兔SSS后1-3及橋靜脈結(jié)扎后竇旁病理、生化和神經(jīng)功能的長(zhǎng)時(shí)程觀察.pdf

1、第一部分兔急性靜脈性腦梗死動(dòng)物模型的建立 目的：建立一個(gè)穩(wěn)定的靜脈性腦梗死的動(dòng)物模型。 方法：家兔35只，隨機(jī)分為3組(A組，單純上矢狀竇后1／3段結(jié)扎組15只；B組，上矢狀竇后1／3段+橋靜脈結(jié)扎組15只；C組，假手術(shù)組5只、)，共觀察48h，在術(shù)后8h、24h、48h分別測(cè)定腦水含量，TTC染色測(cè)梗死范圍并和大體標(biāo)本、光鏡及電鏡行對(duì)照研究。 結(jié)果：A組術(shù)后8h和B組術(shù)后8h、24h、48h腦組織水腫明顯。與A

2、組比較，B組結(jié)扎后腦梗死范圍明顯增加。且B組術(shù)后24h、48h竇旁皮層病變區(qū)被伊文思藍(lán)不同程度藍(lán)染。顯微病理學(xué)上，B組15只兔24h、48h均可見病理證實(shí)的不同程度的靜脈性腦梗死，而A組中僅5只兔出現(xiàn)了靜脈性腦梗死。假手術(shù)組4只均未見上述各種異常表現(xiàn)。 結(jié)論：上矢狀竇后1／3段+橋靜脈結(jié)扎制備靜脈性腦梗死動(dòng)物模型的方法是可行的。 第二部分 兔SSS后1／3及橋靜脈結(jié)扎后竇旁病理、生化和神經(jīng)功能的長(zhǎng)時(shí)程觀察 目的：

3、認(rèn)識(shí)SSS后1／3及橋靜脈閉塞后腦組織病理、生化和神經(jīng)功能動(dòng)態(tài)變化的全過程，探討其腦損傷的病理生理機(jī)制，確定神經(jīng)保護(hù)治療的方法和時(shí)間窗。 方法：家兔60只，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組進(jìn)一步分為顱內(nèi)壓組和結(jié)扎后8小時(shí)、24小時(shí)、48小時(shí)、72小時(shí)、1周、2周、1月、2月8個(gè)不同時(shí)間的亞組。采用外科手術(shù)的方法,在手術(shù)顯微鏡下結(jié)扎兔SSS后1/3及橋靜脈,對(duì)受損腦組織的病理狀態(tài),尤其是血管內(nèi)皮細(xì)胞及凋亡神經(jīng)元超微結(jié)構(gòu)的改變、顱內(nèi)壓

4、、腦組織含水量、SOD和MDA含量、NOS活性及動(dòng)物神經(jīng)功能缺損分級(jí)變化進(jìn)行了長(zhǎng)達(dá)2個(gè)月綜合觀察。結(jié)果:實(shí)驗(yàn)過程中有7只兔死亡,動(dòng)物尸檢病理示腦水腫明顯,并可見竇旁不同程度梗死;家兔神經(jīng)功能缺損分級(jí)變化在結(jié)扎后8小時(shí)～1周顯著變差,2周時(shí)神經(jīng)功能有改善,1月和2月功能顯著改善;ICP在結(jié)扎后4小時(shí)開始升高,8小時(shí)顯著升高,至72小時(shí)時(shí)達(dá)到最高峰,此后逐漸下降并維持1周左右;竇旁腦組織中的SOD活性在8小時(shí)無顯著改變,在24小時(shí)和48小時(shí)

