SU11274影響食管癌Eca109細胞生物學行為的時辰效應探討.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：本文旨在研究c-Met抑制劑Sull274對食管癌Ecal09細胞株生物學行為的影響，并通過其作用靶點c-Met蛋白和C-met mRNA與生物鐘基因Clock mRNA的可能潛在聯(lián)系，進一步探討在其作用過程中是否有時辰效應的存在。
　　 方法：(1)體外培養(yǎng)食管癌Ecal09細胞株，用免疫細胞化學檢測c-Met蛋白的表達。(2)用SUll274(IC50為20nM)處理Ecal09細胞，通過MTT生長曲線、劃痕實驗、tr

2、answell侵襲小室以及FCM，觀察藥物對細胞生長、遷移、侵襲能力以及凋亡率與細胞周期的影響。(3)體外培養(yǎng)食管癌Ecal09細胞株，用RT-PCR法分別檢測不同時間點Clock與C-met mRNA的表達。(4)用流式細胞儀檢測各時間點c-Met蛋白的表達。(5)不同時間點SUll274處理細胞24h后，用流式細胞儀檢測細胞周期。
　　 結(jié)果：(1)Ecal09細胞表達c-Met蛋白。(2)SUll274實驗組細胞生長，遷移

3、和浸潤能力低于對照組，凋亡率高于對照組，增殖指數(shù)低于對照組。(3)48h內(nèi)Clock基因表達呈節(jié)律性波動(P<0.05)。(4)24h內(nèi)Clock與C-met基因表達呈相似節(jié)律性波動(P<0.01)，。(5)24h內(nèi)c-Met蛋白表達呈節(jié)律性波動(P<0.05)，出現(xiàn)表達高峰的時間點與C-met mRNA表達高峰時間點一致。(6)不同時間點SUll274處理細胞后，細胞增殖指數(shù)抑制率不同(P<0.01)。
　　 結(jié)論：(1)c-

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