急性脊髓損傷后外周血淋巴細(xì)胞亞群的改變及其意義.pdf

1、目的:我們設(shè)計并實施該課題,目的在于研究脊髓損傷后機體T淋巴細(xì)胞亞群、活化抗原及粘附分子的變化情況,探討SCI與細(xì)胞免疫反應(yīng)的關(guān)系及其機理;在此基礎(chǔ)上,研究并探討傳統(tǒng)中藥黃芪在急性脊髓損傷中調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫反應(yīng)的作用,為該藥在SCI治療中的應(yīng)用提供理論依據(jù).方法:1.利用改良Allen's打擊法建立致傷能量不同的大鼠急性脊髓損傷模型.2.采用流式細(xì)胞儀檢測正常對照組、手術(shù)對照組(僅行椎板切除而未損傷脊髓)及致傷能量不同的二組脊髓損傷組大鼠傷

2、后不同時期外周血T淋巴細(xì)胞表型CD<,4>及CD<,8>的表達(dá)水平,研究CD<,4>、CD<,8>、CD<,4>/CD<,8>比值及CD<,4>+CD<,8>值隨時間變化的規(guī)律及不同致傷能量對CD<,4>及CD<,8>表達(dá)的影響,進一步了解SCI后大鼠細(xì)胞免疫反應(yīng)的改變情況.3.對二組急性脊髓損傷大鼠,在傷后第12h、36h、5d、6d、7d、8d及9d分別給予生理鹽水注射液和黃芪注射液治療,通過流式細(xì)胞儀檢測治療后不同時期大鼠外周血T

3、淋巴細(xì)胞表型CD<,4>和CD<,8>的表達(dá)水平,來觀察治療前后細(xì)胞免疫反應(yīng)改變情況.此外觀察胸腺、脾臟的外觀形態(tài)、重量的變化及其組織病理學(xué)變化,研究黃芪注射液對急性脊髓損傷大鼠細(xì)胞免疫受損的調(diào)節(jié)機制.4.采用流式細(xì)胞儀檢測15例臨床確診的急性脊髓損傷患者外周血淋巴細(xì)胞表型CD<,19>、CD<,3>、CD<,4>、CD<,8>、CD<,69>、CD<,54>及CD<,56>的表達(dá)水平,了解脊髓損傷后患者細(xì)胞免疫功能的改變情況及其機理.

4、結(jié)論:1.脊髓損傷后早期大鼠的細(xì)胞免疫主要表現(xiàn)為免疫調(diào)節(jié)功能受損,此時細(xì)胞免疫反應(yīng)低下,表現(xiàn)為CD<,4>、CD<,4>/CD<,8>比值及CD<,4>+CD<,8>值均明顯降低,這一現(xiàn)象可能是導(dǎo)致傷后機體容易發(fā)生感染的一個主要原因.隨著時間的發(fā)展,大鼠的細(xì)胞免疫反應(yīng)又逐漸恢復(fù),這可能是機體免疫系統(tǒng)對脊髓損傷的刺激作出了反應(yīng)所致.2.脊髓損傷的嚴(yán)重程度與細(xì)胞免疫反應(yīng)狀態(tài)密切相關(guān),損傷越重,細(xì)胞免疫反應(yīng)越低下,因此CD<,4>及CD<,4

5、>/CD<,8>比例的改變程度與脊髓損傷嚴(yán)重程度相關(guān),尤其是CD<,4>/CD<,8>比值.臨床工作中該值可在患者脊髓損傷后立即測出,且便捷易行,因此,在今后可試將該值作為早期(如脊髓休克期)判斷患者脊髓損傷嚴(yán)重程度及其預(yù)后的一個指標(biāo),該值越低,表面機體細(xì)胞免疫反應(yīng)受抑制越明顯,可能代表脊髓受損程度就越為嚴(yán)重,預(yù)后也越差.但目前尚應(yīng)收集大宗臨床病全進行相關(guān)性研究以進一步證實該結(jié)論.與之相反,CD<,4>+CD<,8>值可能不適合做早期判

6、斷脊髓損傷嚴(yán)重程度與預(yù)后的指標(biāo).3.脊髓休克期是傷后機體細(xì)胞免疫反應(yīng)最低下的"低谷期",此期應(yīng)引起我們足夠的重視.在這一時期應(yīng)密切監(jiān)測細(xì)胞免疫反應(yīng)狀況,并進一步研究一些措施來調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫反應(yīng)受損狀態(tài).4.應(yīng)正確認(rèn)識黃芪的細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)作用,在動物體內(nèi),它可能具有雙向調(diào)節(jié)作用.一方面,黃芪可促使脊髓損傷后外周血T淋巴細(xì)胞CD<,4>表達(dá)明顯地升高,表明它對細(xì)胞反應(yīng)低下有顯著的提高作用,可作為一種免疫增強調(diào)節(jié)劑,應(yīng)用于免疫反應(yīng)低下狀態(tài)的糾正,

7、這也可能是其"扶正固本、補氣養(yǎng)陰"的作用機制之一;另一方面,過大劑量的黃芪也可能是種免疫抑制劑,反而可能抑制大鼠的細(xì)胞免疫反應(yīng).這提示我們應(yīng)進一步確定不同劑量的黃芪對機體細(xì)胞免疫反應(yīng)調(diào)節(jié)的影響,以獲得最確切最有效的用量.5.脊髓損傷后細(xì)胞免疫反應(yīng)受抑制、低下的原因可能與一般的創(chuàng)傷不完全相同,除內(nèi)分泌系統(tǒng)方面的改變所致外,可能主要與如下兩方面有關(guān):(1)在脊髓損傷的脊髓休克期,機體的植物神經(jīng)功能暫時受到抑制,最終導(dǎo)致細(xì)胞免疫反應(yīng)低下,這種

8、抑制可能是種相對抑制,隨著脊髓休克期的結(jié)束而逐漸恢復(fù).(2)在脊髓休克期之后,脊髓可能因各種原因?qū)е铝藢嵸|(zhì)性損壞,從而使得中樞神經(jīng)系統(tǒng)傳至到免疫器官的信號途徑受到實質(zhì)性破壞,使得免疫器官失去神經(jīng)軸的調(diào)節(jié),導(dǎo)致免疫器官如胸腺萎縮、組織結(jié)構(gòu)改變,細(xì)胞排列紊亂,數(shù)量減少,使得胸腺等免疫器官的功能下降,產(chǎn)生至外周血的CD<,4>T淋巴細(xì)胞相應(yīng)明顯減少,導(dǎo)致細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)作用受損,細(xì)胞免疫反應(yīng)低下,最終可導(dǎo)致細(xì)胞免疫功能低下,脊髓損傷后期機體更易受