣泛關(guān)注的一個(gè)功能活性多肽，是受損組織表達(dá)的一種IGFⅠ選擇性剪接變體，實(shí)驗(yàn)已證明它能保護(hù)受損組織及細(xì)胞，促進(jìn)損傷修復(fù)?；诒菊n題組對(duì)MGF24E的前期研究成果，本研究從影像學(xué)、組織學(xué)以及生物力學(xué)等多方面證實(shí)了力生長(zhǎng)因子E肽MGF24E以及MGF24ERHBMP2聯(lián)合用藥在臨界骨缺損修復(fù)中的積極作用，同時(shí)在細(xì)胞學(xué)水平、基因水平以及蛋白質(zhì)水平探討了損傷修復(fù)機(jī)制。研究的主要內(nèi)容和所取得的結(jié)果如下1在制備了1MM左右間隙的SD大鼠橈骨開(kāi)放性骨折模型的基礎(chǔ)上，利用前期制備的MGFMGF24E兔抗人多抗，采用WESTERNBLOT技術(shù)檢測(cè)和分析大鼠骨折修復(fù)組織中MGF蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果顯示截骨損傷組織中MGF蛋白表達(dá)在術(shù)后1天即上升到較高值，術(shù)后第3天達(dá)到最高值，隨后表達(dá)量雖有下降但仍維持較高表達(dá)。2從影像學(xué)和組織學(xué)的觀察及分析角度，綜合評(píng)價(jià)外源MGF24E注射修復(fù)兔橈骨節(jié)段性骨折的效果。①高劑量MGF24E修復(fù)兔橈骨5MM節(jié)段性骨折的臨床愈合時(shí)間，較MGF24E低劑量組和陰性對(duì)照組提早2周；MGF24E高劑量組重建骨組織為髓腔貫通的管狀骨，其修復(fù)情況明顯好于MGF24E低劑量組和陰性對(duì)照組；②高劑量MGF24E能顯著促進(jìn)骨折重建組織的血管新生，組織學(xué)評(píng)分結(jié)果顯示高劑量組樣本新生血管數(shù)為陰性對(duì)照組的2倍以上。3采用2％FBS血清饑餓細(xì)胞模型，以PBS為陰性對(duì)照、100NGMLVEGF165為陽(yáng)性對(duì)照，考察MGF24E對(duì)人靜脈內(nèi)皮EAHY926細(xì)胞增殖、遷移和體外管腔形成的影響；以PBS為陰性對(duì)照，10％FBS正常培養(yǎng)條件為陽(yáng)性對(duì)照，考察10NGMLMGF24E對(duì)人靜脈內(nèi)皮EAHY926細(xì)胞VEGF和ANGⅠ的MRNA及蛋白表達(dá)的影響；同時(shí)還研究了MAPKERK通路在MGF24E影響血管內(nèi)皮細(xì)胞體外血管化細(xì)胞行為及其分子機(jī)制中的作用。①10NGMLMGF24E促細(xì)胞增殖能力等效于100NGMLVEGF165，MGF24E促細(xì)胞增殖是通過(guò)增加S期細(xì)胞數(shù)目和促進(jìn)細(xì)胞DNA合成的方式完成，并完全依賴MAPKERK信號(hào)通路；②MGF24E促細(xì)胞遷移、管腔形成的能力明顯強(qiáng)于PBS陰性對(duì)照，但弱于VEGF165，并發(fā)現(xiàn)MAPKERK通路部分參與了MGF24E促細(xì)胞遷移、管腔形成等事件；③MGF24E能逆轉(zhuǎn)血清饑餓引起的正常生長(zhǎng)細(xì)胞VEGF和ANGⅠ表達(dá)下調(diào)的趨勢(shì)，其上調(diào)量高于正常培養(yǎng)組的表達(dá)量，并發(fā)現(xiàn)MAPKERK通路部分參與了MGF24E上調(diào)VEGF和ANGⅠ表達(dá)的整個(gè)過(guò)程。4采用7％FBS血清饑餓細(xì)胞模型，以PBS為陰性對(duì)照、100NGMLVEGF16550NGMLRHBMP2的聯(lián)合用藥為陽(yáng)性對(duì)照，25NGMLMGF24E、50NGMLRHBMP2單給藥為聯(lián)合用藥組的增效參照，考察25NGMLMGF24E50NGMLRHBMP2聯(lián)合用藥對(duì)原代成骨細(xì)胞增殖、遷移、分化早期指標(biāo)ALP活性以及礦化鈣分泌量表達(dá)的影響，并研究其分子機(jī)制。