免疫分型教程

1、<p>　　40-免疫分型教程(1)</p><p><b>　　正常骨髓免疫分型</b></p><p>　　上圖是正常骨髓經(jīng)CD45、CD71、CD33染色后組成的CD45/SSC、CD71/CD33雙參數(shù)散點(diǎn)圖；通過這兩個(gè)組合，能夠分辨骨髓的正常細(xì)胞、檢查是否有異常細(xì)胞存在、評(píng)估細(xì)胞的成熟情況。</p><p>　　CD45/S

2、SC圖中可見：</p><p>　　1，CD45強(qiáng)陽(yáng)性SSC低信號(hào)的細(xì)胞群為淋巴細(xì)胞（褐色細(xì)胞群體）；</p><p>　　2，中等強(qiáng)度的CD45表達(dá)，SSC信號(hào)最強(qiáng)的細(xì)胞群體為粒細(xì)胞（藍(lán)色及紅色細(xì)胞群體）；</p><p>　　3，CD45表達(dá)與SSC信號(hào)介于淋巴細(xì)胞與粒細(xì)胞之間的是單核細(xì)胞群體（綠色細(xì)胞群體）；</p><p>　　4，C

3、D45陰性，SSC信號(hào)最低的有核紅細(xì)胞和細(xì)胞碎片；</p><p>　　CD33/CD71圖中可見：</p><p>　　1，CD33表達(dá)最強(qiáng)的單核細(xì)胞群體（綠色）；</p><p>　　2，粒細(xì)胞CD33表達(dá)較單核弱，不成熟粒表達(dá)CD71，成熟后不表達(dá)。</p><p>　　3，淋巴細(xì)胞、有核細(xì)胞和細(xì)胞碎片不表達(dá)CD33、CD71。<

4、/p><p>　　CD11B/CD15圖可用來評(píng)估髓系細(xì)胞向單核、粒分化的程度（隨著髓細(xì)胞成熟，細(xì)胞逐步獲得CD11B，粒細(xì)胞高表達(dá)CD15）：</p><p>　　1，單核細(xì)胞（綠色）高表達(dá)CD11B，CD15中等到表達(dá)；</p><p>　　2，粒細(xì)胞（藍(lán)色及橘紅色）高表達(dá)CD15，藍(lán)色成熟粒CD11B表達(dá)較橘紅色不成熟粒細(xì)胞強(qiáng)，幼稚髓細(xì)胞僅表達(dá)CD15而無(wú)CD11

5、B。</p><p>　　3，T、B淋巴細(xì)胞不表達(dá)CD15、CD11B，NK細(xì)胞表達(dá)CD11B而無(wú)CD15（紅色細(xì)胞）。</p><p>　　4，有核紅細(xì)胞及碎片不表達(dá)CD15和CD11B。 </p><p>　　根據(jù)骨髓細(xì)胞CD45/SSC圖中分布情況設(shè)門圈定各類細(xì)胞：</p><p>　　R1門為成熟淋巴細(xì)胞；</p>&l

6、t;p>　　R2門為正常單核細(xì)胞位置；</p><p>　　R3門正常粒細(xì)胞位置；</p><p>　　R4門為幼稚淋巴細(xì)胞出現(xiàn)位置；</p><p>　　R5門為有核紅細(xì)胞或細(xì)胞碎片位置；</p><p>　　R6門為幼稚髓細(xì)胞出現(xiàn)位置；</p><p>　　白血病細(xì)胞通常會(huì)在R4、R6兩門位置處出現(xiàn)。<

7、/p><p><b>　　M0免疫分型</b></p><p>　　M0:急性髓細(xì)胞白血病微分化型 原始細(xì)胞在光鏡下類似L2型細(xì)胞,核仁明顯,胞漿透明,嗜堿性,無(wú)嗜天青顆粒及Auer小體,髓過氧化酶(MPO)及蘇丹黑B陽(yáng)性細(xì)胞<3%;電鏡下,MPO(+);CD33或CD13等髓系標(biāo)志可呈(+),淋巴系抗原通常為(-),但有時(shí)CD7+,TdT+;部分急非淋白血病可表現(xiàn)

