A型肉毒毒素抑制膽囊收縮素引發(fā)的離體大鼠幽門平滑肌收縮作用及其機理.pdf

1、目的：糖尿病胃輕癱患者幽門括約肌內注射A型肉毒毒素(botulinum toxin type A，BTX-A)能加速胃的排空速度，緩解消化系統(tǒng)癥狀，但其機體的作用機制尚未明了。膽囊收縮素(cholecystokinin COOH-terminal octapeptide，CCK-8)促進幽門平滑肌收縮，延緩胃排空，本研究采用大鼠離體幽門平滑肌條，觀察BTX-A對CCK以及電場刺(electrical fieldstimulation，E

2、FS)引發(fā)的幽門平滑肌收縮作用的影響，并探討其機制。 方法：選取成年Sprague-Dawley大鼠，體重250～300g，雌雄不拘。實驗時迅速敲擊頭部致暈，剖腹取胃，切取幽門環(huán)形肌一條(長1 cm，寬2mm)，置于盛有Krebs液的平皿中，仔細剝離粘膜層后，孵育在含有2 ml Krebs液的恒溫平滑肌槽中，肌槽底部持續(xù)通入95％O2和5％CO2的混合氣體。肌條一端用1號絲線固定在肌槽底部的有機玻璃彎鉤上，另一端固定在連于多導生

3、理記錄儀的張力傳感器上，肌條兩側放置有兩根平行的鉑金電極，肌條長軸與電極長軸平行，電極連于電刺激器。肌條在1g前負荷下溫育1小時左右，隨機分為sulfated CCK octapeptide(CCK-8S)+CCK-A受體拮抗劑-lorglumide(n=13)組，CCK-8S(n=6)組，BTX-A+CCK-8S(n=12)組，EFS+atropine+lorglumide(n=12)組，EFS(n=6)組，EFS+BTX-A+CCK

4、-8S(n=12)組，atropine+CCK-8S(n=10)組. 結果： (1)CCK-8S引發(fā)幽門平滑肌張力(P<0.01)及振幅(P<0.05)增強，CCK-A受體拮抗劑―lorglumide降低CCK-8S引發(fā)的幽門平滑肌的張力(P<0.05)及振幅(P<0.01)；(2)BTX-A降低CCK-8S引發(fā)的幽門平滑肌收縮的張力(P<0.01)及振幅(P<0.01)；(3)電場刺激(electrical field sti

5、mulation，EFS，100 V，4 Hz，60 s)引發(fā)的幽門平滑肌收縮張力(P<0.01)及振幅(P<0.05)增加，atropine(1μM)降低EFS(100 V，4 Hz，60s)引發(fā)的幽門平滑肌的張力(P<0.01)及振幅(P<0.01)，但仍殘留有小的收縮波，CCK-A受體拮抗劑-lorglumide降低殘余收縮波的張力(P<0.05)和振幅(P<0.01)； (4)EFS增加幽門括約肌的張力和振幅，但張力的增幅逐漸下

6、降，且呈現時間依賴性(P<0.01)；振幅的增幅亦逐漸下降，但不呈時間依賴性(P>0.05)。BTX-A抑制EFS引發(fā)的幽門平滑肌收縮張力(P<0.01)及振幅(P<0.01)，加入CCK-8S均未再引發(fā)幽門平滑肌收縮張力(P>0.05)及振幅(P>0.05)的增加； (5)atropine引發(fā)幽門平滑肌收縮振幅的下降(P<0.01)，但基線張力未見明顯改變(P>0.05)，之后加入CCK-8S引發(fā)幽門平滑肌收縮張力(P<0.01)及振

7、幅(P<0.01)的增加。 結論：(1)CCK-8S增強幽門平滑肌收縮，CCK-A受體拮抗劑-lorglumide抑制CCK-8S引發(fā)的幽門平滑肌收縮； (2)BTX-A抑制CCK-8S引發(fā)的幽門平滑肌收縮； (3)EFS增強幽門平滑肌自發(fā)性收縮； (4)atropine和CCK-A受體拮抗劑―lorglumide抑制EFS引發(fā)的幽門平滑肌收縮，提示存在內源性非膽堿能收縮組分-CCK； (5)BTX-A抑制EFS引發(fā)的幽門平滑肌