整合素αVβ6與癌相關(guān)成纖維細(xì)胞的關(guān)系及惡性腫瘤細(xì)胞生物學(xué)行為研究.pdf

1、背景和意義:
　　整合素(Integrin)，又稱整聯(lián)蛋白，是在細(xì)胞膜上的介導(dǎo)細(xì)胞和細(xì)胞之間、細(xì)胞和外界微環(huán)境之間的受體蛋白。細(xì)胞表面的受體家族有很多，整合素是其中的一員并具有可以調(diào)節(jié)細(xì)胞粘附作用，細(xì)胞之間以及對(duì)細(xì)胞運(yùn)動(dòng)起到牽引、支持及固定作用。之前研究表明β6亞基作為整合素亞家族中的一員，具有重要作用，β6亞基只與αV亞基形成關(guān)鍵分子并參與腫瘤的生長(zhǎng)進(jìn)展。在正常生理組織結(jié)構(gòu)中，整合素αVβ6被正式具有重要功能作用，例如在組織損傷

2、及炎癥過(guò)程等一些良性病變例中，整合素αVβ6可達(dá)到幫助組織重建作用。整合素αVβ6可以誘導(dǎo)其他因子表達(dá)從而促進(jìn)損傷部位的上皮細(xì)胞增殖以及遷移，對(duì)損傷部位的上皮組織進(jìn)行修補(bǔ)代替。在上皮性腫瘤以及其他腫瘤細(xì)胞系檢測(cè)中整合素αVβ6的表達(dá)呈現(xiàn)高表達(dá)水平。許多惡性腫瘤細(xì)胞都跟整合素家族中各種亞型的表達(dá)有密切聯(lián)系，整合素αVβ6的表達(dá)在結(jié)腸腫瘤細(xì)胞中已被證實(shí)跟腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移等機(jī)制相關(guān)。許多整合素的亞單位結(jié)構(gòu)跟惡性腫瘤密切相關(guān)，促進(jìn)腫瘤進(jìn)展。作為

3、一種細(xì)胞粘附分子的受體，在多種惡性腫瘤細(xì)胞在正常組織中的侵襲和轉(zhuǎn)移中整合素αVβ6起到一定重要作用。某些腫瘤細(xì)胞的發(fā)展和惡化跟其表達(dá)的整合素α或β亞單位及功能的部分變化有密切聯(lián)系，例如整合素的α2異常表達(dá)被大量發(fā)現(xiàn)于完全朱分化癌中，整合素α6的異常表達(dá)最近也被發(fā)現(xiàn)在一些惡性腫瘤當(dāng)中。整合素β6，細(xì)胞粘附分子受體，在各種惡性腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移當(dāng)中扮演著一個(gè)重要的角色。實(shí)驗(yàn)證明上皮來(lái)源腫瘤和腫瘤細(xì)胞系也可檢測(cè)到高表達(dá)的整合素β6。整合素β6被認(rèn)

4、為是激活腫瘤生長(zhǎng)的一個(gè)重要中介因素。因此，本研究試圖證實(shí)其在腫瘤擴(kuò)散，生存、入侵和轉(zhuǎn)移中扮演的角色。
　　癌相關(guān)成纖維細(xì)胞（Cancer-associated fibroblasts，CAFs）是目前在腫瘤細(xì)胞微環(huán)境中已知的活化成纖維細(xì)胞，它是構(gòu)成腫瘤間質(zhì)細(xì)胞組成的重要部分，在腫瘤細(xì)胞微環(huán)境中癌相關(guān)成纖維細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞相互作用促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)和進(jìn)展，起了重要作用。在腫瘤細(xì)胞多階段的侵襲和轉(zhuǎn)移過(guò)程中，細(xì)胞粘附被認(rèn)為具有重要的作用，因此

5、跟細(xì)胞粘附相關(guān)的因子成為研究熱點(diǎn)。癌相關(guān)成纖維細(xì)胞可表達(dá)平滑肌細(xì)胞標(biāo)記物α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(alpha-smooth muscle actin，α-SMA)，并通過(guò)分泌一定的生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子來(lái)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和血管生成。有研究發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞中高表達(dá)的整合素，其某些亞基可以通過(guò)α-SMA的相互作用來(lái)影響癌相關(guān)成纖維細(xì)胞的生長(zhǎng)。在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)已經(jīng)證實(shí)，通過(guò)慢病毒阻斷腫瘤細(xì)胞中整合素α3的表達(dá)，可以下調(diào)癌相關(guān)成纖維細(xì)胞中α-平滑肌肌動(dòng)蛋白的表達(dá)

