外周血淋巴細(xì)胞亞群在帕金森病中的作用的研究.pdf

1、目的：
　　通過對(duì)帕金森病(Parkinson’sdisease，PD)患者外周血淋巴細(xì)胞亞群的檢測(cè)，分析其改變和病程的相關(guān)性，為提供安全有效的免疫治療方法提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。觀察α-Synuclein(α-Syn)對(duì)PD患者外周血淋巴細(xì)胞亞群分布改變的影響，初步探討其機(jī)制。
　　方法：
　　1.采用病例-對(duì)照研究，選取PD患者34例，健康對(duì)照20例，于知情同意的情況下采集靜脈血。淋巴細(xì)胞分離液分離外周血單個(gè)核細(xì)胞(peri

2、pheralbloodmononuclearcells，PBMCs)后，采用流式細(xì)胞術(shù)(Flowcytometry，F(xiàn)CM)對(duì)所有研究對(duì)象進(jìn)行CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD19+在淋巴細(xì)胞中百分率的檢測(cè)，分析各亞群百分率與病程的相關(guān)性。
　　2.從PD組和對(duì)照組中選取年齡性別匹配的研究對(duì)象各10例分離PBMCs后，給予α-Syn處理。72小時(shí)后用FCM檢測(cè)其對(duì)外周血淋巴細(xì)胞亞群百分率的影響。
　　3.應(yīng)用

3、細(xì)胞凋亡試劑盒和FCM檢測(cè)α-Syn對(duì)淋巴細(xì)胞凋亡的影響。
　　4.應(yīng)用JC-1染料染色和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)α-Syn對(duì)淋巴細(xì)胞線粒體膜電位的影響。
　　結(jié)果：
　　1.PD組患者外周血淋巴細(xì)胞CD3+的百分率高于對(duì)照組，差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；PD組患者外周血淋巴細(xì)胞CD3+CD8+的百分率高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。對(duì)34例PD患者進(jìn)行H-Y評(píng)分與外周血淋巴細(xì)胞CD3+、CD3+CD8+百

4、分率的相關(guān)分析顯示：H-Y評(píng)分與外周血淋巴細(xì)胞CD3+百分率呈正相關(guān)(r=0.530，P<0.05)兩者回歸系數(shù)具有顯著意義(P〈0.01)；H-Y評(píng)分與外周血CD3+CD8+T淋巴細(xì)胞百分率呈正相關(guān)(r=0.597，P<0.05)兩者回歸系數(shù)具有顯著意義(P<0.01)。
　　2.以10μg/ml終濃度的α-Syn處理PD組和對(duì)照組PBMCs72hs，PD組CD3+CD4+百分率低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

5、r>　　3.濃度為10μg/ml的α-Syn在作用PBMCs48hs后，F(xiàn)CM檢測(cè)結(jié)果顯示PD組CD3+CD4+淋巴細(xì)胞的凋亡率為(28.14±2.17)％，高于PD組(7.01±0.49)％，結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　4.濃度為10μg/ml的α-Syn作用PBMCs48hs后，經(jīng)JC-1染色結(jié)合FCM檢測(cè)細(xì)胞線粒體膜電位，PD組淋巴細(xì)胞線粒體膜電位損失高于對(duì)照組(P〈0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.