腺苷A1受體在異氟烷麻醉導(dǎo)致老齡小鼠認知障礙中的作用.pdf

1、目的:
　　研究吸入麻醉藥異氟烷是否會引起老齡小鼠認知功能障礙，以及腺苷A1受體是否參與該過程，并探究其可能的機制
　　方法:
　　取月齡在18-22個月的老年腺苷A1受體全身敲除的小鼠純合子(knockout，KO)以及同窩野生型小鼠(wild type，WT)體重在27-32g之間，均為雄性小鼠，采用軟件SAS9.1.3隨機化分組，將其分為四組(n=8)，野生型對照組（wild type of control，WT

2、C組）、純合子對照組（knockout of control，KOC組）、野生型麻醉組（wild type of isoflurane，WTI組）、純合子麻醉組（wild type ofisoflurane，KOI組）。KOI組和WTI組小鼠接受1.4％異氟烷暴露2h，同時KOC組和WTC組小鼠接受100％氧氣暴露2h處理。異氟烷或100％O2暴露24h后進行Morris水迷宮實驗，Morris水迷宮實驗結(jié)束后24h內(nèi)小鼠5％水合氯醛麻

3、醉后使用冷PBS灌注后取腦組織，一半大腦4％多聚甲醛后固定后進行免疫組化檢測大腦海馬Aβ1-42斑塊數(shù)量，另一半大腦取海馬液氮中凍存用于Western blot實驗檢測小鼠海馬磷酸化-tau(Phosphorylated-tau，P-tau)、總-tau(total-tau，T-tau)、N-甲基-D-天冬氨酸受體2B亞型(N-methyl-D-aspartic acid receptor submit2B，NR2B)蛋白表達。

4、　　結(jié)果:
　　1.在Morris水迷宮定位航行實驗中第3天逃避潛伏期，與WTC組相比，KOC組明顯縮短(P＜0.05)，其它組間未出現(xiàn)明顯差異。而第4天的逃避潛伏期中，與WTC組相比，WTI組明顯延長(P＜0.01)，而與KOC組相比，KOI組未出現(xiàn)該趨勢。與WTC組相比，KOC組逃避潛伏期明顯縮短（P＜0.01），與WTI組相比，KOI組也同樣明顯縮短(P＜0.01)。而空間探索實驗中各組小鼠在平臺象限的時間百分比和小鼠穿越平

5、臺位置的次數(shù)均未發(fā)現(xiàn)明顯差異。
　　2.在免疫組化實驗中大腦海馬Aβ1-42斑塊數(shù)量，與WTC組相比，WTI組明顯增加(P＜0.05)，與KOC組相比，KOI組未出現(xiàn)明顯差異（P＞0.05）。與WTI組相比KOI組明顯減少(P＜0.05)。
　　3.在Western blot實驗中發(fā)現(xiàn)P-tau蛋白表達水平，與WTC組相比WTI組表達明顯上調(diào)(P＜0.05)，與KOC組相比KOI組表達同樣明顯上調(diào)(P＜0.05)。與WTC組

6、相比KOC組表達明顯下調(diào)(P＜0.05)，同樣的，與WTI組相比KOI組表達明顯下調(diào)(P＜0.05)。NR2B蛋白表達水平，與WTC組相比WTI組表達明顯下調(diào)(P＜0.05)，與KOC組相比KOI組表達同樣明顯下調(diào)（P＜0.05）。與WTC組相比KOC組表達明顯上調(diào)(P＜0.05)，同樣的，與WTI組相比KOI組表達明顯上調(diào)(P＜0.05)。T-tau蛋白表達組間無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。
　　結(jié)論:
　　異氟烷麻醉暴露