多殺菌素產生菌菌種選育及原生質體制備.pdf

1、多殺菌素(spinosad)是由放線菌刺糖多孢菌(Saccharoplyspora spinosa)產生的新型大環(huán)內酯類化合物，是一種綠色廣譜殺蟲劑，兼具生物農藥的安全性和化學農藥的快速效果。多殺菌素具有，以獲得高產菌株。以多殺菌素產生菌S. spinosa 5-11為出發(fā)菌株，經紫外線誘變處理后，在含不同濃度的多殺菌素梯度平板上篩選多殺菌素抗性菌株，經搖瓶發(fā)酵篩選得到一高產變異株107-2，其產量較出發(fā)菌株增加59.1％。將變株S.s

2、pinosa 107-2在3L發(fā)酵罐上進行發(fā)酵試驗，其產量達到453mg/L。 考察了葡萄糖及無機磷酸鹽對刺糖多孢菌菌體生長及多殺菌素產量的影響。研究結果表明：在多殺菌素發(fā)酵過程中，葡萄糖濃度的提高(18.6～58.8g/L)促進了菌體的生長，多殺菌素效價增加；葡萄糖濃度的進一步提高(58.8～79.6g/L)，菌體生長保持相對穩(wěn)定，效價緩慢下降；葡萄糖濃度增加到115.3 g/L，菌體生長受到明顯抑制，效價大幅下降。磷酸鹽濃度

3、的提高(3.68～29.41mmol/L)菌體密度和多殺菌素效價增加，磷酸鹽濃度的進一步提高(29.41～44.12 mmol/L)，菌體濃度緩慢增加，多殺菌素效價降低；當磷酸鹽濃度增至57.62 mmol/L，菌體密度和多殺菌素效價均明顯下降。因此，在磷酸鹽濃度為29.41 mmol/L，葡萄糖濃度為58.8g/L條件下的發(fā)酵過程中，多殺菌素產量最高。將出發(fā)菌株S. spinosa107-2在5L發(fā)酵罐上進行發(fā)酵試驗，培養(yǎng)基中葡萄糖濃