應(yīng)用m-,2- AchR-Gilα融合蛋白鑒別m-,2- AchR的特異性配體.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、前言:我們采用分子生物學(xué)技術(shù),利用baculovirus-insect-cell(Sf9 cells)系統(tǒng)構(gòu)建和表達(dá)m2AchR蛋白與Gilα亞單位的融合蛋白(m2AchR-Gilα),檢測(cè)配體的作用下m2AchR-Gilα融合蛋白的功能及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程中分子間相互作用的機(jī)制和影響因素,尋找選擇性作用于m2AchR亞型的特異性新藥,從而有助于解決因缺乏特異性配體導(dǎo)致的mAchR藥理學(xué)分型落后于分子生物學(xué)分型的問(wèn)題,并為開發(fā)和研究有臨床價(jià)值

2、的mAchR亞型特異性新藥奠定基礎(chǔ).結(jié)論:采用GPCR-G蛋白融合蛋白技術(shù),通過(guò)Sf9細(xì)胞表達(dá)m2AchR蛋白和m2AchR-Gilα融合蛋白,證明了兩者都具有mAchR配體結(jié)合特性,m2AchR-Gilα融合蛋白中的m2AchR與Gilα兩組分間具有偶聯(lián)功能.m2AchR-Gilα融合蛋白對(duì)GDP的親和性決定于m2AchR配體的性質(zhì),激動(dòng)劑使親和性降低,拮抗劑則增高.通過(guò)配體引起的GDP親和性的變化可以判定配體的性質(zhì),有利于篩選和鑒別

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