阿替普酶對(duì)急性腦梗死大鼠超時(shí)間窗靜脈溶栓的療效評(píng)價(jià).pdf

1、背景
　　腦梗死是世界范圍內(nèi)最常見(jiàn)的致死疾病，也是成人殘疾的首位原因。其中，急性缺血性腦梗死約占1/3～1/4。因此積極治療急性缺血性腦梗死，是我們面臨的重要問(wèn)題。早期及時(shí)的溶栓治療可以使堵塞的腦血管再通，恢復(fù)局部腦組織的血液灌流，減少梗死體積、改善其神經(jīng)功能缺損，是目前治療急性腦梗死的唯一有效手段。
　　阿替普酶（r-tPA）是美國(guó)FDA唯一認(rèn)可的作為急性缺血性腦梗死早期溶栓治療的藥物，其安全有效的靜脈使用時(shí)間為急性缺血性

2、腦卒中后4.5h內(nèi)。然而急性缺血性腦梗死4.5h后應(yīng)用r-tPA的有效性及安全性如何？目前仍有爭(zhēng)議。近年來(lái)，大量研究通過(guò)磁共振成像技術(shù)發(fā)現(xiàn)，DWI序列和PWI序列的不匹配區(qū)域可以代表缺血半暗帶，并提出在急性腦梗死癥狀出現(xiàn)后3-9h應(yīng)用r-tPA靜脈溶栓（超時(shí)間窗溶栓）仍可獲益。但超時(shí)間窗溶栓是通過(guò)何種機(jī)制獲益？以及獲益的程度是多少？目前尚無(wú)定論。
　　目的
　　本研究應(yīng)用SD大鼠建立大鼠血栓性大腦中動(dòng)脈栓塞模型，通過(guò)計(jì)算腦組

3、織梗死面積、微血管密度和檢測(cè)炎癥因子ICAM-1、VCAM-1表達(dá)的變化，探究超時(shí)間窗r-tPA靜脈溶栓的效果，并研究其機(jī)制。
　　方法
　　1.動(dòng)物模型:216只健康成年SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、梗死組、4.5h溶栓組和6h溶栓組，4.5h溶栓組和6h溶栓組分別于血栓性MCAO模型建立后4.5h、6h給予r-tPA。梗死組、4.5h溶栓組和6h溶栓組分為3個(gè)亞組，分別于梗死后1、3、7d處死取腦。對(duì)照組大鼠手術(shù)操作方法同模型

4、組，只注射生理鹽水，于對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)處死取腦。
　　2.TTC染色:通過(guò)TTC染色觀察腦梗死體積，梗死組織為白色，非梗死區(qū)域?yàn)榧t色，使用圖像分析軟件計(jì)算腦梗死體積。
　　3.免疫組織化學(xué)二步法:使用CD34抗體標(biāo)記血管，觀察各組在不同時(shí)間點(diǎn)(1、3、7d)腦梗死組織周?chē)⒀埽⒂?jì)算微血管密度。
　　4.實(shí)時(shí)定量PCR:檢測(cè)各組腦組織梗死周?chē)M織不同時(shí)間點(diǎn)(1、3、7d)ICAM-1、VCAM-1mRNA的表達(dá)
　　

5、結(jié)果
　　1.各時(shí)間點(diǎn)(1、3、7d)4.5h溶栓組和6h溶栓組腦梗死體積較梗死組均明顯縮?。≒均＜0.01）。6h溶栓組腦梗死體積在3個(gè)時(shí)間點(diǎn)較4.5h溶栓組體積均增大(P＜0.05);對(duì)照組大鼠未發(fā)現(xiàn)梗死灶。
　　2.腦梗死3d，4.5h溶栓組和6h溶栓組微血管密度(MVD)表達(dá)較梗死組均增加（P均＜0.05），7d時(shí)，4.5h溶栓組和6h溶栓組MVD表達(dá)較梗死組增加更為明顯（P均＜0.01）。隨病程進(jìn)展，4.5h溶栓組

6、和6h溶栓組MVD逐步增加，7d較3d時(shí)增加明顯(P＜0.05)，但兩溶栓組之間比較，在1、3、7dMVD無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05);對(duì)照組和梗死組MVD無(wú)明顯改變。
　　3.腦梗死后ICAM-1、VCAM-1mRNA表達(dá)量與對(duì)照組相比，1d時(shí)開(kāi)始升高(P＜0.01)，3d達(dá)高峰(P＜0.01)，7d仍高于對(duì)照組(P＜0.01)，4.5h溶栓組和6h溶栓組各時(shí)間點(diǎn)ICAM-1、VCAM-1mRNA表達(dá)量均較梗死組明顯降低(P