8、CD7+,TdT。</p><p>　　形態(tài)學(xué)：幼稚細(xì)胞占骨髓有核細(xì)胞90%以上；腫瘤細(xì)胞不出現(xiàn)AUER小體；粒細(xì)胞缺少，MPO或蘇單黑染色陰性。</p><p>　　遺傳學(xué)：染色體常有復(fù)雜的異常，特別是5和7號(hào)染色體。當(dāng)病例伴T（9；22）時(shí)會(huì)出現(xiàn)淋系抗原。</p><p>　　幼稚細(xì)胞群體的FS和SS信號(hào)低，在CD45/SS點(diǎn)圖中特征性地與幼稚淋巴細(xì)胞區(qū)域相連。

9、幼稚細(xì)胞至少表達(dá)一種骨髓抗原：CD13，CD33，但完全缺乏髓系成熟分化抗原：CD11B，CD15和CD16。相當(dāng)一部分病例TDT陽(yáng)性，但在腫瘤細(xì)胞上分布不均。腫瘤細(xì)胞通常淋系抗原陰性，但有時(shí)也會(huì)表達(dá)CD7或CD4；HLA-DR通常陽(yáng)性，CD34則為陰性。有學(xué)者指出伴CD7和CD34同時(shí)表達(dá)的病人預(yù)后不佳。檢測(cè)胞漿內(nèi)MPO比CD33/CD13聯(lián)合檢測(cè)更為敏感。M0中MPO陽(yáng)性率一般小于3%，如大于3%則要判定為M1。</p>

10、<p>　　M0:HLA-DR+,CD34+,CD13+/-,MPO+,CD14-,CD11b-,TdT-/+to+/-</p><p>　　骨髓樣本類似純化的培養(yǎng)細(xì)胞，在CD45/SSC圖中可見到數(shù)量占絕大多數(shù)的一群幼稚細(xì)胞群體。這群異常細(xì)胞在的SSC信號(hào)較低，大小中等。幼稚細(xì)胞CD19、CD34陰性，但同時(shí)表達(dá)CD13和CD33。CD13表達(dá)稍弱，且抗原表達(dá)較CD33不均一。白血病細(xì)胞占了所有細(xì)

11、胞群體的96%。HLA-DR在這些髓系細(xì)胞上不表達(dá)。</p><p>　　這些幼稚細(xì)胞表型的情況是：CD13陽(yáng)性，CD33陽(yáng)性，CD34陰性，HLA-DR陰性。這個(gè)表型與AML-M3相以。</p><p>　　腫瘤細(xì)胞不表達(dá)CD71、CD117、CD18、CD11b和CD15。</p><p>　　CD64是陰性，但CD14表達(dá)。CD14表達(dá)強(qiáng)度比較弱與CD13相似

12、。</p><p>　　T細(xì)胞標(biāo)志物CD2、CD5、CD3和CD7都不表達(dá)。在圖中可觀察到殘存的一些T細(xì)胞。</p><p>　　與陰性對(duì)照相比，CD4弱陽(yáng)性表達(dá)。</p><p>　　診斷：AML微分化型，CD34和HLA-DR陰性。</p><p>　　實(shí)驗(yàn)室進(jìn)一步診斷：MPO（免疫組化）陽(yáng)性，NSE陰性，46XY，t(3;5)(q25;

13、q34)</p><p><b>　　重要說明：</b></p><p>　　本例中白血病細(xì)胞免型表型為：CD34-、HLA-DR-，CD13+，CD33++，表面看與AML-M3相似。在許多幼稚細(xì)胞胞漿內(nèi)存在的顆粒會(huì)導(dǎo)致AML-M3的誤診。但FCM的數(shù)據(jù)提供了一些有價(jià)值的信息避免這個(gè)錯(cuò)誤。具體總結(jié)如下：</p><p>　?。?）表達(dá)CD14

14、（克隆號(hào)leu-M3），盡管表達(dá)有所降低；（2）SSC信號(hào)降低并且相對(duì)分散。這一點(diǎn)十分重要，因?yàn)锳ML-M3v的SSC信號(hào)比較集中，甚至M3v細(xì)胞中帶有顆粒。另一重要信息是CD13表達(dá)下降甚至缺失而CD33強(qiáng)陽(yáng)性（一種異常的CD13/CD33表達(dá)模式）。有時(shí)AML-M3可能會(huì)缺失表達(dá)CD13。對(duì)于這些疑難病例需要借助分子遺傳學(xué)和細(xì)胞遺傳學(xué)診斷工具來建立正確的診斷。</p><p>　　其他標(biāo)記物如：B cells

