飛龍掌血抗炎鎮(zhèn)痛、抗RA活性研究.pdf

1、研究背景:飛龍掌血[ToddaliaasiaticaLam.],其根或根皮在湖北恩施等地區(qū)長期被民間用于治療跌打損傷、腰腿疼痛、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、肋間神經(jīng)痛等,且療效顯著,具有活血化瘀的功效。類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(rheumatoidarthritis,RA)是一種以關(guān)節(jié)及關(guān)節(jié)周圍組織的非感染性炎癥為主的全身性自身免疫性疾病,其病理特點為關(guān)節(jié)滑膜的慢性炎癥,炎性細胞浸潤,血管翳形成,軟骨及骨組織的破壞,以及關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)的破壞與功能的喪失。RA目前仍是

2、一種難以治愈的疾病,誤診率和不合理用藥率較高,且西醫(yī)尚無特異有效的根治本病的療法或藥物,今年來中醫(yī)藥治療本病以其具有調(diào)節(jié)整體功能、療效穩(wěn)定、副作用小的特點,日益被人們所關(guān)注。
　　研究目的:為了證實飛龍掌血的藥理作用以進一步擴大使用,且為了篩選飛龍掌血抗炎鎮(zhèn)痛及抗RA活性部位以進一步開發(fā)新藥,本研究對產(chǎn)于湖北恩施自治州的飛龍掌血根皮[Radix Toddaliae Asiaticae]進行了系統(tǒng)的基礎(chǔ)藥理研究。本實驗通過體內(nèi)整體動

3、物模型的建立對飛龍掌血乙醇提取物及各部位浸膏的鎮(zhèn)痛、抗炎及抗類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的活性進行了系統(tǒng)的評價。同時對飛龍掌血抑制II型膠原誘導(dǎo)的小鼠關(guān)節(jié)炎(typeII collagen-induced arthritis,CIA)的作用機制進行了更深入的研究:考察其對于小鼠外周血清中促炎性細胞因子TNF-α(tumour necrosis factoralpha)、IL-1β(inter leukin-1beta)、IL-6(inter leuk

4、in-6)的調(diào)控作用及對于抑炎性細胞因子IL-10(inter leukin-10)的調(diào)控作用,研究給藥組、模型對照組與正常對照組三者之間是否有顯著性差異及相關(guān)性,從而探討這些細胞因子在CIA發(fā)病過程中的作用,以更深入了解RA的發(fā)病機制。
　　研究方法:1)實驗采用小鼠醋酸扭體動物模型對飛龍掌血乙醇提取物及各部位浸膏進行了鎮(zhèn)痛活性評價及活性部位篩選;2)實驗采用二甲苯致小鼠耳腫脹動物模型對飛龍掌血乙醇提取物及各部位浸膏進行了抗急性

5、炎癥活性評價及活性部位篩選;3)實驗采用牛II型膠原誘導(dǎo)性小鼠關(guān)節(jié)炎(typeII collagen-induced arthritis,CIA)動物模型對飛龍掌血乙醇提取物及各部位浸膏進行了抗類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)活性評價及活性部位篩選,并通過ELISA測定細胞因子方法對該藥材抗RA的作用機制進行了探討。
　　研究結(jié)果:1)在醋酸致小鼠扭體反應(yīng)疼痛模型中,飛龍掌血乙醇總膏及其乙酸乙酯部位、生物堿部位浸膏有一定的鎮(zhèn)痛作用,且基本呈

6、劑量依賴關(guān)系,其中飛龍掌血乙醇總膏及其乙酸乙酯部位浸膏抗炎作用較明顯,高中劑量均與模型對照組有顯著性差異(P<0.05);2)在二甲苯致小鼠耳腫脹炎癥模型中,飛龍掌血乙醇總膏及其乙酸乙酯部位浸膏均有一定的抗炎作用,且基本呈劑量依賴關(guān)系,其中飛龍掌血乙醇總膏及其乙酸乙酯部位浸膏抗炎作用較明顯,高中劑量均與模型對照組有顯著性差異(P<0.05)。由實驗結(jié)果我們得出飛龍掌血乙醇總提取物具有有效的抗炎鎮(zhèn)痛活性,且其乙酸乙酯部位活性較其它部位更為

7、顯著,可初步確定其有效活性部位為乙酸乙酯部位;3)本研究建立了RA的一種常見的整體動物病理研究模型:牛II型膠原誘導(dǎo)的小鼠關(guān)節(jié)炎模型(CIA)。觀察了飛龍掌血甲醇總膏及其各萃取部位對CIA小鼠的關(guān)節(jié)炎發(fā)展的抑制作用,評價其是否能有效降低小鼠外周血清中不同細胞因子水平,據(jù)此證實了飛龍掌血具有明顯的抗RA作用,并確定活性部位,與我們前期研究的抗炎鎮(zhèn)痛的活性部位基本一致,且證實飛龍掌血及其活性部位可以抑制CIA小鼠免疫器官重量,可以明顯下調(diào)C