oxLDL的膠體金免疫層析試紙條的制備.pdf

1、心血管疾病(Cardiovascular disease，CVD)被喻為人類健康的第一大殺手，全球每年死于心血管疾病的人數(shù)約占全球死亡人數(shù)的三分之一。動(dòng)脈粥樣硬化(Atherosclerosis，As)及其并發(fā)癥占了心血管疾病中相當(dāng)大一部分。氧化低密度脂蛋白(Oxidized low density lipoprotein，oxLDL)通過多種途徑促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生、發(fā)展，是As病灶中特有的成份，兩者關(guān)系密切。對(duì)oxLDL的檢測(cè)成為

2、CVD診斷的一個(gè)較為敏感的指標(biāo)，對(duì)病人疾病的診斷和預(yù)防都有積極的意義。 目前檢測(cè)oxLDL的方法最常用的是采用oxLDL單抗的酶聯(lián)免疫吸附法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)。膠體金快速免疫層析法(Colloidal gold enhanced immunochromatography assay，CGEIA)運(yùn)用于快速診斷具有與ELISA相近敏感度，也借助單克隆抗體技術(shù)使其特異性

3、得到保障。并同時(shí)能解決ELISA操作過程相對(duì)復(fù)雜，操作時(shí)間長(zhǎng)，檢測(cè)費(fèi)用較高等缺點(diǎn)。 本實(shí)驗(yàn)通過B淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)成功建立了兩株能穩(wěn)定分泌抗人oxLDL單克隆抗體的細(xì)胞株：A3和E11。通過小鼠腹水誘導(dǎo)產(chǎn)生，飽和硫酸銨沉淀法提純的兩株單抗均有1:25600以上的效價(jià)，其中單抗A3的相對(duì)親和力較E11更高。經(jīng)亞類試劑盒鑒定，兩株單抗均為IgM。同時(shí)，通過實(shí)驗(yàn)掌握了膠體金的制備方法，制得膠體金清涼透明，經(jīng)紫外分光光度計(jì)及透射電鏡檢測(cè)