農(nóng)桿菌介導(dǎo)的水稻熱激轉(zhuǎn)錄因子基因OsHsfA2的遺傳轉(zhuǎn)化及耐逆性鑒定.pdf

1、干旱、高溫、高鹽等是影響水稻生長(zhǎng)發(fā)育，最終導(dǎo)致產(chǎn)量降低的最主要的環(huán)境脅迫。根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)已成為轉(zhuǎn)化單子葉植物的一種有效手段。水稻成熟胚高頻率植株再生體系也基本建立，可通過導(dǎo)入一個(gè)轉(zhuǎn)錄因子促使多個(gè)功能基因發(fā)揮作用，這是提高作物抗逆性更為效的方法和途徑。人們利用轉(zhuǎn)錄因子的這種特性，在改良植物的抗逆性方面已經(jīng)了很多的嘗試。生物體受到熱脅迫后，會(huì)產(chǎn)生一系列的熱脅迫響應(yīng)，其中熱激基因表達(dá)迅速增加，熱激蛋白會(huì)在體內(nèi)迅速積累。熱激轉(zhuǎn)錄因子是熱脅迫響應(yīng)

2、的主要調(diào)節(jié)因子，通過基因工程技術(shù)過量表達(dá)一些熱激蛋白可以提高植物的耐逆性能力。本研究運(yùn)用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法將連接到過表達(dá)載體和反義表達(dá)載體的熱激轉(zhuǎn)錄因子基因轉(zhuǎn)入水稻，增加或減少水稻中熱激蛋白的表達(dá)量，進(jìn)而初步研究了轉(zhuǎn)基因水稻的耐逆性變化;為通過基因工程的手段提高水稻的抗逆性提供了一定技術(shù)途徑和理論基礎(chǔ)。
　　 本論文的主要研究結(jié)果如下:
　　 1.克隆水稻OsHsfA2基因，并且構(gòu)建其過表達(dá)、反義表達(dá)載體。
　　

3、2.通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)的植物遺傳轉(zhuǎn)化方法將含過表達(dá)、反義的OsHsfA2基因表達(dá)載體導(dǎo)入粳稻品種日本晴，在含有G418的培養(yǎng)基上篩選獲得水稻擬轉(zhuǎn)基因植株。對(duì)其中轉(zhuǎn)基因植株的半定量檢測(cè)分析，證明轉(zhuǎn)化成功。
　　 3.對(duì)具有二葉一心的T1植株在不同逆境脅迫處理下，丙二醛(MDA)含量及電解質(zhì)泄露百分比測(cè)定結(jié)果顯示，過表達(dá)轉(zhuǎn)基因植株的上述指標(biāo)含量均低于野生型，耐逆性均比野生性強(qiáng);反義表達(dá)轉(zhuǎn)基因植株的上述指標(biāo)含量均高于野生型，耐逆性均比野生