桃紅四物湯對(duì)魚(yú)藤酮誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制研究.pdf

1、帕金森病(Parkinson disease，PD)又稱震顫麻痹，是錐體外系功能紊亂引起的一種慢性中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，病理上主要表現(xiàn)為腦和（或）脊髓發(fā)生神經(jīng)元退行性變性、脫失，并伴有神經(jīng)細(xì)胞大量死亡。迄今為止，該病的發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明。有研究表明氧化應(yīng)激與PD密切相關(guān)。
　　桃紅四物湯(Taohongsiwu Decoction，THSWT)是活血化瘀、養(yǎng)血補(bǔ)血的代表方，在臨床上有非常廣泛的應(yīng)用，常用于血瘀引起的多種病癥。近

2、年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，桃紅四物湯及主要成分在抗氧化損傷、神經(jīng)保護(hù)等方面能夠發(fā)揮很好的效果。
　　本實(shí)驗(yàn)利用魚(yú)藤酮誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞損傷模型進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)研究。待細(xì)胞貼壁達(dá)70-80％時(shí)，通過(guò)MTT法依次進(jìn)行魚(yú)藤酮損傷模型的建立、桃紅四物湯及主要成分（羥基紅花黃色素A、阿魏酸、苦杏仁苷、梓醇和芍藥苷）安全濃度范圍篩選和發(fā)揮保護(hù)作用時(shí)的濃度篩選;利用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)變化;通過(guò)Elisa實(shí)驗(yàn)比較細(xì)胞損傷前后α-synuclein寡聚體

3、形成情況;通過(guò)JC-1線粒體膜電位檢測(cè)評(píng)價(jià)藥物干預(yù)前后線粒體膜電位的變化。此外，通過(guò)western blot實(shí)驗(yàn)比較給藥干預(yù)前后Bax、bcl-2、ERK1/2、p-ERK、caspase-3、p53等氧化應(yīng)激、細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)水平的變化，初步探討桃紅四物湯及其有效成分發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用的機(jī)制。
　　結(jié)果顯示，在安全劑量范圍內(nèi)，桃紅四物湯及羥基紅花黃色素A、梓醇和芍藥苷等成分均可以提高魚(yú)藤酮損傷的SH-SY5Y細(xì)胞活力(P＜0.

4、01)，且呈劑量依賴性增加。倒置顯微鏡下觀察到細(xì)胞變圓，突觸短而少。在魚(yú)藤酮誘導(dǎo)的PD模型中，α-synuclein寡聚體形成顯著增多(P＜0.001)，而桃紅四物湯可以抑制α-synuclein寡聚體形成(P＜0.05)。桃紅四物湯及羥基紅花黃色素A、阿魏酸、苦杏仁苷、梓醇和芍藥苷等可以逆轉(zhuǎn)魚(yú)藤酮導(dǎo)致的△Ψ下降的現(xiàn)象。Western blot結(jié)果顯示桃紅四物湯、羥基紅花黃色素A和芍藥苷等能夠下調(diào)Bax/Bcl-2、caspase-3、