15、 (CD19, CD20, Kappa, Lambda), CD10(Calla), CD5 (T cells), CD41 (platelet)都是陰性。</p><p>　　光散射圖中顯示在前向散射光和表示顆粒度的側(cè)向散射光有一群處于中間位置的細(xì)胞。這與組織學(xué)檢測(cè)結(jié)果相一致。（暫無(wú)圖）</p><p>　　將光散射圖中的異常細(xì)胞放置于CD45/CD14上顯示發(fā)現(xiàn)CD45陽(yáng)性并CD14陰

16、性（99%）。CD45表達(dá)強(qiáng)度低于成熟淋巴細(xì)胞，可能是由髓系細(xì)胞和未成熟幼稚細(xì)胞組成。 （暫無(wú)圖）</p><p>　　在HLADR/CD3等高圖中發(fā)現(xiàn)其中大部分DR陽(yáng)性（81%）并且CD3陰性（T細(xì)胞受體）。這個(gè)表型可見于活化的T細(xì)胞和成熟B細(xì)胞（CD45強(qiáng)陽(yáng)性）。DR表達(dá)于絕大多數(shù)髓系細(xì)胞、B細(xì)胞和活化的T細(xì)胞。</p><p>　　CD34/CD38圖中顯示細(xì)胞CD34陰性并且CD3

17、8陽(yáng)性。CD38可見到漿細(xì)胞、前B細(xì)胞、單核細(xì)胞、ALL細(xì)胞和絕大多數(shù)AML細(xì)胞。此處可排隊(duì)漿細(xì)胞的可能性（CD45陰性），前B細(xì)胞還無(wú)法排除，單核細(xì)胞可排除（CD14陰性）。</p><p>　　CD13/CD15等高圖中顯示大部分細(xì)胞（63%）髓系抗原CD13/CD15陰性。但此處提供了一絲線索，因?yàn)橛行┘?xì)胞（30%）表達(dá)低水平CD15。絕大部分AML M1-M6細(xì)胞同時(shí)表達(dá)CD13和CD15。</p&

18、gt;<p>　　從CD33/TdT圖中可以肯定這些細(xì)胞源自髓系（CD33陽(yáng)性）。無(wú)細(xì)胞表達(dá)TdT。這表明這些細(xì)胞是處于極早期的髓系細(xì)胞，可能AML-M0/M1。</p><p>　　CD11b/GPA雙參數(shù)圖中也證實(shí)了這些細(xì)胞早期髓系的屬性。GPA在這些細(xì)胞上弱表達(dá)。這種情況可見于早期髓系干細(xì)胞。CD11b可見于單核細(xì)胞、粒細(xì)胞，NK細(xì)胞不表達(dá)此抗原。</p><p>　　

19、這些細(xì)胞還同時(shí)表達(dá)CD7。這使人感覺有誤，但現(xiàn)已知早期髓系白血病細(xì)胞可偶然同時(shí)表達(dá)CD7。</p><p>　　將這些結(jié)果綜合來看支持M0或M1的診斷。要用流式細(xì)胞儀來區(qū)分M0和M1現(xiàn)還有困難。所以還要結(jié)合組織學(xué)檢測(cè)的結(jié)論，如發(fā)現(xiàn)有MPO陽(yáng)性則支持M1，如陰性則為M0。</p><p><b>　　M1免疫分型</b></p><p>　　幼稚

20、細(xì)胞成群，RALS信號(hào)弱。M1與M0很難區(qū)分，但M1 細(xì)胞大小及顆粒度較M0稍大，與原粒細(xì)胞接近。</p><p>　　至少伴隨一種髓系抗原：CD13或CD33。</p><p>　　高表達(dá)HLA-DR，CD34陽(yáng)性但較M0弱,>3%的幼稚細(xì)胞表達(dá)MPO，較M0多。</p><p>　　不表達(dá)CD11B，CD15，CD16等。</p><p

