華南地區(qū)豬場(chǎng)流感病毒血清學(xué)調(diào)查及重組H3N2亞型SIV候選疫苗株的初步研究.pdf

1、豬是流感病毒重要的宿主之一，不僅能感染人流感病毒，而且能感染禽流感病毒，對(duì)當(dāng)前的流感生態(tài)環(huán)境的形成起到重要的作用。甲型H1N1/2009流感病毒的爆發(fā)，說(shuō)明豬能夠獨(dú)立地促進(jìn)流感毒株的產(chǎn)生。豬流感（Swine Influenza，SI）由豬流感病毒（Swine Influenza Virus，SIV）引起，是一種急性和高度感染性呼吸系統(tǒng)性疾病，一般呈現(xiàn)地方流行性。典型的臨床癥狀表現(xiàn)為突發(fā)性咳嗽、高熱、嗜睡、厭食、鼻涕、呼吸困難和體重下降等

2、，具有高發(fā)病率但低死亡率的特征。SI極易導(dǎo)致繼發(fā)感染或混合感染，以致進(jìn)一步發(fā)展成豬呼吸道疾病綜合癥，造成一定的經(jīng)濟(jì)損失。H1N1、H1N2和H3N2亞型豬流感病毒是目前主要的流行毒株。
　　為了調(diào)查中國(guó)華南地區(qū)豬群豬流感病毒和甲型 H1N1/2009流感病毒（H1N1pdm09）的流行情況，本研究于2013年10月至2014年9月期間，在中國(guó)華南地區(qū)的廣東省、江西省、湖南省、福建省和廣西壯族自治區(qū)共73個(gè)豬場(chǎng)，采集未進(jìn)行流感疫苗免

3、疫的臨床健康豬的血清樣品2,208份。采用歐亞類禽豬流感 H1N1、類人豬流感H3N2和甲型H1N1pdm09流感病毒，通過(guò)血凝抑制試驗(yàn)（HI），對(duì)這2,208份血清進(jìn)行SIV和H1N1pdm09流感病毒血清學(xué)檢測(cè)。結(jié)果顯示流感病毒抗體為陽(yáng)性的血清共1,269份（57.42％）。SIV和H1N1pdm09流感病毒的流行存在明顯的區(qū)域性差異，其中廣東省和廣西壯族自治區(qū)的感染率最高（p<0.01），分別為64.48%和75.00%。EA H

4、1N1、H3N2SIV和H1N1pdm09流感病毒抗體陽(yáng)性率分別是22.51%、32.97%和26.49%。H1N1pdm09流感病毒的抗體幾何平均滴度（Geometric Mean Antibody Titers，GMT）最高（91.93±1.04，p<0.05）。EA H1N1和H3N2SIV在冬季血清陽(yáng)性率最高，然而在冬末（2月）陽(yáng)性率卻最低（p<0.01）。H1N1pdm09流感病毒抗體陽(yáng)性率在5月和9月出現(xiàn)高峰（p<0.01）

5、。母豬體內(nèi)的EA H1N1和H1N1pdm09流感病毒抗體陽(yáng)性率分別為25.93%和28.04%，均比仔豬（19.63%和23.29%）和育肥豬（22.32%和27.16%）高，但仔豬的H3N2 SIV抗體陽(yáng)性率卻比較高。本研究為華南地區(qū)豬場(chǎng)SIV和H1N1pdm09流感病毒的預(yù)防提供參考依據(jù)。
　　普遍認(rèn)為，疫苗是抵抗流感病毒感染最有效的方法。至今，油佐劑的全病毒滅活疫苗是應(yīng)用最廣泛且技術(shù)最成熟的豬流感病毒疫苗。本研究利用反向遺

6、傳技術(shù)，成功構(gòu)建了 H3N2亞型豬流感病毒 L22的8質(zhì)粒系統(tǒng)。將 A/swine/Guangdong/L22/2010（H3N2）豬流感病毒的HA、NA基因與A/Puerto Rico/8/1934的6個(gè)內(nèi)部基因片段重組，拯救出rL22/PR8。經(jīng)鑒定，rL22/PR8的基因序列與親本毒株和PR8的相應(yīng)基因片段序列一致。將rL22/PR8接種至9日齡的SPF雞胚后，其HA血凝效價(jià)提高到210，EID50結(jié)果提高到1.78×109EID