結(jié)直腸癌中MAP4K4基因功能的初步研究.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)2 0 1 0 級(jí)碩士學(xué)位論文結(jié)直腸癌中M A P 4 K 4 基因功能的初步研究T h e P r e l i m i n a r yF u n c t i o n a lS t u d y o f M A P 4 K 4 i nC o l o r e c t a lC a n c e r課題來(lái)源：自選學(xué)位申請(qǐng)人導(dǎo)師姓名專業(yè)名稱培養(yǎng)類(lèi)型培養(yǎng)層次所在學(xué)院于 倩楊磊副教授病理學(xué)與病理生理學(xué)學(xué)術(shù)型碩士研究生基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院20 13

2、年0 5 月2 5 日 廣州摘要1 ．結(jié)直腸癌組織中M A P 4 K 4 的表達(dá)及臨床意義應(yīng)用免疫組化S - P 法，檢測(cè)2 2 0 例有7 年隨防資料的結(jié)直腸癌病例中M A P 4 K 4 的表達(dá)，分析M A P 4 K 4 的表達(dá)與結(jié)直腸癌各臨床因素的關(guān)系，用K a p l a n - M e i e r 和C o x 回歸分析法進(jìn)行生存分析。2 ．M A P 4 K 4 基因沉默對(duì)結(jié)直腸癌細(xì)胞生物學(xué)特性的影響采用熒光定量P C

3、R 方法檢測(cè)M A P 4 K 4 基因在六種結(jié)直腸癌細(xì)胞株( S W 4 8 0 、S W 6 2 0 、L S l 7 4 T 、L O V O 、H T 2 9 和H C T l 1 6 ) 中m R N A 的表達(dá)，篩選M A P 4 K 4 表達(dá)較高的細(xì)胞株；設(shè)計(jì)并挑選有效地M A P 4 K 4 基因干擾片段，進(jìn)行慢病毒包裝，并將其導(dǎo)入內(nèi)源性表達(dá)M A P 4 K 4 基因較高的人結(jié)直腸癌L S l 7 4 T 、S W 6

4、 2 0 兩種細(xì)胞株中，細(xì)胞流式分選穩(wěn)定細(xì)胞株；觀察M A P 4 K 4 基因干擾前后，體外侵襲、細(xì)胞增殖的變化。3 ．I 枷D 4 K 4 基因參與結(jié)直腸癌相關(guān)信號(hào)通路的初步研究通過(guò)W e s t e r n b l o t 檢測(cè)L S l 7 4 T 、S W 6 2 0 結(jié)直腸癌細(xì)胞株中M A P 4 K 4 沉默后，M A P K ／E R K 和P 1 3 K ／A k t 信號(hào)通路中P ．E R K 、t - E R K

5、、P ．A K T 、t - A K T 在蛋白水平的表達(dá)變化。研究結(jié)果：1 ．結(jié)直腸癌組織中M A P 4 K 4 的表達(dá)及臨床意義1 ．1 M A P 4 K 4 與結(jié)直腸癌各臨床因素之間的關(guān)系在2 2 0 例結(jié)直腸癌組織中M A P 4 K 4 的高低表達(dá)率分別為4 2 ．7 ％( n - 9 4 ) ，5 7 ．3 ％( n = 1 2 6 ) ，結(jié)果顯示結(jié)直腸癌的性別，年齡，組織類(lèi)型，分化程度及浸潤(rùn)深度與M A P 4 K 4

6、 在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)沒(méi)有關(guān)系；而無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的結(jié)直腸癌中M A P 4 K 4 的表達(dá)顯著低于有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的結(jié)直腸癌( z = ．2 ．6 8 9 ，P = 0 ．0 1 1 ) 。1 ．2 M A P 4 K 4 對(duì)結(jié)直腸癌患者術(shù)后生存時(shí)間的影響為了確定M A P 4 K 4 表達(dá)與結(jié)直腸癌患者預(yù)后的關(guān)系，采用K a p l a n ．M e i e r 法描述生存曲線及L o g ．r a n k 法檢驗(yàn)其統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在隨訪期內(nèi)