腫瘤相關(guān)抗原OVA66的細胞生物學功能研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文從以下兩個方面進行了研究：1.首先建立OVA66基因高表達體系，檢測OVA66高表達對腫瘤細胞系SMMC-7721和正常細胞系WISH生物學功能的影響；2.應(yīng)用RNA干擾的原理和方法，阻斷OVA66基因在高表達腫瘤細胞Hela中的表達后，建立OVA66基因低表達體系，觀察其對腫瘤細胞生物學功能的影響。 一、高表達OVA66基因?qū)毎飳W功能的作用　　從人睪丸組織中，擴增得到OVA66基因，定向克隆于真核表達載體pcDNA

2、3.1中，重組載體經(jīng)酶切鑒定和測序分析后轉(zhuǎn)染于OVA66基因低表達的腫瘤細胞SMMC-7721中，基因轉(zhuǎn)入后經(jīng)過G418篩選，得到穩(wěn)定表達株。電鏡檢測顯示，轉(zhuǎn)染pcDNA3.1-OVA66的7721核畸形明顯，常染色質(zhì)增多，胞漿核糖體豐富，表明細胞增殖代謝增快；細胞表面突起明顯增多，表明其運動能力發(fā)生變化?！　《?、RNAi阻斷OVA66基因表達對腫瘤細胞生物學功能的作用　　本實驗應(yīng)用RNAi原理，通過構(gòu)建表達小干擾RNA的載體，特異

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