研究胸-腹水細胞CD44v8-10-CD44v10差異性表達和SP-A基因?qū)Ψ蜗侔┑脑\斷價值.pdf

1、　　目的 應(yīng)用RT-PCR和DNA印跡雜交技術(shù),檢測惡性病變引起胸/腹水脫落細胞中CD44v8-10、SP-A(Surfactant Protein-A)基因的表達,探討CD44v8-10/CD44v10比值與SP-A基因在胸/腹水診斷中的臨床意義,探討對原發(fā)性肺腺癌引起的惡性胸/腹水組織來源判定、組織學分型的應(yīng)用價值。
　　方法 (1) 應(yīng)用競爭性RT-PCR技術(shù),對良/惡性病變引起胸/腹水中脫落細胞的CD44v8-10和CD4

2、4v10基因進行競爭性同步擴增和凝膠圖像分析,對CD44v8-10和CD44v10進行半定量分析,計算惡性病變引起胸/腹水脫落細胞的CD44v8-10/CD44v10比值,與良性病變所引起的胸/腹水脫落細胞的CD44v8-10/CD44v10比值進行對比,建立一種通過檢測基因表達量來判斷病變性質(zhì)的分子生物學指標；(2) 應(yīng)用RT-PCR技術(shù),檢測胸/腹水細胞中的SP-A基因擴增,經(jīng)Southern blot驗證,判定引起胸/腹水的病變性

3、質(zhì)、組織來源或組織學類型；(3) 培養(yǎng)肺腺癌細胞(GLC-82),與白細胞配伍成梯度濃度的樣本,探求本實驗技術(shù)對判斷惡性病變性質(zhì)的敏感程度。
　　結(jié)果 (1) 惡性病變導致的胸/腹水CD44v8-10/CD44v10比值均大于1.00(3.62±2.06/3.39±2.36),良性病變引起的胸/腹水CD44v8-10/CD44v10比值均小于1.00(0.48±0.29/0.55±0.50),良/惡性病變CD44v8-10/CD4