外周血淋巴細胞亞群在帕金森病中的作用的研究.pdf

1、目的：
　　通過對帕金森病(Parkinson’sdisease，PD)患者外周血淋巴細胞亞群的檢測，分析其改變和病程的相關性，為提供安全有效的免疫治療方法提供實驗依據。觀察α-Synuclein(α-Syn)對PD患者外周血淋巴細胞亞群分布改變的影響，初步探討其機制。
　　方法：
　　1.采用病例-對照研究，選取PD患者34例，健康對照20例，于知情同意的情況下采集靜脈血。淋巴細胞分離液分離外周血單個核細胞(peri

2、pheralbloodmononuclearcells，PBMCs)后，采用流式細胞術(Flowcytometry，F(xiàn)CM)對所有研究對象進行CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD19+在淋巴細胞中百分率的檢測，分析各亞群百分率與病程的相關性。
　　2.從PD組和對照組中選取年齡性別匹配的研究對象各10例分離PBMCs后，給予α-Syn處理。72小時后用FCM檢測其對外周血淋巴細胞亞群百分率的影響。
　　3.應用

3、細胞凋亡試劑盒和FCM檢測α-Syn對淋巴細胞凋亡的影響。
　　4.應用JC-1染料染色和流式細胞術檢測α-Syn對淋巴細胞線粒體膜電位的影響。
　　結果：
　　1.PD組患者外周血淋巴細胞CD3+的百分率高于對照組，差異沒有統(tǒng)計學意義(P>0.05)；PD組患者外周血淋巴細胞CD3+CD8+的百分率高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。對34例PD患者進行H-Y評分與外周血淋巴細胞CD3+、CD3+CD8+百

4、分率的相關分析顯示：H-Y評分與外周血淋巴細胞CD3+百分率呈正相關(r=0.530，P<0.05)兩者回歸系數具有顯著意義(P〈0.01)；H-Y評分與外周血CD3+CD8+T淋巴細胞百分率呈正相關(r=0.597，P<0.05)兩者回歸系數具有顯著意義(P<0.01)。
　　2.以10μg/ml終濃度的α-Syn處理PD組和對照組PBMCs72hs，PD組CD3+CD4+百分率低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

5、r>　　3.濃度為10μg/ml的α-Syn在作用PBMCs48hs后，F(xiàn)CM檢測結果顯示PD組CD3+CD4+淋巴細胞的凋亡率為(28.14±2.17)％，高于PD組(7.01±0.49)％，結果有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　4.濃度為10μg/ml的α-Syn作用PBMCs48hs后，經JC-1染色結合FCM檢測細胞線粒體膜電位，PD組淋巴細胞線粒體膜電位損失高于對照組(P〈0.05)。
　　結論：
　　1.