枸杞活性物質(zhì)提取及其生物活性研究.pdf

1、枸杞子是茄科植物枸杞(Lycium barbartum L.)的干燥成熟果實(shí)，不僅是我國傳統(tǒng)的名貴中藥材，也是我國首批被批準(zhǔn)為藥食同源的產(chǎn)品之一，已有2000多年的食用、藥用歷史，近幾年已經(jīng)成為享譽(yù)海內(nèi)外的滋補(bǔ)食療珍品。其味甘，性平，有滋補(bǔ)肝腎，益精明目的功效和調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力、延緩衰老、抗脂肪肝等功能，被歷版的《中國藥典》所收載。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)、營養(yǎng)學(xué)和藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)枸杞子中含有人體所需的多糖、氨基酸、維生素、微量元素等，被廣泛用于抗衰老、抗

2、腫瘤及抗心血管疾病等，具有極高的藥用價(jià)值和營養(yǎng)價(jià)值。文獻(xiàn)報(bào)道蘆丁、槲皮素、芹菜素、木犀草素和山奈酚等是抗氧化、提高免疫力和抗腫瘤的常見枸杞黃酮成分。本研究選擇寧夏產(chǎn)枸杞為原料提取其中的活性物質(zhì)多糖和黃酮，為其進(jìn)一步的開發(fā)利用提供理論依據(jù)。主要研究內(nèi)容及結(jié)果如下：
　　1．采用顯色反應(yīng)和可見光譜法對(duì)經(jīng)高速剪切制得的枸杞多糖（LBP）含量進(jìn)行測定。建立高速剪切技術(shù)（High-speed Shear Dispersing Emulsif

3、ier,HSDE）輔助提取LBP的優(yōu)化工藝。通過單因素和正交試驗(yàn)，分別考察剪切時(shí)間、剪切速率、料液比及提取時(shí)間對(duì)LBP提取率的影響。以LBP提取率為指標(biāo)，優(yōu)化得最佳提取條件為：以水為提取溶劑，提取溫度60℃，剪切時(shí)間2min，剪切速率12000rpm，料液比1:12，提取時(shí)間為2h，提取1次。進(jìn)一步優(yōu)化其醇沉工藝，得最佳條件為：原料:提取液比例1:2，醇沉濃度60%，醇沉?xí)r間2h。在最佳條件下LBP的提取率和產(chǎn)品純度分別為36.19%和

4、48.61%。
　　2.利用大孔吸附樹脂分離純化枸杞黃酮的研究。本實(shí)驗(yàn)通過高效液相色譜法，測定本實(shí)驗(yàn)中的枸杞黃酮成分為蘆丁和楊梅素。根據(jù)這幾種枸杞黃酮的分子尺寸和分子極性，通過計(jì)算，選出10種性質(zhì)相關(guān)的大孔樹脂（BSKB-1、BSKC-1、AUKJ-1、BWKS-1……），通過靜態(tài)吸附、解吸附實(shí)驗(yàn)測定，從中優(yōu)選出2種效果顯著的大孔樹脂（BWKX-1、AUKJ-1）。制備這2種樹脂的混合模擬床并繼續(xù)通過靜態(tài)吸附、解吸附實(shí)驗(yàn)，優(yōu)選出其

5、最佳混合比例為2:1。再通過混合樹脂的動(dòng)態(tài)吸附、解吸附實(shí)驗(yàn)得最佳條件為：枸杞黃酮濃度600g·L-1，流速10BV·h-1，所選洗脫劑為60%乙醇，洗脫流速為15BV·h-1。在上述最優(yōu)條件下，樣品中蘆丁含量由0.06%提高至0.21%，楊梅素含量由0.08%提高至0.23%。本實(shí)驗(yàn)優(yōu)化了枸杞黃酮的分離純化效果，也提高了其分離純化效率。
　　3.利用原子熒光、體外化學(xué)反應(yīng)等分析技術(shù)測定硒化枸杞多糖的硒含量，進(jìn)行響應(yīng)面試驗(yàn)分析優(yōu)化枸

6、杞多糖的硒化工藝，再對(duì)枸杞硒多糖的抗腫瘤活性進(jìn)行研究。枸杞多糖硒化的最佳條件為：按照LBP為1g計(jì)算，加入0.62g Na2SeO3，用1%HNO3充分溶解，再加入BaCl21g，用油浴鍋74℃反應(yīng)9h。反應(yīng)完成后，利用飽和Na2CO3溶液調(diào)節(jié)pH至5-6，Na2SO3溶液充分沉淀Ba2+，離心取上清液，用1kDa透析袋自來水透析2d，蒸餾水透析1d，濃縮干燥。在此優(yōu)化的提取條件下，枸杞硒化多糖的硒含量為648.65μg·g-1。在此基