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1、本文主要研究了綠原酸對(duì)金黃色葡萄球菌感染的乳腺上皮細(xì)胞的保護(hù)作用及綠原酸對(duì)奶牛中性粒細(xì)胞功能的影響。
試驗(yàn)一、綠原酸對(duì)金黃色葡萄球菌與奶牛乳腺上皮細(xì)胞相互作用的影響
研究0、10、20、30μg/mL綠原酸對(duì)金黃色葡萄球菌增殖的抑制作用。結(jié)果顯示培養(yǎng)0、3、6h時(shí)綠原酸對(duì)金黃色葡萄球菌的增殖沒有顯著影響,培養(yǎng)9、12h時(shí)30μg/mL綠原酸組對(duì)金黃色葡萄球菌增殖具有顯著的抑制作用(P<0.05)。培養(yǎng)24 h時(shí)10μ
2、g/mL綠原酸組對(duì)金黃色葡萄球菌增殖具有顯著的抑制作用(P<0.05),20、30μg/mL綠原酸組對(duì)金黃色葡萄球菌增殖具有極顯著的抑制作用(P<0.01)。20μg/mL綠原酸可以對(duì)已形成的細(xì)菌生物膜起到破壞作用(P<0.05),其他組無(wú)顯著影響。
10、20、30μg/mL綠原酸對(duì)乳腺上皮細(xì)胞活性無(wú)負(fù)面影響,20μg/mL綠原酸組可以顯著提高金黃色葡萄球菌感染的乳腺上皮細(xì)胞的存活率(P<0.05),其他組無(wú)顯著影響。10、
3、20、30μg/mL綠原酸對(duì)金黃色葡萄球菌粘附侵襲乳腺上皮細(xì)胞沒有顯著影響,但30μg/mL綠原酸組可以顯著降低金黃色葡萄球菌對(duì)乳腺上皮細(xì)胞的侵襲率(P<0.05)。30μg/mL綠原酸組可以顯著降低金黃色葡萄球菌誘導(dǎo)的乳腺上皮細(xì)胞ROS的產(chǎn)生(P<0.05),其他組無(wú)顯著影響。
試驗(yàn)二、綠原酸對(duì)金黃色葡萄球菌誘導(dǎo)的奶牛乳腺上皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)的影響
為探究綠原酸對(duì)乳腺上皮細(xì)胞炎癥相關(guān)因子表達(dá)的影響,利用金黃色葡萄球菌感
4、染乳腺上皮細(xì)胞后加入綠原酸進(jìn)行培養(yǎng),結(jié)果顯示30μg/mL綠原酸可以極顯著降低IL-1β、IL-6、IL-8、TLR-2 mRNA的表達(dá)(P<0.01),對(duì)TNF-α、MyD88 mRNA的表達(dá)無(wú)顯著影響。30μg/mL綠原酸組可以顯著降低MAPK信號(hào)通路p38、JNK蛋白的磷酸化水平,對(duì)ERK亞族的磷酸化沒有影響。
試驗(yàn)三、綠原酸對(duì)中性粒細(xì)胞功能及炎癥相關(guān)基因表達(dá)的影響
為探究綠原酸對(duì)中性粒細(xì)胞功能的影響,對(duì)中性粒
5、細(xì)胞的趨化、吞噬、殺菌功能進(jìn)行評(píng)價(jià)。分別選用0、10、20、30μg/mL綠原酸與中性粒細(xì)胞共培養(yǎng),結(jié)果顯示10、20、30μg/mL綠原酸對(duì)中性粒細(xì)胞活性沒有影響,10、20、30μg/mL綠原酸對(duì)中性粒細(xì)胞的趨化能力沒有影響,20μg/mL綠原酸組可以顯著提高中性粒細(xì)胞的吞噬能力(P<0.05),30μg/mL組可以極顯著提高吞噬能力(P<0.01)。添加20μg/mL綠原酸組中性粒細(xì)胞的殺菌能力顯著提高(P<0.05),其他組無(wú)顯
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