固本防哮飲對哮喘易感基因ORMDL3以及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子1的影響.pdf

1、目的:探討中藥復(fù)方固本防哮飲對哮喘易感基因血清類粘蛋白1樣蛋白3（orosomucoid1-like protein3，ORMDL3）以及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子1（signal transducer and activator of transcription1，STAT1）的調(diào)控作用，進(jìn)一步揭示固本防哮飲防治哮喘的機(jī)制。
　　方法:體外培養(yǎng)人支氣管上皮細(xì)胞(human bronchial epithelial cells，16H

2、BE)，分為正常組、模型組、固本防哮飲組及孟魯司特鈉組，利用白介素-4(interleukin-4，IL-4)誘導(dǎo)16HBE構(gòu)建哮喘細(xì)胞模型，并分別予空白血清及含藥血清進(jìn)行干預(yù);運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量-PCR(Real-time PCR)、免疫印跡法(Western blotting，WB)、免疫熒光法(immunofluorescence，IF)從基因、蛋白水平檢測16HBE細(xì)胞ORMDL3、STAT1的表達(dá)及蛋白亞細(xì)胞定位。
　　結(jié)

3、果:ORMDL3蛋白主要表達(dá)于16HBE細(xì)胞胞質(zhì)中表達(dá)，STAT1蛋白可表達(dá)于16HBE細(xì)胞胞質(zhì)及胞核內(nèi);WB結(jié)果顯示，與正常組比較，模型組ORMDL3、STAT1蛋白表達(dá)顯著增加(P＜0.05，P＜0.01);與模型組比較，固本防哮飲組ORMDL3及STAT1蛋白表達(dá)均顯著下降(P＜0.05);PCR結(jié)果顯示，與正常組比較，模型組ORMDL3、STAT1 mRNA含量升高，但二者無顯著性差異(P＞0.05)，固本防哮飲組較模型組細(xì)胞中