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文檔簡介
1、本文采用離子色譜-積分脈沖安培檢測法(HPAEC-IPAD)對茶樹葉中硒代氨基酸進行定性和定量分析,研究硒代氨基酸在茶樹中形態(tài)和含量的分布,及外源硒肥對硒代氨基酸形態(tài)和含量的影響,為富硒茶的生產(chǎn)及利用富硒茶補硒提供科學依據(jù)。
采集天然富硒茶樹的新鮮嫩葉、老葉及根樣品,檢測茶樹不同部位中硒代氨基酸形態(tài)及含量的分布情況,再與普通茶樹相應部位作比較,得出硒代氨基酸在茶樹中不同部位分布規(guī)律;同時也比較總硒量和茶氨酸、硒代氨基酸相關的氨
2、基酸(蛋氨酸、胱氨酸/半胱氨酸)的分布特點。通過土施和噴施不同濃度亞硒酸鈉進行盆栽及大田實驗,研究不同濃度的外源硒肥對茶樹葉中硒代氨基酸形態(tài)及含量的影響;同時也比較茶樹葉中總硒量隨硒肥處理的變化情況及茶氨酸、蛋氨酸和胱氨酸/半胱氨酸含量的變化規(guī)律。在此基礎上,比較外源施硒得到的富硒茶與天然富硒茶中硒代氨基酸形態(tài)和含量作對比,得出生產(chǎn)高含量硒代氨基酸富硒茶的條件。
主要研究結(jié)果如下:
采用離子色譜-積分脈沖安培檢測法(
3、HPAEC-IPAD)不需要進行衍生反應,就可以很好的對茶葉浸提液中硒代氨基酸進行定性和定量分析,三種硒代氨基酸與其它17種常規(guī)氨基酸能夠很好的基線分離,三種硒代氨基酸在其線性范圍內(nèi)的相關系數(shù)R2在0.9994-0.9999之間,相對標準偏差RSD(%)分別為2.47、3.17和3.77,具有很好的相關性。
茶樹葉中硒代甲基半胱氨酸(SeMeCys)是硒代氨基酸存在的主要形態(tài);硒代蛋氨酸(SeMet)和硒代胱氨酸(SeCys)
4、在葉中也存在,但不是主要存在形態(tài),它們存在的時期和含量沒有一定的規(guī)律性,這可能受茶樹體內(nèi)硒半胱氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶(SMT)的作用。三種硒代氨基酸總量在茶樹不同部位中分布為老葉>根>嫩葉;與總硒量的分布情況一致;并且天然富硒茶樹和普通茶樹中三種硒代氨基酸和總硒量分布規(guī)律相同。茶氨酸含量在天然富硒茶樹和普通茶樹不同部位中分布情況也相同,表現(xiàn)為根>嫩葉>老葉;胱氨酸/半胱氨酸存在于嫩葉和根中,且含量相差不大,老葉中未檢出;蛋氨酸在茶樹三種部位中均
5、未檢出。
盆栽試驗結(jié)果表明外源硒肥處理的茶樹葉中,硒代氨基酸也主要以硒代甲基半胱氨酸(SeMeCys)形態(tài)存在,且在一定范圍內(nèi)隨著噴施和土施亞硒酸鈉濃度的增加,硒代甲基半胱氨酸(SeMeCys)含量呈現(xiàn)先增加后降低的趨勢,茶樹葉中總的硒代氨基酸的含量變化與此變化相符;茶樹葉中總的硒代氨基酸在噴施180μgSe·ml-1、十二天左右時采摘最為理想,所含硒代氨基酸總量為336.1μg·g-1,但噴施濃度不宜高于180μgSe·ml
6、-1,否則茶樹葉面上會出現(xiàn)褐色的斑點及焦化,影響其外觀和品質(zhì);土施亞硒酸鈉時以0.25-0.5mgSe·kg-1,施后6個月采摘較佳,茶樹葉中總的硒代氨基酸的含量為293.9-471.7μg·g-1,大田試驗結(jié)果與盆栽試驗結(jié)果相符。茶樹中總硒的量隨噴施亞硒酸鈉濃度的增加而增加,而隨土施亞硒酸鈉濃度的增加到一定含量后,增加不明顯。葉面噴施不同濃度亞硒酸鈉后,對茶樹葉中茶氨酸的含量有所提高,特別是噴施Se濃度為60μg·ml-1和120μg
7、·ml-1,6-18天后茶樹葉中茶氨酸含量是空白中含量的2-3倍,而噴施濃度過高、噴施時間過長茶樹中茶氨酸的含量都有降低的趨勢;土施不同濃度亞硒酸鈉后茶樹葉中茶氨酸含量在3-6月提高并不明顯,尤其是土施低濃度Se,7個月以后開始有明顯的提高。因此,外源噴施和土施亞硒酸鈉生產(chǎn)富硒茶的理想采摘時期也是相應條件下茶氨酸含量較高的時期。外源噴施和土施不同濃度亞硒酸鈉后,蛋氨酸和胱氨酸/半胱氨酸的變化沒有規(guī)律性,有的甚至未檢出;它們與硒代蛋氨酸(
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