21、>　　M1:CD11B-/+,HLA-DR+,CD13+,CD33+,CD34+,CD14+,MPO+,TdT-/+to+/-</p><p><b>　　M2免疫分型</b></p><p>　　CD45/RALS圖中細(xì)胞分布廣泛與M1不同，這是因?yàn)镸2細(xì)胞已進(jìn)一 步分化幼稚細(xì)胞減少，粒細(xì)胞增多并與BLAST WINDOWS區(qū)域內(nèi)細(xì) 胞相連。因細(xì)胞沒有明顯分群

22、，很難將異常細(xì)胞與正常相區(qū)分， 故設(shè)立多個(gè)門進(jìn)行分析檢測(cè)其成熟度抗原的表達(dá)情況。</p><p>　　M2免疫表型與M1類似，HLA-DR，CD33，CD13陽(yáng)性。上圖中可見 幼稚細(xì)胞CD33與CD71表達(dá)均比成熟粒細(xì)胞強(qiáng)。CD13表達(dá)強(qiáng)于CD33。</p><p>　　M2腫瘤細(xì)胞弱表達(dá)CD15與CD11B,說明細(xì)胞已分化。 CD34表達(dá)顯著降低。</p><p>

23、;　　M2腫瘤細(xì)胞不表達(dá)CD5,CD7和TdT等抗原，如病例伴t(8;21),則 經(jīng)常表達(dá)CD19偶表達(dá)CD56。一般腫瘤細(xì)胞MPO強(qiáng)陽(yáng)性。偶見形 態(tài)為M2并伴t(8;21)，但CD13-，CD33-，CD14-，而MPO+。</p><p>　　細(xì)胞分布廣泛，幼稚細(xì)胞較M1少。</p><p>　　CD13和CD33陽(yáng)性，且CD13表達(dá)高于CD33。</p><p&g

24、t;　　HLA-DR陽(yáng)性，CD15弱陽(yáng)性。</p><p>　　M2腫瘤細(xì)胞伴t（8，21）CD19陽(yáng)性。</p><p><b>　　M3免疫分型</b></p><p>　　上圖為M3V，少顆粒型早幼粒白血病細(xì)胞，細(xì)胞中顆粒少RALS信號(hào) 低而集中，SS座標(biāo)上出現(xiàn)大量腫瘤細(xì)胞。腫瘤細(xì)胞大，F(xiàn)S信號(hào)強(qiáng)。 通過CD45/RALS雙參圖可辨別出M

25、3與M3V。下為經(jīng)典M3多顆粒細(xì)胞的 CD45/RALS和SS/FS圖。</p><p>　　M3與M3V在免疫表型上無(wú)區(qū)別。</p><p>　　M3腫瘤細(xì)胞特征性地不表達(dá)髓系早期標(biāo)志物CD34和HLA-DR；部分病例中CD9特征性地陽(yáng)性，但不是完全特異。CD2在M3與M3V中會(huì)出陽(yáng)性表達(dá)，在HLA-DR陰性的病例中，與染色體t(15,17)異常相關(guān)。</p><p&

26、gt;　　腫瘤細(xì)胞CD33表達(dá)比正常粒細(xì) 胞強(qiáng)與正常單核細(xì)胞相似， CD13表達(dá)多樣。腫瘤細(xì)胞不表 達(dá)晚期髓細(xì)胞分化抗原CD15， CD16和CD11B。腫瘤細(xì)胞完全不表達(dá)CD15，與正常早幼粒細(xì)胞表達(dá)CD15相區(qū)別；正常早幼粒細(xì)胞細(xì)胞周期中含高比例S期細(xì)胞，而腫瘤細(xì)胞中幾乎不見細(xì)胞周期。</p><p>　　腫瘤細(xì)胞MPO陽(yáng)性，上圖中MPO與LACTOFERIN雙染來區(qū)分成熟粒 細(xì)胞。腫瘤細(xì)胞除表達(dá)CD2外，很

27、少表達(dá)T或B系抗原。</p><p>　　M3腫瘤細(xì)胞因其胞漿內(nèi)多顆粒，細(xì)胞具有很強(qiáng)的自發(fā)熒光。</p><p>　　M3:CD33+,CD13+,MPO+,CD34-,HLA-DR-,CD11b-,CD14-,CD15-,TdT-</p><p><b>　　M4免疫分型</b></p><p>　　典型的M4病例CD

