TK基因突變?cè)囼?yàn)——三種人類淋巴母細(xì)胞的比較及兩類突變集落形成的機(jī)理研究.pdf

1、四川大學(xué)博士學(xué)位論文TK基因突變?cè)囼?yàn)——三種人類淋巴母細(xì)胞的比較及兩類突變集落形成的機(jī)理研究姓名：帥培強(qiáng)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：營(yíng)養(yǎng)與食品衛(wèi)生學(xué)指導(dǎo)教師：張立實(shí)20050507四川大學(xué)博士學(xué)位論文集落主要源于小的突變，如點(diǎn)突變，移碼突變，而小集落主要由于大的片斷丟失，影響到了一些與生長(zhǎng)相關(guān)的基因。有學(xué)者提出可以根據(jù)小集落比例判斷誘變物的類型，但是也有學(xué)者對(duì)此持反對(duì)意見，至今尚無定論。本研究的目的是優(yōu)選一種相對(duì)最佳的人類淋巴母細(xì)胞應(yīng)用于T

2、 K 基因突變?cè)囼?yàn)系統(tǒng)，并從多個(gè)方面探討正常生長(zhǎng)和緩慢生長(zhǎng)集落的形成機(jī)制，為T K 基因突變?cè)囼?yàn)的推廣積累更多資料。本課題分為以下三部分：第一部分：T K 6 - E 6 細(xì)胞在T K 基因突變系統(tǒng)中的應(yīng)用。目的是為了評(píng)價(jià)該細(xì)胞系應(yīng)用于T K 基因突變?cè)囼?yàn)的優(yōu)劣。結(jié)果顯示，T K 6 - E 6 細(xì)胞在本實(shí)驗(yàn)室條件下測(cè)得的倍增時(shí)間為1 6 ．0 3 _ + 0 ．6 1 h ，自發(fā)突變頻率為2 9 ．9 ±5 ．4 7 x 1

3、 0 。6 ，平板接種效率為6 3 ．8 奎4 ．6 ％，突變頻率測(cè)定的平板的最適接種細(xì)胞量為t o o o o ／孔，陽性對(duì)照M M S 的適宜濃度為1 ．2 5 1 ^ g ／m l 。用T K 6 - E 6 細(xì)胞作為T K 基因突變?cè)囼?yàn)的靶細(xì)胞檢測(cè)三種常規(guī)誘變劑( M M S 、M M C 、N 齜) 和一種非誘變劑( K C l ) ，結(jié)果表明三種誘變劑均為明顯陽性反應(yīng)，而K C I 為陰性結(jié)果。提示T K 6 - E 6 細(xì)

4、胞作為T K 基醫(yī)突變?cè)囼?yàn)的靶細(xì)胞有較好的應(yīng)用前景。第二部分：W T K l 、T K 6 和T K 6 - E 6 三種人類淋巴母細(xì)胞在T K 基因突變?cè)囼?yàn)中的應(yīng)用比較。目的是為了選擇一種相對(duì)最優(yōu)的人類淋巴母細(xì)胞，為將其推廣應(yīng)用于T K 基因突變?cè)囼?yàn)系統(tǒng)積累資料。方法是使用這三種細(xì)胞檢測(cè)三種常規(guī)誘變劑( M M S 、M M C 、N A N 3 ) 和一種非誘變裁( K c l ) 。結(jié)糶表明，三種細(xì)胞中以W T K l 細(xì)胞的自發(fā)