富硒食用菌中硒含量的測定及賦存形態(tài)研究.pdf

1、硒是人體必須的微量元素之一，對人體健康具有重大的意義。然而硒的分布極其不均勻，全世界有2/3的地區(qū)缺硒，僅靠天然食物中的硒不足以滿足人體的正常需要，無機硒在毒性和生物利用度方面又不及有機硒，因此通過生物轉(zhuǎn)化和合成有機硒化合物來開發(fā)有機硒源，生產(chǎn)高效安全的補硒食品更能引起研究者的興趣。 本論文以液體發(fā)酵培養(yǎng)的富硒食用菌為實驗原料，對硒的測定方法以及兩種主要硒化合物的提取工藝進行了研究，并對硒化合物的生物活性進行了初步的探討，具體實

2、驗設(shè)計如下： 首先，以3，3′-二氨基聯(lián)苯胺為顯色劑，研究了分光光度法測定食用菌中的微量元素硒。實驗確定掩蔽劑EDTA用量為25mg/mL，反應(yīng)時間為50min，絡(luò)合酸度和萃取酸度分別控制pH在2-3和6.5-7.5范圍內(nèi)；運用超聲波破碎技術(shù)，通過透析袋處理，得到樣品的有機硒含量達到79.12％。 其次，對食用菌中的硒多糖和硒蛋白的提取工藝進行了系統(tǒng)的研究。論文首先從單因素實驗出發(fā)，對各實驗參數(shù)進行了選擇，接著在單因素實

3、驗的基礎(chǔ)上，根據(jù)Box-Benhnken的中心組合實驗設(shè)計原理，采用響應(yīng)面分析法，依據(jù)回歸分析確定各工藝的最佳條件。對于蛋白質(zhì)的提取，最佳工藝條件為：NaOH濃度0.07mol/L，提取溫度60.6℃，料液比(w/v)為1：25，提取時間為8h，提取次數(shù)為2次，在此條件下蛋白提取的得率為30.17％。 對于多糖的提取，實驗確定的最佳工藝條件：超聲處理的時間為30min，提取時間為3h，醇析時乙醇的加入量為2倍濃縮液體積，提取溫度

4、為73.7℃，pH值為4.2，料液比(w/v)為1：37，在此條件下多糖提取的得率為7.83％。另外還運用正交實驗法對多糖的脫蛋白和脫色兩個初步純化工藝進行了研究，確定活性炭脫色的最佳條件為：溫度為60℃，pH為3.0，時間為40min，粉末活性炭用量為3％；酶法脫蛋白工藝條件為：酶用量為0.1％，溫度為55℃，時間為0.5h，pH為6.5。 最后，分別采用還原力、羥自由基、超氧陰離子自由基、[DPPH]體系和脂質(zhì)過氧化體系等幾