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1、學校代碼:10225學號:S14556學位論文不同底物誘導下白囊耙齒茵的酶學性質及胞內蛋白質組學分析指導教師姓名:申請學位級別:論文提交日期:授予學位單位:李海峰王秋玉教授東北林業(yè)大學碩士學科專業(yè):遺傳學2014年4月論文答辯日期:2014年6月14日東北林業(yè)大學授予學位日期:2014年6月25日答辯委員會主席:論文評閱人:春多厶櫛景犬學摘要摘要本文以木材白腐真菌白囊靶齒菌為研究材料,探討其在PDA固體平板培養(yǎng)基中生長趨勢,發(fā)王見它與大
2、多數(shù)真菌生長特點一樣,即起始較為緩慢,之后生長迅速呈指數(shù)上升,最后轉為平緩增長。在不同的培養(yǎng)溫度下(23℃、28℃),其生長速度差異較大,在28℃條件下的生長速度高于23℃條件,說明白囊靶齒菌更適合在28℃下生長。采用白樺和云杉木屑為誘導物,非木屑處理為對照,檢測了白囊靶齒菌分泌的木質纖維素酶活性,研究顯示該菌分泌的木質素降解酶中漆酶活性最強,木質素過氧化物酶次之,錳過氧化物酶活性最低。木屑誘導下的白囊靶齒菌產(chǎn)生的木質素降解相關酶酶活性
3、大都高于對照樣品,且錳過氧化物酶和漆酶活性在處理組與對照組間差異達顯著和極顯著水平。纖維素酶酶活中葡萄糖外切酶活性遠大于葡萄糖內切酶活性,而外切酶活性隨培養(yǎng)時間增加而上升,內切酶活性是先上升后下降,兩種酶活總體上趨于穩(wěn)定,表達量較高,受培養(yǎng)時間的影響變化不明顯。利用2DE雙向電泳和考染串聯(lián)質譜技術分析了白囊耙齒菌在不同樹種木屑誘導下的菌體胞內蛋白質組變化,未加木屑的對照組檢測到823個蛋白質點,白樺處理組檢測到673個蛋白質點,云杉處理
4、組檢測到684個蛋白質點。與對照組相比,在白樺和云杉木屑處理組中檢測發(fā)現(xiàn)32個明顯差異蛋白點,有22個蛋白點是上調表達,10個蛋白點下調表達。白樺和云杉處理組各有3個特異差異蛋白點,白樺木材誘導下特異表達蛋白與膜蛋白、膜運輸和能量提供有關,而云杉誘導組特異表達蛋白均與蛋白合成有關。在全部的差異蛋白點中有三個蛋白點與哺乳動物的蛋白質有很高的同源性。而675、506、508、228、和211五個差異蛋白點的質譜結果顯示為假設蛋白,其功能目前
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