①M(fèi)GF24E促細(xì)胞增殖能力強(qiáng)于RHBMP2和PBS，相對(duì)于MGF24E或RHBMP2單獨(dú)給藥，MGF24ERHBMP2聯(lián)合用藥對(duì)促進(jìn)細(xì)胞DNA合成、遷移和分化礦化有協(xié)同增效作用；陽(yáng)性對(duì)照除對(duì)促進(jìn)細(xì)胞遷移有協(xié)同增效作用外，在其他成骨相關(guān)細(xì)胞生理行為上均表現(xiàn)為拮抗抑制作用②MGF24ERHBMP2聯(lián)合用藥在細(xì)胞分化礦化事件上的協(xié)同增效作用主要涉及調(diào)控成骨信號(hào)通路的轉(zhuǎn)錄因子RUNX2基因和骨基質(zhì)形成的OPN基因表達(dá)上調(diào)。5以可吸收明膠海綿ABSBABLEGELATINSPONGE，AGS作為載體，采用低溫負(fù)壓物理吸附法制備4種不同給藥方案的復(fù)合生長(zhǎng)因子支架，并對(duì)復(fù)合支架的形貌結(jié)構(gòu)、孔隙率、生長(zhǎng)因子的體外釋放以及支架細(xì)胞相容性等性能進(jìn)行評(píng)價(jià)。①掃描電鏡結(jié)果顯示，生長(zhǎng)因子成球狀分布于復(fù)合AGS支架內(nèi)部，支架孔徑和孔隙率能滿足成骨細(xì)胞長(zhǎng)入；②體外釋放結(jié)果顯示，不同復(fù)合支架中生長(zhǎng)因子的體外釋放均發(fā)生突釋現(xiàn)象，其中MGF24E釋放最快，RHBMP2釋放最慢，生長(zhǎng)因子的釋放規(guī)律可滿足機(jī)體對(duì)MGF24E需求以及臨床上RHBMP2的一次性高濃度給藥方式；③復(fù)合支架中成骨細(xì)胞活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，各組復(fù)合支架表現(xiàn)出細(xì)胞相容性差異，聯(lián)合用藥組和MGF24E組支架的細(xì)胞相容性優(yōu)于RHBMP2組和陰性對(duì)照支架。6建立了兔橈骨15MM節(jié)段性臨界骨缺損模型，以PBS為陰性對(duì)照、80GGRHBMP2為陽(yáng)性對(duì)照，從影像學(xué)、組織學(xué)和生物力學(xué)三方面考察200GGMGF24E和200GGMGF24E80ΜGRHBMP2聯(lián)合用藥對(duì)臨界骨缺損修復(fù)的作用；依據(jù)成骨相關(guān)蛋白OPN和新生血管標(biāo)記蛋白CD31的表達(dá)規(guī)律分析MGF24E和MGF24ERHBMP2聯(lián)合用藥的臨界骨缺損修復(fù)機(jī)制。①影像學(xué)結(jié)果顯示，聯(lián)合用藥修復(fù)臨界骨缺損的骨皮質(zhì)橋接愈合時(shí)間為12周，骨痂橋接的臨床愈合時(shí)間為4周，早于RHBMP2組；RHBMP2組樣本愈合經(jīng)歷了過(guò)度成骨，新生骨快速吸收尺橈骨融合現(xiàn)象的過(guò)程，聯(lián)合用藥完全逆轉(zhuǎn)了RHBMP2骨修復(fù)異常的趨勢(shì)；術(shù)后12周MGF24E組雖只有50％樣本達(dá)到骨皮質(zhì)愈合標(biāo)準(zhǔn)，但遠(yuǎn)多于陰性對(duì)照組；各組412周骨改建時(shí)期影像學(xué)修復(fù)情況符合時(shí)間的線性函數(shù)關(guān)系；②組織學(xué)結(jié)果顯示，術(shù)后初期聯(lián)合用藥組和MGF24E組支架的組織相容性優(yōu)于RHBMP2組和陰性對(duì)照支架；組織學(xué)分析顯示聯(lián)合用藥組愈合情況最好，優(yōu)于RHBMP2組和MGF24E組，表現(xiàn)出聯(lián)合用藥的協(xié)同增效作用；各組組織學(xué)愈合情況滿足時(shí)間的對(duì)數(shù)函數(shù)關(guān)系；③生物力學(xué)試驗(yàn)結(jié)果顯示，雖然各用藥組缺損區(qū)重建組織骨質(zhì)連續(xù)，但其力學(xué)性能仍低于正常橈骨組織；各用藥組樣本剛度依次為聯(lián)合用藥組RHBMP2組MGF24E組，樣本彎曲強(qiáng)度剛度依次為聯(lián)合用藥組MGF24E組RHBMP2，組聯(lián)合用藥組在力學(xué)性能上表現(xiàn)出協(xié)同增效作用；④修復(fù)機(jī)制研究結(jié)果顯示，用藥組骨缺損愈合方式為軟骨內(nèi)成骨；MGF24E組能提早啟動(dòng)骨基質(zhì)合成和血運(yùn)恢復(fù)，因此含有MGF24E的聯(lián)合用藥組樣本新骨形成量多于RHBMP2組，但MGF24E的這種促進(jìn)作用主要體現(xiàn)在術(shù)后初期，隨著RHBMP2組樣本血運(yùn)的逐漸恢復(fù)，聯(lián)合用藥組和RHBMP2組間新骨形成差異逐漸減小。