藏族原發(fā)性高血壓的分子遺傳學(xué)研究.pdf

1、本次實(shí)驗(yàn)選取遺傳背景相對(duì)單一的藏族群體為研究對(duì)象,進(jìn)行了RAS系統(tǒng)中主要成分AGT、ACE和AT<,1>R基因的多態(tài)性和原發(fā)性高血壓的關(guān)聯(lián)分析.不同以往的基于單個(gè)位點(diǎn)的分析,我們用多位點(diǎn)的單體型分析和分層相結(jié)合的方法,檢測(cè)與高血壓可能相關(guān)的特異單體型以及探索可能存在的基因—基因之間的協(xié)同作用.為一步證實(shí)和解釋遺傳學(xué)的關(guān)聯(lián)分析的結(jié)果,以及鑒定存在于AT<,1>R基因5'調(diào)控區(qū)的SNPs是否真正具有改變轉(zhuǎn)錄活性的功能,我們構(gòu)建含AT<,1>

2、R基因5'調(diào)控區(qū)序列不同長度的缺失片段和不同單體型的熒光素酶報(bào)告基因重組質(zhì)粒,體外轉(zhuǎn)染HeLa細(xì)胞并測(cè)定它們的瞬時(shí)表達(dá)熒光素酶活性.以期待從功能方面進(jìn)一步闡明基因結(jié)構(gòu)和表型之間的內(nèi)在關(guān)聯(lián).本研究表明AGT基因235MM基因型可能是藏族女性高血壓的危險(xiǎn)因素.同時(shí)我們還發(fā)現(xiàn)AT<,1>R基因單體型和AGT基因235TT基因型協(xié)同與高血壓相關(guān),此結(jié)果提示在原發(fā)性高血壓的遺傳學(xué)研究中多位點(diǎn)的單體型分析和基因—基因相互作用的估計(jì)較單個(gè)位點(diǎn)的分析所

3、具有的潛在優(yōu)勢(shì).體外轉(zhuǎn)錄活性研究顯示位于AT<,1>R基因5'調(diào)控區(qū)的SNPs參與基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控.單體型ATCCGA(-2228,-521,-214,-213,-153,1166)可能具有的保護(hù)作用這一群體遺傳學(xué)分析所得的結(jié)果在隨后的體外轉(zhuǎn)錄檢測(cè)中得到了機(jī)制上的驗(yàn)證.含有單體型-521T\-214C\-213C\-153G的報(bào)告基因重組質(zhì)粒,其活性在由SNPs-521C/T,-214A/C(-213G/C)和-153A/G組成的四個(gè)主要