姜黃素聯(lián)合白藜蘆醇對人頭頸部腫瘤細(xì)胞系增殖和凋亡的影響機(jī)制研究.pdf

1、目的:從姜黃素和白藜蘆醇對凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響的角度探討其對人頭頸部腫瘤細(xì)胞系增殖和凋亡的影響機(jī)制。
　　方法:用姜黃素聯(lián)合白藜蘆醇聯(lián)合處理Hep2（人喉癌上皮細(xì)胞）和Fadu（人下咽鱗癌細(xì)胞），采用MTT（噻唑藍(lán)）比色法檢測細(xì)胞存活率，平板克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測單個(gè)細(xì)胞集落形成能力，Hoechst33258染色檢測細(xì)胞凋亡情況，Westernblot檢測Bax和Bcl-2蛋白表達(dá)水平，同時(shí)應(yīng)用Real-time PCR法檢測Bax和

2、Bcl-2mRNA表達(dá)水平。
　　結(jié)果:
　　1.姜黃素和白藜蘆醇可抑制Hep2細(xì)胞和Fadu細(xì)胞的存活率。
　　在Hep2細(xì)胞和Fadu細(xì)胞中，不同濃度的姜黃素和白藜蘆醇可使細(xì)胞存活率降低，并有劑量效應(yīng);當(dāng)20μM的白藜蘆醇與不同濃度姜黃素聯(lián)合處理時(shí)，Hep2細(xì)胞和Fadu細(xì)胞的存活率顯著降低。
　　2.姜黃素和白藜蘆醇可抑制Hep2細(xì)胞和Fadu細(xì)胞的集落形成。
　　與空白對照相比，10μM的姜黃素和2

3、0μM的白藜蘆醇均可抑制Hep2和Fadu細(xì)胞集落的形成;10μM姜黃素和20μM白藜蘆醇聯(lián)合處理24小時(shí)后，Hep-2細(xì)胞和Fadu細(xì)胞集落形成率顯著降低。
　　3.姜黃素和白藜蘆醇促進(jìn)Hep2細(xì)胞和Fadu細(xì)胞的凋亡。
　　與空白對照相比，10μM的姜黃素和20μM的白藜蘆醇均可促進(jìn)Hep2細(xì)胞和Fadu細(xì)胞的凋亡;10μM姜黃素和20μM白藜蘆醇聯(lián)合處理細(xì)胞24小時(shí)后，Hep2細(xì)胞和Fadu細(xì)胞的凋亡率明顯增加。

4、>　　4.姜黃素和白藜蘆醇促進(jìn)Hep2細(xì)胞和Fadu細(xì)胞中Bax的表達(dá)，抑制Bcl-2的表達(dá)。
　　10μM的姜黃素和20μM白藜蘆醇可以促進(jìn)Hep2細(xì)胞和Fadu細(xì)胞中促凋亡蛋白Bax的表達(dá)，同時(shí)下調(diào)抗凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá);10μM姜黃素和20μM白藜蘆醇聯(lián)合處理后，Bax的蛋白表達(dá)水平和mRNA表達(dá)水平均顯著增加，而Bcl-2的蛋白表達(dá)水平和mRNA表達(dá)水平均顯著降低。
　　結(jié)論:姜黃素與白藜蘆醇聯(lián)合處理可降低Hep