綜上所述，MGF24E既能顯著地促血管新生，又能在一定程度上促進(jìn)體內(nèi)成骨，因此MGF24ERHBMP2聯(lián)合用藥能使臨界骨缺損提早愈合，其修復(fù)質(zhì)量也優(yōu)于RHBMP2或MGF24E單給藥，表現(xiàn)出協(xié)同增效作用，并且聯(lián)合用藥能解決RHBMP2成骨異常問(wèn)題，為后續(xù)骨缺損修復(fù)的研究奠定了基礎(chǔ)。

簡(jiǎn)介：與鋼筋混凝土結(jié)構(gòu)相比，型鋼混凝土結(jié)構(gòu)具有承載力高、延性好的特點(diǎn)，因而在工程中得到了廣泛的應(yīng)用。然而，在強(qiáng)震作用下，梁端塑性鉸易誘發(fā)梁柱連接焊縫發(fā)生脆性斷裂，且滲透到節(jié)點(diǎn)核心區(qū)，從而大幅度地降低型鋼混凝土結(jié)構(gòu)的抗震性能。本文提出對(duì)梁端型鋼翼緣采取狗骨式削弱，將塑性鉸從梁端轉(zhuǎn)移到削弱部位，從而提高型鋼混凝土結(jié)構(gòu)的抗震性能，因而具有重要的理論意義和工程價(jià)值。本文系統(tǒng)地開(kāi)展了翼緣狗骨式削弱的型鋼混凝土框架結(jié)構(gòu)抗震性能的試驗(yàn)研究與理論分析，主要研究工作和創(chuàng)新成果包括以下三個(gè)方面1翼緣狗骨式削弱的型鋼混凝土框架梁柱節(jié)點(diǎn)抗震性能試驗(yàn)研究與理論分析。通過(guò)對(duì)7個(gè)足尺節(jié)點(diǎn)試件的低周反復(fù)荷載試驗(yàn)，研究了翼緣狗骨式削弱的型鋼混凝土框架梁柱節(jié)點(diǎn)在水平地震作用下的承載能力、延性、耗能能力以及恢復(fù)力特性；驗(yàn)證了在型鋼混凝土梁柱節(jié)點(diǎn)中采用翼緣狗骨式削弱和裝配整體式構(gòu)造的可靠性；分析了梁柱節(jié)點(diǎn)的破壞機(jī)理、損傷性能以及翼緣狗骨式削弱對(duì)節(jié)點(diǎn)受力性能的作用。結(jié)果表明翼緣狗骨式削弱的型鋼混凝土框架梁柱節(jié)點(diǎn)延性好，變形能力強(qiáng)，耗能能力高，因而具有良好的抗震性能。2翼緣狗骨式削弱的型鋼混凝土框架結(jié)構(gòu)抗震性能試驗(yàn)研究與理論分析。通過(guò)對(duì)一榀兩跨三層13比例的翼緣狗骨式削弱的型鋼混凝土框架結(jié)構(gòu)模型的低周反復(fù)荷載試驗(yàn)，研究了框架結(jié)構(gòu)在水平地震作用下的承載能力、延性、剛度退化、耗能能力、滯回特性、破壞機(jī)制以及翼緣狗骨式削弱對(duì)框架整體受力性能的作用；進(jìn)一步研究了型鋼混凝土框架結(jié)構(gòu)的抗震能力設(shè)計(jì)方法。結(jié)果表明，翼緣狗骨式削弱的型鋼混凝土框架結(jié)構(gòu)延性好，變形能力強(qiáng)，耗能能力和承載能力高，滿足一般延性框架的抗震性能要求。3翼緣狗骨式削弱的型鋼混凝土框架抗震性能的非線性有限元分析?；谛弯摶炷恋氖芰μ攸c(diǎn)，建立了適用于反復(fù)荷載作用下型鋼混凝土材料的本構(gòu)關(guān)系。在上述試驗(yàn)研究的基礎(chǔ)上，應(yīng)用分離模量理論，考慮材料非線性、幾何非線性和剛度退化等因素的影響，分析了在低周反復(fù)荷載作用下翼緣狗骨式削弱的型鋼混凝土框架梁柱節(jié)點(diǎn)的受力性能和結(jié)構(gòu)的滯回特性。分析結(jié)果與模型試驗(yàn)結(jié)果相比較，二者吻合較好，驗(yàn)證了基于分離模量理論的型鋼混凝土結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)方法的可行性和適用性。

