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文檔簡介
1、目的:
研究miR-181a/b通過血清反應(yīng)因子(SRF,serum response factor)對血管平滑肌細胞向合成型表型轉(zhuǎn)化及細胞增殖遷移能力的調(diào)控作用。
方法:
將miR-181a/b瞬時轉(zhuǎn)染至人主動脈平滑肌細胞(HAoSMCs)中,用實時定量PCR、CCK-8檢測方法和transwell實驗分別檢測平滑肌細胞的表型標記基因的表達水平、細胞增殖能力和遷移能力的變化。生物信息學(xué)分析預(yù)測miR-18
2、1a/b直接靶向血清反應(yīng)因子的3’UTR(非編碼區(qū)),并通過實時定量PCR、western blot及雙熒光素酶報告系統(tǒng)分別驗證。
結(jié)果:
實時定量PCR結(jié)果表示在HAoSMCs中過表達miR-181a/b能夠抑制收縮表型標記基因的表達,促進合成表型標記基因的表達,CCK-8與transwell實驗結(jié)果表明miR-181a/b增強細胞的增殖和遷移能力。雙熒光素酶報告系統(tǒng)與western blot結(jié)果表明MiR-181
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