28、45/RALS圖中會(huì)出現(xiàn)一群異常的單核細(xì)胞和一群骨髓幼稚細(xì)胞，腫瘤細(xì)胞較M0，M1細(xì)胞的FS和SS信號(hào)增強(qiáng)。有時(shí)這兩群細(xì)胞會(huì)相互疊加占據(jù)BLAST WINDOWS和成熟單核細(xì)胞位置，故難圈出獨(dú)立成群的腫瘤細(xì)胞。對(duì)于M4病例一般都設(shè)多個(gè)門對(duì)異常細(xì)胞進(jìn)行分析，且每個(gè)異常細(xì)胞群根據(jù)其成熟度的不同，表型也可能互不相同。本例為M4EO，增多的嗜酸細(xì)胞RALS信號(hào)與早幼粒相似CD45信號(hào)與單核細(xì)胞相似，本例中為R4門中紫色細(xì)胞。</p>

29、;<p>　　幼稚細(xì)胞群表達(dá)CD34，HLA-DR，而異常單核細(xì)胞則CD34陰性，HLA-DR陽(yáng)性。</p><p>　　幼稚細(xì)胞CD33陽(yáng)性，CD14陰性，而異常單核細(xì)胞則為CD33陽(yáng)性，CD14，CD64陽(yáng)性。CD64表達(dá)如象本圖中強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)則為單核細(xì)胞特異性標(biāo)志。</p><p>　　M4腫瘤細(xì)胞在CD11B/CD15圖中會(huì)特征性分布如上，存在幼稚細(xì)胞及各期的粒細(xì)胞及單

30、核細(xì)胞。CD2表達(dá)與M4EO有很大相關(guān)性，可能與16號(hào)染色體異常有關(guān)。</p><p>　　M4/blast population: CD13+,CD33+,CD34+,HLADR+,CD11b-,CD14-M4/abnomal monocytic cell:CD13+,CD33+,CD34-,HLA-DR+,CD11b+,CD14+/-,CD4+/-</p><p><b>

31、　　M5免疫分型</b></p><p>　　M5腫瘤細(xì)胞從細(xì)胞大小、顆粒度和CD45表達(dá)都向成熟單核細(xì)胞過渡，形成一大細(xì)胞群體。M5分為二個(gè)亞型M5a和M5b，前者細(xì)胞稍大，與成熟單相比CD45表達(dá)弱但不獨(dú)立成群。</p><p>　　髓系細(xì)胞的分化情況可從CD15/CD11B雙參數(shù)圖中觀察,本例中腫瘤細(xì)胞CD15較平常高,但低于右上角黑色的粒細(xì)胞.不成熟的單核細(xì)胞CD11

32、B表達(dá)弱.如出現(xiàn)CD33陽(yáng)性，CD13，CD34陰性。</p><p>　　M5腫瘤細(xì)胞通常高表達(dá)CD33，CD13表達(dá)多樣。CD4是髓系幼稚細(xì)胞向單核系分化的敏感指標(biāo)。</p><p>　　CD14一般表達(dá)在成熟單核細(xì)胞上，本例中腫瘤細(xì)胞CD14陰性，CD64陽(yáng)性。AMML病例中，CD64在單核細(xì)胞上表達(dá)特別強(qiáng)。本例中CD61弱陽(yáng)性,這種情況是由于幼稚細(xì)胞與血小板粘附造成的。</p

33、><p>　　M5a: HLA-DR+,CD11b+/-,CD34+,CD33+,CD13+,CD14-/+,CD4+/-</p><p>　　M5b: HLA-DR+,CD11b+,CD34-,CD13+,CD16+/-,CD14+,CD4+/-</p><p><b>　　M6免疫分型</b></p><p>　　本例中

