農(nóng)桿菌介導(dǎo)的AtMYB44基因的水稻遺傳轉(zhuǎn)化.pdf

1、水稻是最重要的糧食作物之一。培育抗逆品種是水稻品種選育的重要目標(biāo)。近年來，植物轉(zhuǎn)基因技術(shù)的發(fā)展為培育高效抗逆水稻品種開辟了新的途徑。AtMYB44基因是一種來源于擬南芥的新型高效抗逆基因。本研究以皖粳97為研究材料，在優(yōu)化水稻轉(zhuǎn)基因技術(shù)體系的基礎(chǔ)上，用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將AtMYB44基因?qū)胨?，獲得對(duì)非生物脅迫有抗逆性的水稻。主要研究結(jié)果如下：
　　 1．以皖粳97為轉(zhuǎn)化材料，綠色熒光蛋白gfp基因?yàn)閳?bào)告基因，除草劑bar基因?yàn)檫x

2、擇標(biāo)記基因，對(duì)影響農(nóng)桿菌介導(dǎo)水稻的遺傳轉(zhuǎn)化因子進(jìn)行優(yōu)化。通過觀察愈傷組織熒光表達(dá)情況，分析菌液濃度、共培養(yǎng)溫度與共培養(yǎng)時(shí)間對(duì)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化水稻的影響。結(jié)果表明，在OD660值為0.1、共培養(yǎng)21~23℃黑暗條件下，農(nóng)桿菌與水稻愈傷共培養(yǎng)72h，最有利于水稻的遺傳轉(zhuǎn)化，該條件下皖粳97愈傷組織熒光表達(dá)率達(dá)到70.9％。
　　 2．按上述優(yōu)化體系，以bar基因?yàn)檫x擇標(biāo)記基因，通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法，將AtMYB44基因轉(zhuǎn)入水稻皖粳97中。經(jīng)4