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文檔簡介
1、目的: 以全反式維甲酸(RA)為對照,研究維胺酯(VA)及其體內(nèi)代謝物M<,1>、M2的抗細(xì)胞增殖能力,并比較四種化合物對維甲酸類受體轉(zhuǎn)錄的激活能力,以探討它們在作用模式上與RA的異同性,為探討VA的作用機(jī)理以及開發(fā)新的維甲酸類藥物奠定基礎(chǔ)。 方法: 體外培養(yǎng)人宮頸癌上皮細(xì)胞HeLa細(xì)胞,采用XTT法檢測不同濃度的RA、VA、M<,1>、M<,2>對其增殖的影響。采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法分別將RARα、RARβ、RARγ
2、、RXRα受體質(zhì)粒,βRARE-tk-CAT、TREpal-tk-CAT報(bào)道質(zhì)粒和β-gal對照質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染到HeLa細(xì)胞中,在1μM的RA、VA、M<,1>、M<,2>作用HeLa細(xì)胞24小時(shí)后用CAT ELISA法檢測CAT的相對表達(dá)量以研究四種化合物對受體轉(zhuǎn)錄的激活作用。 結(jié)果: 1.抗細(xì)胞增殖能力:1μM、5μM、10μM、50μM的RA、VA對HeLa細(xì)胞增殖的抑制作用與對照組相比沒有顯著性差異,在濃度為100μ
3、M時(shí)有抑制作用(P<0.01),RA抑制率約為37%,VA抑制率約為83%,在濃度為500μM時(shí)細(xì)胞幾乎完全死亡;1μM、5μM、10gM的M<,1>、M<,2>對HeLa細(xì)胞增殖的抑制作用與對照組相比沒有顯著性差異,在濃度為50μM時(shí)有抑制作用(P<0.05,P<0.01),M<,1>抑制率約為29%,M<,2>抑制率約為36%,在濃度為100μM時(shí)細(xì)胞幾乎完全死亡。 2.對受體轉(zhuǎn)錄的激活能力:RA對轉(zhuǎn)染RARα、RARβ、R
4、ARγ受體質(zhì)粒的HeLa細(xì)胞引起的相對CAT表達(dá)量分別是對照組的117.7倍(p<0.01)、53.8倍(p<0.01)、44.3倍(p<0.01);VA對轉(zhuǎn)染RARα、RARβ、RARγ受體質(zhì)粒的HeLa細(xì)胞引起的CAT的相對表達(dá)量分別是對照組的2.1倍(p<0.05)、2.1倍、1.4倍(p<0.05);RA、VA對轉(zhuǎn)染RXRα受體質(zhì)粒的HeLa細(xì)胞均不引起相對CAT表達(dá)量的升高;M<,1>、M<,2>對轉(zhuǎn)染四種受體質(zhì)粒的HeLa細(xì)
5、胞均不引起相對CAT表達(dá)量的升高。 結(jié)論: 抗細(xì)胞增殖試驗(yàn)結(jié)果表明,上述四種化合物對HeLa細(xì)胞的抗增殖能力大小的比較順序?yàn)镸<,2>>M<,1>>VA>RA。說明VA在體內(nèi)的抗細(xì)胞增殖能力,除了VA原藥本身的作用外,其體內(nèi)代謝產(chǎn)物M<,1>、M<,2>也參與了這一過程,而且活性比原藥更強(qiáng)。 在受體水平上,相對于RA而言,VA對RARα、RARβ、RARγ有微弱的激活作用,而M<,1>、M<,2>對RARα、RA
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