34、可見兩群幼稚細(xì)胞，M6的定義是紅系祖細(xì)胞占骨髓幼稚細(xì)胞群體的50%強(qiáng)，而其他系別的幼稚細(xì)胞可占30%以上。固診斷M6時(shí)要依據(jù)形態(tài)學(xué)紅系細(xì)胞的數(shù)量來確定，如僅根據(jù)免疫分型很難得出正確診斷，必須結(jié)合形態(tài)計(jì)數(shù)幼稚細(xì)胞數(shù)量來確定。以上是典型的M6免疫分型圖，出現(xiàn)兩群幼稚細(xì)胞。</p><p>　　腫瘤細(xì)胞可通過CD71強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)加以確認(rèn)，在一些紅細(xì)胞稍成熟病例中血型糖白A陽(yáng)性。HLA-DR，CD34和CD33或CD13通

35、常陽(yáng)性。</p><p>　　很多M6病例中會(huì)出現(xiàn)一群髓系幼稚細(xì)胞，如本例中的紅色細(xì)胞群體。</p><p>　　M6;CD71+,GP-A+,CD34+/-,HLA-DR+/-,CD13+/-,CD33+/-,CD34+/-,CD14-,CD11b-</p><p><b>　　M7免疫分型</b></p><p>　

36、　本例中幼稚細(xì)胞CD45/RALS信號(hào)都不強(qiáng)。與B-ALL，M6的腫瘤細(xì)胞相似。</p><p>　　M7腫瘤細(xì)胞表達(dá)CD61和CD41，髓系抗原表達(dá)多樣。成熟血小板粘附地白細(xì)胞也會(huì)表達(dá)CD41和CD61，這時(shí)會(huì)對(duì)診斷產(chǎn)生影響，此時(shí)要加做CD62來確認(rèn)是否為成熟血小板粘附造成CD41或CD61陽(yáng)性。</p><p>　　本例CD34陽(yáng)性，CD71弱陽(yáng)，其他系別抗原不表達(dá)。</p>

37、;<p>　　其他系別抗原均為陰性，與M0、M1相似。</p><p>　　M7:HLA-DR+,CD34+,CD33+/-,CD14-,MPO-,TdT-</p><p><b>　　TALL 免疫分型</b></p><p>　　T-ALL的腫瘤細(xì)胞CD45表達(dá)較B-ALL細(xì)胞強(qiáng)，腫瘤細(xì)胞在CD45/SSC圖中可能會(huì)出現(xiàn)在BL

38、AST WINDOWS或單核細(xì)胞區(qū)或 與正常淋巴細(xì)場(chǎng)胞相混。</p><p>　　本例中腫瘤細(xì)胞CD10陽(yáng)性，約三分之一的T-ALL會(huì)出現(xiàn)該 現(xiàn)象，但CD19絕對(duì)陰性。本例CD34陽(yáng)性，約40%的T-ALL的腫瘤細(xì)胞CD34陽(yáng)性，與細(xì)胞是否表達(dá)原始或成熟表型無(wú)關(guān)。</p><p>　　T-ALL腫瘤細(xì)胞表面CD3經(jīng)常陰性,但如用PE標(biāo)記的CD3抗體則經(jīng)常能檢測(cè)到弱陽(yáng)性。CD3/CD5雙參數(shù)

39、圖中，腫瘤細(xì)胞總出現(xiàn)在正常T細(xì)胞以外的位置上,上圖中黑色陽(yáng)性顆粒為正常T細(xì)胞.腫瘤細(xì)胞CD4/CD8表達(dá)多樣化,但是總與正常T細(xì)胞的表達(dá)不兩只,如發(fā)現(xiàn)CD4/CD8雙陽(yáng)性則提示為T-ALL。</p><p>　　T-ALL最敏感的指標(biāo)是CD7,但其特異不強(qiáng)有近30%的AML同樣陽(yáng)性。當(dāng)CD7與HLA-DR聯(lián)用時(shí)其特異性增強(qiáng)，許多T-ALL，特別是在兒童，CD7強(qiáng)陽(yáng)性而不表達(dá)HLA-DR，而在AML中CD7弱表達(dá)并

40、伴HLA-DR陽(yáng)性。</p><p>　　T-ALL因與T細(xì)胞的成熟度相關(guān)，可被分為三期：</p><p>　　pre-thymic：CD7+，CD1a-，CD4/8-，CD3-；</p><p>　　thymic:CD7+，CD4/8+，CD3-；</p><p>　　matrue:CD3+,CD1a-;</p><p&

