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1、目的：原代培養(yǎng)和鑒定胃間質(zhì)成纖維細(xì)胞，構(gòu)建體外的胃癌間質(zhì)成纖維細(xì)胞模型，并初步分析其生物學(xué)特性。 方法：將胃癌細(xì)胞系MKN-45的培養(yǎng)上清液加入HGMF中培養(yǎng)，使其發(fā)生轉(zhuǎn)化，用光鏡、電鏡觀察其形態(tài)改變，MTT法檢測(cè)其生長(zhǎng)情況，免疫細(xì)胞化學(xué)測(cè)定其PCNA、bcl-2、MMP-9、TN表達(dá)變化，RT-PCR檢測(cè)其端粒酶活性，并分析其蛋白結(jié)合能力以及條件培養(yǎng)基對(duì)MKN-45細(xì)胞生長(zhǎng)的影響。 結(jié)果：完成人胃癌間質(zhì)成纖維細(xì)胞的原代
2、分離和培養(yǎng)，胃癌間質(zhì)成纖維細(xì)胞模型轉(zhuǎn)化的HGMF出現(xiàn)多核和畸形核，細(xì)胞群體倍增時(shí)間較親代細(xì)胞縮短(P<0.05)，染色體眾數(shù)略有增加，分裂指數(shù)增高(P<0.05)，PCNA、bcl-2、MMP-9、TN表達(dá)增強(qiáng)(P<0.001)。端粒酶活性增高(P<0.001)，蛋白質(zhì)合成能力增強(qiáng)(P<0.001)，條件培養(yǎng)基促進(jìn)MKN-45細(xì)胞生長(zhǎng)(P<0.05)。 結(jié)論：在體外構(gòu)建胃癌問(wèn)質(zhì)成纖維細(xì)胞模型可較好地模擬體內(nèi)胃癌微環(huán)境中成纖維細(xì)胞
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