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文檔簡介
1、<p> 發(fā)菜論文:發(fā)菜中麥芽寡糖基海藻糖水解酶基因的克隆及其在脅迫條件下的響應(yīng)</p><p> 【中文摘要】發(fā)菜是一種極端環(huán)境下生長的陸生藍(lán)藻,對逆境具有極強的適應(yīng)力,因此是抗逆性研究中一種典型的植物資源,對其抗逆性研究具有重要的意義。目前人們對發(fā)菜適應(yīng)極端環(huán)境的研究已經(jīng)受到人們的廣泛關(guān)注,但是還沒有突破性的進(jìn)展。本研究以發(fā)菜這一具有很強抗逆性的絲狀藍(lán)藻作為研究材料,應(yīng)用基因工程技術(shù),從發(fā)菜中克
2、隆得到合成海藻糖途徑的一個重要酶:麥芽寡糖基海藻糖水解酶MTH,轉(zhuǎn)入大腸桿菌中進(jìn)行重組表達(dá),并對蛋白進(jìn)行了純化和酶活測定。同時,通過干旱和鹽脅迫發(fā)菜,檢測其NfMTS和NfMTH酶的表達(dá)量及相同條件下海藻糖和蔗糖的含量情況。得到以下結(jié)果和結(jié)論:通過設(shè)計簡并引物,從發(fā)菜(Nostoc flaglliforme)中克隆出MTH的基因TreZ,對該基因序列測序表明開讀框全長1848 bp,編碼的蛋白質(zhì)有615個氨基酸。生物信息學(xué)分析得到該基因
3、編碼的氨基酸序列包含四個麥芽寡糖基海藻糖水解酶的高度保守區(qū)域。將該基因在大腸桿菌中進(jìn)行表達(dá),通過SDS-PAGE檢測到在0.5 mM IPTG誘導(dǎo)條件下該基因在大腸桿菌中有很高的表達(dá)量,分子質(zhì)量約為70 kD。所得的重組蛋白經(jīng)過純化后,用麥芽六糖作為底物進(jìn)行</p><p> 【英文摘要】Nostoc flaglliforme which distributed in west and northwest of
4、 China widely is one of valuable terrigenous cyanobacterias. Its’living envioroment is extremely atrocious.A genomic DNA fragment encoding a putative maltooligosyltrehalose trehalohydrolase (NfMTH) for trehalose biosynth
5、esis was cloned by the degenerate primer-PCR from cyanobacterium Nostoc flagelliforme. The ORF of NfMTH is 1,848 bp in length and encodes 615 amino acid residues constituting a 70 kDa protein.The deduced amino ac</p&g
6、t;<p> 【關(guān)鍵詞】發(fā)菜 海藻糖 麥芽寡糖基海藻糖水解酶 脅迫</p><p> 【英文關(guān)鍵詞】Nostoc Flagelliforme Trehalose Maltooligosyltrehalose trehalohydrolase Stress</p><p> 【索購全文】聯(lián)系Q1:138113721 Q2:139938848 </p
7、><p> 同時提供論文寫作一對一輔導(dǎo)和論文發(fā)表服務(wù).保過包發(fā)</p><p> 【目錄】發(fā)菜中麥芽寡糖基海藻糖水解酶基因的克隆及其在脅迫條件下的響應(yīng)摘要6-8Abstract81. 綜述11-261.1 發(fā)菜的概述11-161.2 海藻糖概述16-241.3 發(fā)菜中海藻糖的研究24-251.4 本論
8、文的研究目的和意義25-262. 材料與方法26-422.1 材料26-282.2 方法28-422.3 技術(shù)路線423. 結(jié)果與分析42-623.1 發(fā)菜總DNA 的提取42-433.2 TreZ 目的基因的克隆43-453.3 生物信息學(xué)分析45-513.4 pET22b-TreZ 基因載體的構(gòu)建51-5
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