41、gt;　　原始T細(xì)胞ALL與AML很難區(qū)分，要加測(cè)胞漿內(nèi)CD3。</p><p>　　T-ALL最常見的表型是：CD2，CD5，CD7，CD1，CD4/8雙陽(yáng)性，CD3弱陽(yáng)性，TdT強(qiáng)陽(yáng)性。次其次為：CD2，CD5，CD7 和TdT強(qiáng)陽(yáng)性。再次為：CD2，CD5，CD7伴CD4或CD8部分表達(dá)，CD3表達(dá)少并少量表達(dá)TdT。</p><p>　　T-ALL的共同特征是：下調(diào)表達(dá)T系抗原或出

42、現(xiàn)異?？乖穆?lián)合表達(dá)。</p><p><b>　　B ALL免疫分型</b></p><p>　　急性B淋巴細(xì)胞性白血病可大致分為早前B-ALL，前B-ALL和成熟B-ALL，區(qū)分他們的依據(jù)是免疫球蛋白的表達(dá)及其表達(dá)位置。 具體情況如下：1,成熟B細(xì)胞ALL表達(dá)表面免疫球蛋白（sIg）2,前B細(xì)胞ALL細(xì)胞胞漿內(nèi)表達(dá)免疫球蛋白重鍵(cu)而不表達(dá)輕鏈3,早前B

43、-ALL則兩者都陰性然而上述情況在用于診斷B淋巴細(xì)胞性白血病時(shí)常出現(xiàn)混淆。因?yàn)榘麧{內(nèi)免疫球蛋白重鏈cu在診斷過程中很少被檢測(cè)，從而那些表面Ig陰性的病例全都被歸于前B-ALL。</p><p>　　早前B細(xì)胞型（B-precursor or early pre-B）占兒童急淋的65%左右，占成人的50%左右。 白血病細(xì)胞，根據(jù)形態(tài)對(duì)應(yīng)FAB的L1或L2型，處于B細(xì)胞成長(zhǎng)的最原始階斷。 細(xì)胞小而無(wú)顆粒，流式細(xì)胞分

44、析期細(xì)胞的前向和側(cè)向光信號(hào)很弱；特異性地，其細(xì)胞表面或胞漿內(nèi)不表達(dá)免疫球蛋白。 白血病細(xì)胞通常至少部分地表達(dá)干祖細(xì)胞抗原CD34和不成熟淋巴細(xì)胞抗原HLA-DR或TdT。 另外，少數(shù)罕見病例會(huì)同時(shí)表達(dá)CD10和B細(xì)胞相關(guān)抗原CD19。其他在早前B細(xì)胞型白血病細(xì)胞上表達(dá)的 B細(xì)胞抗原有CD9，CD22和CD24；這些抗原通常在B細(xì)胞成熟的中晚期才表達(dá)。 CD20也是一具有廣泛意義的抗原，但它的表達(dá)變異很大，會(huì)經(jīng)常出現(xiàn)CD20陰性的細(xì)胞；這

45、種混合型表達(dá)CD20與以CD20集中地、高表達(dá)的成熟B細(xì)胞有很大的區(qū)別。早前B白血病細(xì)胞的免疫表型與正常原B細(xì)胞很相似，但白血病細(xì)胞抗原的異常表達(dá)常會(huì)出現(xiàn)：同時(shí)異常地表達(dá)早期和成熟抗原，異常地抗原交叉表達(dá)（特別為髓系抗原），或最常見的為抗原表達(dá)的強(qiáng)度變化。</p><p>　　在兒童ALL中，早前B細(xì)胞白血病的免疫分型與疾病預(yù)后有很大的相關(guān)性，除CD10陰性的腫瘤特別是嬰兒，其預(yù)后一般較好。 嬰兒CD10陰性的白

46、血病事實(shí)上經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)染色體11q23異常,從而導(dǎo)致MLL基因重排，預(yù)后差。其他"11q23異常的白血病"可出現(xiàn)的免疫表型包括表達(dá)髓系抗原CD15并失去抗原CD24。 白血病細(xì)胞通常會(huì)表達(dá)CD34和其他一些髓系抗原，但表達(dá)情況多變。 除表達(dá)髓系抗原外，細(xì)胞還會(huì)強(qiáng)表達(dá)B系抗原CD19。 其他一些預(yù)后比較差的如t(9;22)并由此而形成BCR-ABL融合基因病例，這種情況多見于成人ALL，而兒童相對(duì)少見，由引可解釋為什么