6、。因此，整合素αVβ6亞基以及α-SMA的表達(dá)水平或許可以作為評(píng)估胃癌患者預(yù)后的一個(gè)高風(fēng)險(xiǎn)的發(fā)展轉(zhuǎn)移性疾病的重要指標(biāo)。根據(jù)我們實(shí)驗(yàn)實(shí)之前對(duì)整合素β6在結(jié)腸癌及其他癌癥中的研究發(fā)現(xiàn)，整合素β6是甲狀腺濾泡癌治療的候選目標(biāo)。腫瘤細(xì)胞的增值、入侵和轉(zhuǎn)移多與金屬蛋白酶MMP-2和MMP-9相關(guān)。我們之前的研究發(fā)現(xiàn)，抑制整合素β6調(diào)控磷酸化和/或非磷酸化的ERK1/2，抑制腫瘤細(xì)胞在培養(yǎng)基中分泌uPA，pro-MMP-9和pro-MMP-2，更重

7、要的是通過(guò)纖溶酶原激活物抑制依賴MAPK標(biāo)記的膠原Ⅳ退化。
　　第一部分整合素αVβ6在胃癌組織中的表達(dá)及與癌相關(guān)成纖維細(xì)胞的相互作用對(duì)患者預(yù)后的影響
　　目的:本研究檢測(cè)整合素αVβ6在胃癌組織中的表達(dá)，探討整合素αvβ6和癌相關(guān)成纖維細(xì)胞的關(guān)系，揭示整合素αvβ6高表達(dá)在胃癌發(fā)展和惡化中發(fā)揮重要作用。分析整合素αVβ6的表達(dá)水平與胃癌患者臨床病理的相關(guān)性以及特性，為人類胃腫瘤的預(yù)測(cè)提供依據(jù)。
　　方法:通過(guò)免疫組織

8、化學(xué)方法分析胃癌組織中整合素αVβ6的表達(dá)水平和由癌相關(guān)成纖維細(xì)胞分泌的α-SMA的表達(dá)水平。并結(jié)合所有胃癌患者的臨床病理相關(guān)性特性分析整合素αVβ6和癌相關(guān)成纖維細(xì)胞表達(dá)與胃癌患者存活時(shí)間的關(guān)系。
　　結(jié)果:整合素的αvβ6主要在胃癌組織中表達(dá)，α-SMA主要在胃癌組織中的間質(zhì)中表達(dá)。具有整合素β6和α-SMA陽(yáng)性高表達(dá)胃癌患者的總體存活率要比具有整合素β6和α-SMA陰性表達(dá)胃癌患者顯著降低(P＜0.05)。多因素生存分析表明

9、胃癌患者陽(yáng)性整合素β6和α-SMA表達(dá)和/或擴(kuò)散類型胃癌的總體存活率較差(P＜0.05)。
　　結(jié)論:整合素β6與癌相關(guān)成纖維細(xì)胞的檢測(cè)可以成為評(píng)估胃癌患者預(yù)后的一個(gè)有價(jià)值指標(biāo)。
　　第二部分整合素β6在甲狀腺濾泡癌中的表達(dá)及與腫瘤復(fù)發(fā)的臨床關(guān)系
　　目的:本研究檢測(cè)整合素β6在甲狀腺癌組織中的表達(dá)，以及探討其在惡性腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移中扮演的角色。
　　方法:免疫組織化學(xué)法檢測(cè)甲狀腺濾泡狀癌患者中整合素β6，金屬蛋白

10、酶2和金屬蛋白酶9的表達(dá)水平。然后分析其表達(dá)與患者臨床相關(guān)參數(shù)以及生存時(shí)間的關(guān)系。
　　結(jié)果:整合素β6主要在甲狀腺濾泡癌細(xì)胞細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)中表達(dá)。金屬蛋白酶2和金屬蛋白酶9的表達(dá)主要在甲狀腺濾泡癌細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中表達(dá)。在60例患者的臨床病理特征中，不同大小的腫瘤中整合素β6，金屬蛋白酶2和金屬蛋白酶9的表達(dá)水平有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。腫瘤不同的T分期中，整合素β6和金屬蛋白酶9的表達(dá)有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。腫瘤不同的M分期中，金屬蛋白酶2