富硒食用菌中硒含量的測(cè)定及賦存形態(tài)研究.pdf

1、硒是人體必須的微量元素之一，對(duì)人體健康具有重大的意義。然而硒的分布極其不均勻，全世界有2/3的地區(qū)缺硒，僅靠天然食物中的硒不足以滿(mǎn)足人體的正常需要，無(wú)機(jī)硒在毒性和生物利用度方面又不及有機(jī)硒，因此通過(guò)生物轉(zhuǎn)化和合成有機(jī)硒化合物來(lái)開(kāi)發(fā)有機(jī)硒源，生產(chǎn)高效安全的補(bǔ)硒食品更能引起研究者的興趣。 本論文以液體發(fā)酵培養(yǎng)的富硒食用菌為實(shí)驗(yàn)原料，對(duì)硒的測(cè)定方法以及兩種主要硒化合物的提取工藝進(jìn)行了研究，并對(duì)硒化合物的生物活性進(jìn)行了初步的探討，具體實(shí)

2、驗(yàn)設(shè)計(jì)如下： 首先，以3，3′-二氨基聯(lián)苯胺為顯色劑，研究了分光光度法測(cè)定食用菌中的微量元素硒。實(shí)驗(yàn)確定掩蔽劑EDTA用量為25mg/mL，反應(yīng)時(shí)間為50min，絡(luò)合酸度和萃取酸度分別控制pH在2-3和6.5-7.5范圍內(nèi)；運(yùn)用超聲波破碎技術(shù)，通過(guò)透析袋處理，得到樣品的有機(jī)硒含量達(dá)到79.12％。 其次，對(duì)食用菌中的硒多糖和硒蛋白的提取工藝進(jìn)行了系統(tǒng)的研究。論文首先從單因素實(shí)驗(yàn)出發(fā)，對(duì)各實(shí)驗(yàn)參數(shù)進(jìn)行了選擇，接著在單因素實(shí)

3、驗(yàn)的基礎(chǔ)上，根據(jù)Box-Benhnken的中心組合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原理，采用響應(yīng)面分析法，依據(jù)回歸分析確定各工藝的最佳條件。對(duì)于蛋白質(zhì)的提取，最佳工藝條件為：NaOH濃度0.07mol/L，提取溫度60.6℃，料液比(w/v)為1：25，提取時(shí)間為8h，提取次數(shù)為2次，在此條件下蛋白提取的得率為30.17％。 對(duì)于多糖的提取，實(shí)驗(yàn)確定的最佳工藝條件：超聲處理的時(shí)間為30min，提取時(shí)間為3h，醇析時(shí)乙醇的加入量為2倍濃縮液體積，提取溫度

4、為73.7℃，pH值為4.2，料液比(w/v)為1：37，在此條件下多糖提取的得率為7.83％。另外還運(yùn)用正交實(shí)驗(yàn)法對(duì)多糖的脫蛋白和脫色兩個(gè)初步純化工藝進(jìn)行了研究，確定活性炭脫色的最佳條件為：溫度為60℃，pH為3.0，時(shí)間為40min，粉末活性炭用量為3％；酶法脫蛋白工藝條件為：酶用量為0.1％，溫度為55℃，時(shí)間為0.5h，pH為6.5。 最后，分別采用還原力、羥自由基、超氧陰離子自由基、[DPPH]體系和脂質(zhì)過(guò)氧化體系等幾