白藜蘆醇對(duì)人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系A(chǔ)N3CA增殖、凋亡、遷移的影響及其機(jī)制初步研究.pdf

1、目的：研究白藜蘆醇（resveratrol，Res）對(duì)體外培養(yǎng)人子宮內(nèi)膜癌AN3CA 細(xì)胞的增殖、凋亡和遷移的作用及其可能存在的機(jī)制進(jìn)行初步探討。
　　 方法：將不同濃度Res（0、12.5、25、50、100、200μmol/l）作用于AN3CA 細(xì)胞不同時(shí)間（12、24、48、72h），應(yīng)用MTT 法檢測(cè)Res 對(duì)細(xì)胞增殖的影響；應(yīng)用倒置相差顯微鏡觀察Res 作用后細(xì)胞形態(tài)學(xué)的改變；應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)分析Res 對(duì)細(xì)胞周期分

2、布和凋亡的影響；應(yīng)用細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)Res 對(duì)細(xì)胞遷移的影響；應(yīng)用熒光實(shí)時(shí)定量PCR 檢測(cè)Res 處理細(xì)胞后Bcl-2、Bax 和MMP-9 mRNA 的表達(dá)水平；應(yīng)用Western Blot 法檢測(cè)Res 處理細(xì)胞后PCNA、Bcl-2、Bax、ERK1/2 和p-ERK1/2蛋白表達(dá)水平。
　　 結(jié)果：⑴Res 能明顯抑制AN3CA 細(xì)胞增殖，并隨著藥物濃度升高和作用時(shí)間的延長(zhǎng)而抑制作用增強(qiáng)，呈時(shí)間-劑量依賴性。⑵倒置相差顯

3、微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)Res 處理組細(xì)胞生長(zhǎng)明顯受到抑制，細(xì)胞形態(tài)變圓，胞漿內(nèi)顆粒增多增粗。⑶不同濃度Res 處理AN3CA 細(xì)胞，隨著藥物濃度升高G0/G1 期比例顯著增加從45.374±1.089％上升至72.486％±2.123％，同時(shí)伴隨S 期細(xì)胞數(shù)的減少（P <0.01）；細(xì)胞凋亡率從2.42±0.635％上升至30.96％±2.041％（P <0.01），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。⑷細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)顯微鏡下顯示Res 使AN3CA 細(xì)胞遷移運(yùn)動(dòng)

4、力減弱。⑸與對(duì)照組比較，Res 能夠下調(diào)Bcl-2 的mRNA 表達(dá)，上調(diào)Bax 的mRNA 表達(dá)，而MMP-9 的mRNA 表達(dá)未見(jiàn)改變。⑹Res 能夠增加Bax 的蛋白表達(dá)，抑制PCNA，Bcl-2 和p-ERK 在蛋白水平的表達(dá)；在短時(shí)間內(nèi)（0.5-1h），100μmol/l Res 能夠激活ERK1/2 的磷酸化表達(dá)但隨著作用時(shí)間延長(zhǎng)（4-48h）其表現(xiàn)為抑制效應(yīng)。
　　 結(jié)論：Res 能夠抑制AN3CA 細(xì)胞增殖、遷移