哮喘大鼠下丘腦室旁核內(nèi)P物質(zhì)在神經(jīng)內(nèi)分泌調(diào)制中的作用及機制探討.pdf

1、【目的】探討哮喘大鼠下丘腦室旁核(PVN)內(nèi)P物質(zhì)(SP)在哮喘發(fā)病中的神經(jīng)內(nèi)分泌調(diào)制作用.【材料與方法】取健康雄性SD大鼠162只,隨機分成正常對照組和哮喘組.哮喘組用卵蛋白(OA)腹腔注射致敏,建立哮喘模型后,靜脈注射OA激發(fā)哮喘急性發(fā)作,然后PVN注藥,按PVN注射約物的不同分為OA+NS組、OA+SP組、OA+S0145(SPR阻斷劑)組、OA+S0145+SP組(n=6).采用中樞立體定位及核團微量注射技術在哮喘大鼠下丘腦室旁

2、核內(nèi)微量注射SP和/或S0145,用Powerlab/400生物信號采集系統(tǒng)記錄肺功能指標;用放射免疫分析方法(RIA)檢測正中隆起(ME)中促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)和外周血中促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)、皮質(zhì)酮(CORT)含量及PVN內(nèi)SP含量;用免疫組織化學方法、葡萄糖氧化酶-DAB-鎳染色和計算機圖像分析等技術檢測肺內(nèi)神經(jīng)源性炎性介質(zhì)降鈣素基因相關肽樣免疫反應(CGRP-IR)陽性物的含量、Fos蛋白在PVN和海馬內(nèi)的表

3、達.【結(jié)果】1)與正常對照組相比,哮喘大鼠PVN內(nèi)SP含量明顯增多;海馬、PVN出現(xiàn)大量Fos蛋白表達.靜脈注射OA生理鹽水溶液(8mg·kg<'-1>)激發(fā)哮喘發(fā)作后,肺功能指標明顯改變,出現(xiàn)哮喘活動表現(xiàn),即:膈肌放電頻率(EMGdi frenquency)、呼/吸(T<,E>/T<,1>)和氣道阻力(R<,AW>)增加,膈肌放電積分(EMGdi integral)、每分通氣量(MVV)、肺順應性(c<,L>)減小;放射免疫分析方法(

4、RIA)檢測結(jié)果表明,哮喘急性發(fā)作后,外周血中CORT、ACTH及正中隆起組織中CRH的含量明顯降低;免疫組織化學研究表明,哮喘急性發(fā)作后,支氣管、肺內(nèi)有較密集的CGRP樣免疫反應(CGRP-IR)陽性物分布;與正常對照組相比,差異有統(tǒng)計學意義.2)哮喘大鼠靜脈注射OA(8mg·kg<'-1>)激發(fā)哮喘發(fā)作后,PVN內(nèi)微量注射SP,與OA+NS組相比,膈肌放電頻率(EMGdi frenquency)、呼/吸(T<,E>/T<,1>)和氣

5、道阻力(R<,AW>)增加,膈肌放電積分(EMGdi integral)、每分通氣量(MVV)、肺順應性減小(c<,L>);外周血中CORT、ACTH及正中隆起組織中CRH含量明顯降低;支氣管、肺內(nèi)CGRP-IL陽性物數(shù)量顯著增多,差異有統(tǒng)計學意義.3)哮喘大鼠靜脈注射OA(8mg·kg<'-1>)激發(fā)哮喘發(fā)作后,PVN內(nèi)微量注射SPR阻斷劑S0145,與OA+NS組相比,肺功能明顯改善;外周血中CORT、ACTH及正中隆起組織中CRH