棉花中堿誘導(dǎo)蛋白質(zhì)組學(xué)的分析與鑒定.pdf

1、目前土地鹽堿化嚴(yán)重，耕地面積隨之大幅減少，為了擴(kuò)大耕地以應(yīng)對(duì)人口過(guò)快增長(zhǎng)所帶來(lái)的巨大生存壓力，就需要克服鹽堿對(duì)經(jīng)濟(jì)作物的傷害。而鹽堿土地上對(duì)作物最大的危害是堿脅迫。因此揭示耐堿機(jī)制，培育耐堿經(jīng)濟(jì)作物，擴(kuò)大可耕種面積成為必然趨勢(shì)。而棉花作為重要的經(jīng)濟(jì)作物，具有相對(duì)較強(qiáng)的耐鹽堿性，因此，通過(guò)使用分子生物學(xué)的技術(shù)和手段研究棉花的耐堿機(jī)制，進(jìn)而用以提高和改造棉花的耐堿性，培育出更優(yōu)質(zhì)的耐鹽堿棉花品種，對(duì)于鹽堿土地的利用具有重要的理論和應(yīng)用價(jià)值。

2、
　　本文使用耐鹽堿棉花品種中H177作為材料，通過(guò)改良的TCA-丙酮法提取用不同梯度濃度NaHCO3/Na2CO3混合堿液12h、24h處理后的四葉期棉花的葉片總蛋白。經(jīng)過(guò)SDS-凝膠電泳，和POD酶活性的檢測(cè)試驗(yàn)，確定處理?xiàng)l件為60 mM NaHCO3/Na2CO3堿液，處理12h。提取棉花總蛋白進(jìn)行雙向電泳實(shí)驗(yàn)，經(jīng)過(guò)研究分析得到其中有7個(gè)上調(diào)蛋白和15個(gè)下調(diào)蛋白，共22個(gè)顯著差異點(diǎn)。這些蛋白與光合作用、防御機(jī)制、能量代謝等相

3、關(guān)。接著優(yōu)化了處理?xiàng)l件，把處理時(shí)間縮短為6 h，蛋白的范圍縮小到四葉期棉花真葉總蛋白，用相同的實(shí)驗(yàn)方法得到29個(gè)全上調(diào)顯著差異蛋白，除了有光合作用、防御機(jī)制、能量代謝等相關(guān)蛋白，還有有機(jī)酸類(lèi)相關(guān)蛋白。然后，繼續(xù)尋求其根部的差異蛋白，共鑒定出11個(gè)蛋白，其中3個(gè)上調(diào)8個(gè)下調(diào)，對(duì)比發(fā)現(xiàn)得到的差異蛋白種類(lèi)大大有別于真葉中發(fā)現(xiàn)的蛋白。之后針對(duì)6h處理的棉花真葉的29個(gè)上調(diào)蛋白中的5個(gè)差異度較高的蛋白，對(duì)這五個(gè)蛋白進(jìn)行了轉(zhuǎn)錄表達(dá)水平的檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)有