肺癌活檢標(biāo)本中K16 mRNA表達(dá)水平的研究.pdf

1、浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文肺癌活檢標(biāo)本中K16mRNA表達(dá)水平的研究姓名：余碧蕓申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：內(nèi)科學(xué)（呼吸病學(xué)）指導(dǎo)教師：應(yīng)可凈20040401浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文角蛋白家族中另一成員K16(keratin16)一直以來(lái)被認(rèn)為是增殖的標(biāo)志，在皮膚病領(lǐng)域的扁平苔蘚和銀屑病中表達(dá)較高，而在腫瘤領(lǐng)域研究甚少。而浙江大學(xué)腫瘤研究所丁佳逸教授在基因芯片篩查中發(fā)現(xiàn)K16在肺癌組織中表達(dá)較高，在肺癌組織的濃度是癌旁正常組織濃度的13，8倍，比K1

2、9(6倍)更高。為了迸一步揭示K16與肺癌的關(guān)系，本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用熒光定量PCR(fluorescencequantitativePCR，F(xiàn)QPCR)的方法檢測(cè)纖支鏡活檢肺癌組織和良性病變組織K16mRNA水平的表達(dá)，從而確定K16mRNA在肺癌組織和良性病變組織中表達(dá)水平有無(wú)差異，探討其能否成為一種新的腫瘤標(biāo)記物。對(duì)象和方法于2003年l1月～2004年2月在浙江大學(xué)附屬邵逸夫醫(yī)院收集到纖支鏡活檢標(biāo)本36例。其中肺癌組26例，包括鱗癌17例

3、，腺癌7例，小細(xì)胞肺癌2例，肺良性病變組10例，包括結(jié)核7例，炎癥3例。應(yīng)用熒光定量PCR技術(shù)進(jìn)行K16mRNA的表達(dá)的檢測(cè)，得到相應(yīng)的ct值。FQPCR定量分析根據(jù)目的片段K16Ct值，內(nèi)參照GAPDHCt值=K16精確定量。結(jié)果普通PCR檢測(cè)結(jié)構(gòu)：肺癌組織和良性病變組織的K16經(jīng)過(guò)35個(gè)PCR循環(huán)均有擴(kuò)增條帶，但顏色均較淺，而空白對(duì)照則無(wú)明顯條帶。說(shuō)明K16在兩者中均有較低的表達(dá)。FQPCR檢測(cè)結(jié)果：取K16Ct值／GAPDHCt值