2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、埃博霉素是粘細(xì)菌纖維堆囊菌產(chǎn)生的具有抗癌作用的16元大環(huán)內(nèi)酯類抗生素,作用機(jī)理與紫杉醇類似,但其由于水溶性好,分子結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,副作用小并且抗腫瘤譜廣而備受研究者關(guān)注。目前已有商品化埃博霉素上市并應(yīng)用于臨床治療中,但由于微生物發(fā)酵生產(chǎn)的產(chǎn)量低,大大限制了它的工業(yè)化推廣。因此提高埃博霉素產(chǎn)量具有重要的理論意義和社會(huì)價(jià)值。丙酮酸激酶是糖酵解途徑中最后一個(gè)關(guān)鍵酶,催化磷酸烯醇式丙酮酸生成丙酮酸,其催化產(chǎn)物丙酮酸是埃博霉素生物合成中重要的前體的之一

2、。本論文對(duì)糖酵解途徑的關(guān)鍵酶丙酮酸激酶(PK)與埃博霉素合成的相互關(guān)系進(jìn)行分析研究。
  由于纖維堆囊菌本身基因組比較復(fù)雜,遺傳背景不清晰,因此國(guó)內(nèi)外對(duì)其尚無有效的基因敲除,質(zhì)粒構(gòu)建手段。在本論文工作中,我們采用了添加PK酶專一性抑制劑(維生素K3,VK3)和激活劑(果糖-1,6-二磷酸,F(xiàn)BP)的方法對(duì)丙酮酸激酶進(jìn)行分析。考察其在不同生長(zhǎng)條件(對(duì)照組,VK3,F(xiàn)BP)下,丙酮酸激酶酶活、菌體生長(zhǎng)情況、pH值及還原糖含量變化趨勢(shì)和

3、埃博霉素產(chǎn)量之間的關(guān)系。結(jié)果顯示在適當(dāng)濃度下,效應(yīng)劑可以在不影響初級(jí)代謝的情況下,對(duì)丙酮酸激酶酶活性及埃博霉素合成能力產(chǎn)生明顯影響。隨后我們從RNA層面對(duì)PK的轉(zhuǎn)錄情況進(jìn)行了分析。在Sorangium cellulosum So2161中,編碼丙酮酸激酶的基因有兩段,分別是pyksce5197和pyksce4540。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,S.cellulosum So2161中pyksce4540和TE基因的表達(dá),在VK3生長(zhǎng)條件下它們受到了明

4、顯抑制作用,而在FBP件下其受到了明顯的促進(jìn)作用,但是pyk sce5197表達(dá)沒有受到影響。這也可能解釋了添加抑制劑VK3或激活劑FBP后埃博霉素產(chǎn)量發(fā)生明顯變化但是菌體生長(zhǎng)沒有受到影響。結(jié)果表明在S.cellulosum So2161中,丙酮酸激酶是埃博霉素合成的關(guān)鍵酶之一。我們認(rèn)為丙酮酸激酶在埃博霉素合成過程中可能發(fā)揮重要的作用,同時(shí)pyk sce5197是細(xì)胞生長(zhǎng)的關(guān)鍵酶,pyk sce4540在埃博霉素生物合成中發(fā)揮重要作用。

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