腺胃源傳染性支氣管炎病毒的分離、鑒定及分子流行病學(xué).pdf

1、中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文腺胃源傳染性支氣管炎病毒的分離、鑒定及分子流行病學(xué)姓名：吳延功申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：楊漢春2002.5.1分離毒SDYT9901株理化特性基本一致；中和試驗(yàn)結(jié)果表明：SDQD97株僅與腎型分離毒SD9901株屬于同一血清型的不同亞型而與美國(guó)的腎型毒Gray株、疫苗毒H120株為不同的血清型。／。3腺胃源IBV基質(zhì)蛋白基因、氨基酸和部分纖突量魚(yú)薹固的序列分析與分子流行病學(xué)研究，／參考Geneb

2、ank上的IBV序列，自行設(shè)計(jì)合成了一對(duì)引物，對(duì)從表現(xiàn)TP的病雞腺胃組織中分離獲得的7株IBVRNA進(jìn)行RTPCR擴(kuò)增，擴(kuò)增出含基質(zhì)蛋白(M)的約700bp的基因。通過(guò)對(duì)7株腺胃源IBV分離毒株的基因和氨基酸序列分析，可以根據(jù)病毒的進(jìn)化關(guān)系分為4種類型第一種類型的代表是SDWF97株，其來(lái)源是Ill20疫苗株；第二種類型的代表是$DFC97株，是在疫苗毒株和嗜腎性毒株的基礎(chǔ)上，發(fā)展起來(lái)的一株偏向于向嗜腺胃性毒株發(fā)展的一個(gè)過(guò)渡毒株；第三種

3、類型的代表是LNDL97株是IBV從目前流行的嗜腎性毒株向嗜腺胃性發(fā)展的過(guò)渡產(chǎn)物。第四種類型則是完全的嗜腺胃性毒株，包括SDQD97、SDQD98、SDDY97和SDXJ97株等大多數(shù)TP分離毒株都屬于這一類，與19個(gè)參考毒株屬于不同來(lái)源，可能是引起TP的病原之一參考Genbank上的IBVS基因守列，自行設(shè)計(jì)合成了一對(duì)跨幅約09kb的引物，該區(qū)段包括了S1基因C末端的400bp和S2基因N末端的500bp。利用RTPCR對(duì)15株IBV

4、分離株RNA進(jìn)行RT—PCR擴(kuò)增。序到分析顯示，SOQD97株和12株嗜腎性、嗜呼吸道性分離毒株屬于一個(gè)與參考毒株(包括疫苗毒株)完全不同的群。這些病毒從疫病流行時(shí)間、空間、組織嗜性和病雞品種上都沒(méi)有明顯的規(guī)律可循。另1株從TP病雞中獲得的病毒(SDQD98株)也屬于既不同于國(guó)內(nèi)其它分離毒株，義不同于國(guó)際參考毒株的獨(dú)立一群。腺胃源IBV與我國(guó)目前流行的IBV毒株具有較高的同源性，可能是IBV組織嗜性發(fā)生變化的新變異株。通過(guò)對(duì)我國(guó)近3年來(lái)