簡(jiǎn)介：’I’●●河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)及知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸屬承諾‘’本學(xué)位論文在導(dǎo)師或指導(dǎo)小組的指導(dǎo)下，由本人獨(dú)立完成。本學(xué)位論文研究所獲得的研究成果，其知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)對(duì)本學(xué)位論文進(jìn)行交流、公開(kāi)和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文，第一署名單位為河北醫(yī)科大學(xué)，試驗(yàn)材料、原始數(shù)據(jù)、申報(bào)的專利等知識(shí)產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。否則，承擔(dān)相應(yīng)的法律責(zé)任。研究生簽名萄＆壓導(dǎo)師簽章級(jí)學(xué)院領(lǐng)導(dǎo)蓋章O，。年，厶月∥日河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標(biāo)注等內(nèi)容外，文中不包含其他人已『發(fā)表或撰寫的研究成果，指導(dǎo)教師對(duì)此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨(dú)立撰寫，文責(zé)自負(fù)?！裱芯可灻膶?dǎo)師簽章圣薏；煮己鄉(xiāng)日目錄中文摘要1英文摘要3研究論文磁共振全身彌散成像與核素全身骨顯像對(duì)骨轉(zhuǎn)移瘤診斷的比較研究前言5刖舌”一””一””一””一”“一””一””“”““””””””“一””“””5材料與方法5結(jié)果7附圖10附表13討念一一16結(jié)念一一一一一”一L8參考文獻(xiàn)19綜述一一21致射33個(gè)人簡(jiǎn)歷34

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多ELISA定量免疫組化技術(shù)在瘤源性骨軟化病中的應(yīng)用及非干預(yù)性危險(xiǎn)因素的循證醫(yī)學(xué)研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：目的通過(guò)觀察復(fù)陽(yáng)活骨丸配合髓芯減壓術(shù)對(duì)實(shí)驗(yàn)家兔激素性股骨頭壞死模型的血脂及病理的影響，探討其在治療激素性股骨頭缺血性壞死疾病方面的作用機(jī)制。方法將45只新西蘭成年健康大白兔，隨機(jī)數(shù)字表法抽取9只為空白對(duì)照組（正常組），剩余家兔肌注醋酸氫化潑尼松造模，造模6周后隨機(jī)處死5只兔子（正常組1只、造模組4只），在通過(guò)檢驗(yàn)證實(shí)動(dòng)物造模成功以后，把造模組隨機(jī)分為四組模型組（模型對(duì)照組，8只）、減壓組（髓芯減壓組，8只）、復(fù)陽(yáng)活骨丸組（中藥組，8只），復(fù)陽(yáng)活骨丸并髓芯減壓組（中藥并減壓組，8只）。然后正常組和模型組每天灌服生理鹽水20ML；中藥組給予復(fù)陽(yáng)活骨丸（48GKGD）灌胃；減壓組向股骨頭內(nèi)部穿刺鉆孔減壓；中藥并減壓組給予鉆孔減壓以后給予灌服相同量的復(fù)陽(yáng)活骨丸。在造模成功及治療6周后采血測(cè)血脂并觀察股骨頭病理切片。結(jié)果①體重經(jīng)測(cè)量在造模成功后模型組家兔體重均低于正常組，經(jīng)治療6周后減壓組體重有所上升，中藥組體重亦有增加，中藥并減壓組體重增長(zhǎng)較為明顯。②組織和病理學(xué)觀察模型組可見(jiàn)微小且稀疏的骨小梁，增長(zhǎng)、變大的骨髓腔脂肪細(xì)胞，減壓組、中藥組、中藥組并減壓組和模型組相比較輕，中藥并減壓組病理近似于正常。③血脂檢測(cè)模型組血清總膽固醇和甘油三酯和正常組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P結(jié)論此次實(shí)驗(yàn)又一次證明激素的大量應(yīng)用是引起家兔出現(xiàn)股骨頭缺血性壞死的的原因之一；復(fù)陽(yáng)活骨丸配合髓芯減壓術(shù)治療股骨頭缺血性壞死可能通過(guò)降低血清總膽固醇和甘油三酯發(fā)揮作用。