白藜蘆醇對人卵巢癌SKOV-3細(xì)胞增殖與凋亡的影響及機制研究.pdf

1、目的：通過觀察白藜蘆醇對體外培養(yǎng)的人卵巢癌SKOV-3細(xì)胞增殖的抑制及誘導(dǎo)凋亡作用，初步探討白藜蘆醇抑制卵巢癌細(xì)胞生長的可能機制，為白藜蘆醇臨床治療卵巢癌提供實驗和理論依據(jù)。
　　方法：人卵巢癌細(xì)胞株SKOV-3細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)于含10％胎牛血清、100U/ml青霉素和100μg/ml鏈霉素的RPMI1640培養(yǎng)液中，在37℃、5％CO2及飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。實驗分兩組，即實驗組(加入10μmol/L、20μmol/L、40μmol

2、/L及80μmol/L白藜蘆醇)和對照組(未加入白藜蘆醇)。MTT法檢測不同濃度白藜蘆醇處理SKOV-3細(xì)胞24h、48h和72h后，對SKOV-3細(xì)胞增殖的影響；AnnexinV-FITC/PI雙染檢測不同濃度白藜蘆醇處理SKOV-3細(xì)胞48h后的凋亡率；RT-PCR和Western blot法測定白藜蘆醇處理SKOV-3細(xì)胞48h后VEGF基因轉(zhuǎn)錄和蛋白的表達變化。
　　結(jié)果：MTT結(jié)果顯示不同濃度的白藜蘆醇作用于SKOV-3

3、細(xì)胞不同時間后，細(xì)胞增殖受到顯著抑制，與對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。10μmol/L，濃度組在24h后出現(xiàn)抑制作用，隨著白藜蘆醇濃度的增大其抑制效果明顯增強，呈濃度時間依賴關(guān)系(r=0.765，P<0.01；r=0.528，P<0.01)。FCM檢測結(jié)果顯示不同濃度白藜蘆醇處理SKOV-3細(xì)胞后能誘導(dǎo)其凋亡，80μmol/L濃度組凋亡率為50.37±1.05％，與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。RT-PCR檢

4、測結(jié)果顯示白藜蘆醇作用SKOV-3細(xì)胞48h后VEGF mRNA表達顯著下調(diào)(P<0.05)。Western blot檢測結(jié)果顯示白藜蘆醇作用SKOV-3細(xì)胞48h后，VEGF蛋白表達顯著下調(diào)(P<0.05)。
　　結(jié)論：1.白藜蘆醇可顯著抑制體外培養(yǎng)的人卵巢癌SKOV-3細(xì)胞增殖，該抑制作用具有濃度時間依賴性。2.白藜蘆醇能誘導(dǎo)體外培養(yǎng)的人卵巢癌SKOV-3細(xì)胞凋亡。3.白藜蘆醇對SKOV-3細(xì)胞抑制增殖和誘導(dǎo)凋亡的作用可能與下