運動發(fā)酵單胞菌發(fā)酵條件優(yōu)化及其PDC基因的原核表達.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、隨著化石能源的逐漸枯竭,燃料乙醇作為可替代能源的研究和發(fā)展在世界范圍內受到越來越多的重視。構建能夠高效發(fā)酵糖類生產乙醇的工程菌株是當前燃料乙醇生產研究的一項重要內容。
  本研究首先對運動發(fā)酵單胞菌乙醇發(fā)酵條件和培養(yǎng)基成分分別進行單因子優(yōu)化和正交優(yōu)化;其后采用該菌基因組為模板,克隆乙醇發(fā)酵關鍵酶基因pdc,以誘導型表達質粒pET-28a為載體,構建重組質粒,轉化大腸桿菌BL21,初步優(yōu)化誘導表達條件,最后,應用重組大腸桿菌進行乙醇

2、發(fā)酵試驗,研究該基因的表達對宿主菌體的葡萄糖代謝途徑及乙醇發(fā)酵能力的影響。
  經過優(yōu)化后確定運動發(fā)酵單胞菌Z-1培養(yǎng)基最佳葡萄糖含量為10%~15%,最適接種量為發(fā)酵培養(yǎng)基體積的1/50,最佳發(fā)酵溫度為30℃~35℃,培養(yǎng)基最適pH為8.0~9.0;其發(fā)酵培養(yǎng)基最佳基礎成分為:MgSO4:0.01%,(NH4)2SO4:0.18%,KH2PO4:0.18%,Yeastextract:0.9%;在這四種成分中,Yeastextra

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