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文檔簡介
1、目的:A型肉毒毒素(botulinum toxin A,BTX-A)是否對離體十二指腸平滑肌的自發(fā)性收縮存在抑制作用,這種抑制作用的時效特點與膽堿能M受體抑制劑作用的異同。BTX-A是否可抑制外源性乙酰膽堿(acetylcholine,ACh)引發(fā)的十二指腸收縮。BTX-A預處理平滑肌后是否外源性.ACh可引發(fā)十二指腸平滑肌的收縮。旨在為臨床應用BTX-A治療小腸收縮功能紊亂所致的疾病,包括“腸易激綜合征”等提供理論和實驗依據(jù)。
2、 材料與方法:選取Sprague-Dawley大鼠,體重250-350 g,雌雄不拘。實驗前禁食24 h,飲水不限。實驗時擊頭部致昏后,距幽門0.5 cm處取1.0-1.5 cm的腸管,置于37℃Krebs液的恒溫平滑肌槽中,肌槽內持續(xù)供給95%O<,2>和5%CO<,2>的混合氣體,肌條的一端固定在肌槽底部的塑料彎鉤上,另一端固定在張力傳感器上。肌條在1 g的前負荷下孵育,隨機分為BTX-A組(n=12),Atropine組(n=12
3、),ACh+BTX-A組(n=12),ACh+Atropine組(n=12),BTX-A+ACh組(n=12)。在自發(fā)性收縮平穩(wěn).20 min后,根據(jù)研究方案,分別加入BTX-A(10U/ml)、或Atropine(1/μmol/L)、ACh(100μmol/L)。Biolap 420 E生物機能實驗系統(tǒng)記錄十二指腸縱形平滑肌條在不同給藥條件下的收縮變化。 結果: 1.BTX-A抑制了十二指腸平滑肌自發(fā)性收縮的張力、頻率
4、及振幅(P<0.01),這種抑制作用持續(xù)>1 h。 2.Atropine抑制了十二指腸平滑肌自發(fā)性收縮的張力、頻率及振幅(P<0.01),但用藥5 min后,十二指腸平滑肌的收縮開始恢復,用藥10 min后,十二指腸平滑肌的收縮已基本恢復,十二指腸平滑肌自發(fā)性收縮的張力、頻率及振幅與用藥前相比,差異已無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 3.ACh引發(fā)了十二指腸平滑肌自發(fā)性收縮的張力、頻率及振幅(P<0.01),BTX-A抑制
5、了ACh引發(fā)的十二指腸平滑肌收縮的張力、頻率及振幅(P<0.01.)。 4.ACh.引發(fā)了十二指腸自發(fā)性收縮的張力、頻率及振幅(P<0.01),Atropine抑制了ACh引發(fā)的十二指腸平滑肌收縮的張力、頻率及振幅(P<0.01)。 5.BTX-A抑制了十二指腸平滑肌自發(fā)性收縮的張力、頻率(P<0.01)及振幅(P<0.05),加入外源性ACh后不能引發(fā)十二指腸平滑肌收縮的張力、頻率及振幅。 結論:BTX-A抑制
6、離體十二指腸平滑肌自發(fā)性收縮,表明BTX-A通過抑制突觸前膜神經(jīng)遞質(ACh)的釋放而使十二指腸平滑肌收縮頻率、張力和振幅下降。BTX-A的抑制作用與atropine不同,表現(xiàn)出不完全抑制十二指腸的收縮張力、頻率和收縮幅度,這種作用為逐漸而持續(xù)性抑制。BTX-A抑制了外源性.ACh引發(fā)的十二指腸平滑肌的收縮,BTX-A抑制了十二指腸平滑肌自發(fā)性收縮后,外源性ACh不能引發(fā)十二指腸平滑肌的收縮,提示BTX-A可作用于突觸后膜M受體,從而抑
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