5、開始下降,并在72小時(shí)～1周時(shí)下降到最低,此后逐漸升高。而顳葉腦組織的SOD活性僅于48小時(shí)～2周有下降,在同一時(shí)間點(diǎn)竇旁腦組織中SOD的活性較顳葉為低;而竇旁MDA含量于8小時(shí)就有顯著升高,并一直維持在較高水平至結(jié)扎后1月,顳葉MDA含量?jī)H結(jié)扎后72小時(shí)和1周有升高;竇旁NOS活性于48小時(shí)開始升高,72小時(shí)達(dá)到高峰,并維持一周左右,2周NOS活性下降至基線水平,1月及2月NOS活性再次升高,顳葉NOS活性只在48小時(shí)、72小時(shí)和1周

6、有升高,竇旁NOS活性較顳葉NOS活性有明顯差異;血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷以結(jié)扎后48小時(shí)～72小時(shí)最為明顯,早期以細(xì)胞腫脹、壞死為主,晚期則主要表現(xiàn)為血管增生、管腔狹窄,血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷還與腦組織含水量、神經(jīng)元凋亡呈平行關(guān)系;竇旁腦組織水含量于結(jié)扎后8小時(shí)開始升高,24小時(shí)和48小時(shí)顯著升高,72小時(shí)達(dá)到高峰,而顳葉皮層腦組織水含量于48小時(shí)開始升高,即全腦出現(xiàn)水腫,2周左右竇旁腦組織水含量開始下降,顳葉皮層則恢復(fù)正常,1月～2月腦組織水含量

7、恢復(fù)正常,全腦水腫消失;結(jié)扎后8小時(shí)～1個(gè)月均可見具有典型形態(tài)學(xué)特征的凋亡神經(jīng)元,而且以結(jié)扎后72小時(shí)和1周較多見。結(jié)論:SSS后1/3及橋靜脈結(jié)扎術(shù)后動(dòng)物生存良好,能滿足長(zhǎng)時(shí)程實(shí)驗(yàn)觀察的要求;SSS后1/3及橋靜脈結(jié)扎術(shù)后主要的受損區(qū)為SSS后1/3的竇旁區(qū),顳葉區(qū)則因全腦水腫而受損;兔SSS后1/3及橋靜脈結(jié)扎后4小時(shí)顱內(nèi)壓開始升高,3天達(dá)到最高峰，顱內(nèi)壓的升高主要原因是靜脈回流障礙和腦組織水腫；血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷以結(jié)扎后48小時(shí)～

8、72小時(shí)最為明顯，其損傷程度與腦組織含水量、神經(jīng)元凋亡呈平行關(guān)系；腦組織中脂質(zhì)過氧產(chǎn)物MDA含量于結(jié)扎后1個(gè)月一直維持在高水平，提示過氧化損傷貫穿于SSS后1／3及橋靜脈結(jié)扎后的急性期和恢復(fù)期；腦組織NOS活性經(jīng)歷了升高、降低、再升高的變化過程，在確定對(duì)抗NO毒性的時(shí)間窗時(shí)，應(yīng)予關(guān)注；自由基損傷及NO毒性是誘發(fā)神經(jīng)元凋亡的重要原因，對(duì)抗自由基損傷及NO毒性將是預(yù)防結(jié)扎后神經(jīng)元凋亡的有效途徑；SSS后1／3及橋靜脈結(jié)扎后病理、生化和神經(jīng)功

9、能等發(fā)生顯著改變的時(shí)間段主要為結(jié)扎后72小時(shí)～1周，提示此時(shí)段的有效干預(yù)治療十分重要。 第三部分 藥物干預(yù)對(duì)兔SSS及橋靜脈結(jié)扎后 病理、生化和神經(jīng)功能的影響 目的：探討尼莫通和甘露醇對(duì)SSS后1／3及橋靜脈閉塞后的藥物干預(yù)作用機(jī)理，篩選在SSS后1／3及橋靜脈閉塞后對(duì)腦有較好保護(hù)作用的用藥方法。 方法：家兔30只，根據(jù)用藥不同隨機(jī)分成實(shí)驗(yàn)組、假手術(shù)對(duì)照組、尼莫通治療組、甘露醇治療組和尼莫通與甘露醇聯(lián)合治療組