“三子養(yǎng)親湯”對大鼠哮喘模型嗜酸性粒細胞趨化因子(EOT-1、EOT-3)表達水平影響的研究.pdf

1、實驗目的：觀察三子養(yǎng)親湯對哮喘大鼠嗜酸性粒細胞趨化因子（Eotaxin，Eot-1、Eot-3）表達水平的影響，從藥效學水平探討三子養(yǎng)親湯改善哮喘癥狀的作用機制。
　　實驗方法：將60只Wistar雄性大鼠隨機分成6組，每組各10只，分別為空白對照組、哮喘模型組、三子養(yǎng)親湯低劑量組（SZ-L）、中劑量組（SZ-M）、高劑量組（SZ-H）、孟魯司特組（MLS）。分為致敏和激發(fā)兩個階段，除空白對照組外，其他五個組大鼠在第1天和第14天

2、腹腔注射卵蛋白（OVA）致敏；模型組及各治療組連續(xù)霧化吸入1％卵蛋白生理鹽水激發(fā)14天（1次/天，每次30min），以此來建立哮喘模型。空白對照組以等量生理鹽水代替OVA致敏和激發(fā)。各組大鼠從激發(fā)第一天開始給予灌胃，灌胃時間在每次激發(fā)前1小時，根據(jù)分組不同來灌胃。實驗過程中特別是激發(fā)階段注意觀察大鼠行為學改變。各組大鼠經(jīng)末次激發(fā)24h后，采集血清及肺組織標本。并對肺組織進行HE染色，觀察肺組織病理學改變。采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）

3、檢測大鼠血清中的Eot-1蛋白、Eot-3蛋白的含量，運用RT-PCR技術檢測大鼠肺組織的Eot-1mRNA、Eot-3mRNA表達水平。
　　實驗結果：（1）大鼠病理學表現(xiàn)：與空白對照組比較，模型組大鼠細支氣管形態(tài)不規(guī)則，見較多的炎性細胞浸潤，管壁增厚，肺外觀體積增大，表面略腫脹，有不規(guī)則暗紅色充血區(qū)，說明哮喘模型建立成功。孟魯司特組和三子養(yǎng)親湯各劑量組大鼠肺組織表現(xiàn)：細支氣管形態(tài)規(guī)則，偶見炎性細胞浸潤，管腔內見較少分泌物，上皮

4、完整，體積無明顯變化，表面充血區(qū)及出血點有明顯吸收的痕跡，面積明顯小于哮喘組，出血點數(shù)量也明顯減少。（2）大鼠血清Eot-1蛋白、Eot-3蛋白含量：①與空白對照組比較，模型組大鼠血清Eot-1蛋白、Eot-3蛋白的含量明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；②與模型組比較，各治療組大鼠血清Eot-1蛋白、Eot-3蛋白的含量低于模型組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；③與孟魯司特組比較，三子養(yǎng)親湯高劑量組大鼠血清Eot-1蛋白、

5、Eot-3蛋白的含量差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；④三子養(yǎng)親湯各劑量組組間比較，高劑量組大鼠血清Eot-1蛋白、Eot-3蛋白的含量低于中、低劑量，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。⑤三子養(yǎng)親湯低劑量組與中劑量組無明顯差異（P＞0.05）。（3）大鼠肺組織Eot-1mRNA、Eot-3mRNA的表達：①與空白對照組比較，模型組大鼠血清Eot-1mRNA、Eot-3mRNA的表達明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；②與模型組比

6、較，各治療組大鼠肺組織Eot-1mRNA、Eot-3mRNA的表達低于模型組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；③與孟魯司特組比較，三子養(yǎng)親湯高劑量組大鼠肺組織Eot-1mRNA、Eot-3mRNA的表達差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；④三子養(yǎng)親湯各劑量組組間比較，高劑量組大鼠血清Eot-1mRNA、Eot-3mRNA的表達低于中、低劑量，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。⑤三子養(yǎng)親湯低劑量組與中劑量組無明顯差異（P＞0.05）。