47、成人ALL的預(yù)后較兒童的差。 Ph1染色體陽(yáng)性的病例經(jīng)常會(huì)表達(dá)髓系抗原，這與CD34、CD10、CD19和CD25表達(dá)有重要關(guān)系，但目前尚無(wú)相關(guān)性的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)來定義此亞型。 一些兒童早前B細(xì)胞白血病預(yù)后特別好，除上述病例中超二倍體腫瘤以外，那些伴t(12;21)(p21;q22)的病例預(yù)后也較好。這些易位產(chǎn)生了融合基因TEL/AML1，并主要見于種早前B細(xì)胞白血病，并且好發(fā)于1-10歲的兒童。流式免疫分型發(fā)現(xiàn)，這些病例特異地強(qiáng)表達(dá)CD19

48、，</p><p>　　B-precursor-ALL的腫瘤細(xì)胞FS/SS信號(hào)弱，CD45表達(dá)也不強(qiáng)，有些病例的腫瘤細(xì)胞在CD45/SSC圖中與有核紅細(xì)胞位置相當(dāng)。B-precursor-ALL對(duì)應(yīng)于FAB分型的L1和L2型。</p><p>　　B-precursor-ALL的腫瘤細(xì)胞CD10/CD19強(qiáng)陽(yáng)性，CD33弱陽(yáng)性如使用PE標(biāo)記的CD33抗體檢測(cè)陽(yáng)性增強(qiáng)但不可據(jù)此判定為混

49、合型白血病。</p><p>　　通常根據(jù)CD10表達(dá)與否可將B-precursor-ALL分為兩亞型：CD10+和CD10-，CD10+的病人預(yù)后較好</p><p>　　B-precursor-ALL與B-cell-ALL的區(qū)別在于腫瘤細(xì)胞表面是否表達(dá)免疫球蛋白輕鏈。PRE-B-ALL胞漿重鏈陽(yáng)性而表面免疫球蛋白輕鏈陰性。</p><p>　　如同CD19，

50、HLA-DR在B-ALL中也廣泛表達(dá)，但它沒有特異性。其他有用的指標(biāo)有CD22和CD20，前者幾乎與CD19有相同的特異性而后者弱。CD24在許多B-ALL中表達(dá)，但它在一些AML也表達(dá)。在B-ALL中常見表達(dá)但沒有系別特異的抗原有CD10和CD34。CD34陽(yáng)性在B-precursor-ALL中常見，而在Pre-B或B-ALL則 通常為陰性。</p><p>　　前B細(xì)胞性ALL，被定義為胞漿內(nèi)u重鏈陽(yáng)性，細(xì)

51、胞處于B細(xì)胞成熟的后期階段。 前B細(xì)胞ALL大概占兒童ALL的25%，在成人ALL中的比例很低。與這一亞型相關(guān)的是t(1;19)并產(chǎn)生E2A/PBX1融合基因，并因此而發(fā)生耐藥，預(yù)后較差。 前B 細(xì)胞白血病大概有25%的病例有t(1;19)異位，但在原B細(xì)胞白血病中少見。 ALL伴t(1;19)強(qiáng)表達(dá)CD19，CD10和CD9并CD34陰性，而CD20經(jīng)常缺失或弱表達(dá)，這樣就形成了一個(gè)很特異的免疫表型。大概60%表現(xiàn)以上表型的病例經(jīng)分子

52、生物學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)E2A/PBX1融合產(chǎn)物。而在其他免疫表型中未見此基因重排。流式細(xì)胞分析可成為分子生物學(xué)分析的重要初篩工具。</p><p>　　成熟B細(xì)胞性白血病占全部ALL的2%-5%并包含Burkitt‘s淋巴瘤性白血病。在形態(tài)學(xué)上其對(duì)應(yīng)FAB的L3型，具有比幼稚的B系原始細(xì)胞高的光散射信號(hào)。 它們同時(shí)具有較強(qiáng)的CD45表達(dá)，從而這些細(xì)胞在CD45 vs RALS雙參數(shù)圖中位置接近于更成熟的淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